| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号缩写说明 | 第7-11页 |
| 第一部分 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 谷胱甘肽的性质与结构 | 第11页 |
| 1.2 谷胱甘肽的生物合成途径 | 第11-12页 |
| 1.2.1 标准途径 | 第11-12页 |
| 1.2.2 双功能酶途径 | 第12页 |
| 1.2.3 替代途径 | 第12页 |
| 1.3 谷胱甘肽的生理功能及应用 | 第12-13页 |
| 1.3.1 谷胱甘肽的生理功能 | 第12-13页 |
| 1.3.2 谷胱甘肽的应用 | 第13页 |
| 1.4 谷胱甘肽的生产方法 | 第13-14页 |
| 1.4.1 萃取法 | 第13页 |
| 1.4.2 化学合成法 | 第13-14页 |
| 1.4.3 酶法合成 | 第14页 |
| 1.4.4 微生物发酵法 | 第14页 |
| 1.5 谷胱甘肽高产工程菌的选育 | 第14-15页 |
| 1.5.1 诱变育种 | 第14页 |
| 1.5.2 基因工程育种 | 第14-15页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 1.7 研究技术路线 | 第16-17页 |
| 第二部分 高产谷胱甘肽工程菌的构建及获得 | 第17-36页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第17-18页 |
| 2.1.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.2 试剂及溶液 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-28页 |
| 2.2.1 主要反应体系 | 第18-19页 |
| 2.2.2 GshF 表达载体的构建 | 第19-25页 |
| 2.2.3 高产谷胱甘肽菌株的获得 | 第25-27页 |
| 2.2.4 GshF 基因拷贝数的确定 | 第27-28页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第28-34页 |
| 2.3.1 GshF 表达载体的构建 | 第28-32页 |
| 2.3.2 酵母电转化及阳性菌株的筛选 | 第32-34页 |
| 2.3.3 GshF 基因拷贝数的确定 | 第34页 |
| 2.4 小结 | 第34-36页 |
| 第三部分 培养条件初步优化 | 第36-40页 |
| 3.1 实验材料与设备 | 第36页 |
| 3.1.1 材料 | 第36页 |
| 3.1.2 试剂及溶液 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 3.2.1 葡萄糖浓度对积累谷胱甘肽和生物量的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.2 氨基酸前体添加对积累谷胱甘肽和生物量的影响 | 第37页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第37-39页 |
| 3.3.1 葡萄糖浓度对积累谷胱甘肽和生物量的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.2 氨基酸前体添加对胞内积累谷胱甘肽和生物量的影响 | 第38-39页 |
| 3.4 小结 | 第39-40页 |
| 第四部分 外泌蛋白（Adp）在高产谷胱甘肽酿酒酵母中的整合高表达 | 第40-48页 |
| 4.1 实验材料与设备 | 第40-41页 |
| 4.1.1 材料 | 第40页 |
| 4.1.2 试剂及溶液 | 第40-41页 |
| 4.1.3 主要仪器与设备 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 w303B/GshF-GAP-SCP 9 | 第41页 |
| 4.2.2 w303B/GshF-GAP-SCP 9 | 第41-42页 |
| 4.2.3 w303B/GshF-GAP-SCP-G418-的谷胱甘肽产量测定 | 第42页 |
| 4.2.4 外泌蛋白（Adp）在高产谷胱甘肽酿酒酵母中的整合 | 第42-43页 |
| 4.2.5 外泌蛋白（Adp）对谷胱甘肽产量的影响 | 第43页 |
| 4.2.6 Adp 基因拷贝数的确定 | 第43-44页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第44-47页 |
| 4.3.1 w303B/GshF-GAP-SCP 9 | 第44页 |
| 4.3.2 w303B/GshF-GAP-SCP-G418-42 | 第44-45页 |
| 4.3.3 外泌蛋白（Adp）在 w303B/GshF-GAP-SCP-G418-42 | 第45-46页 |
| 4.3.4 外泌蛋白（Adp）对谷胱甘肽产量的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.5 Adp 基因拷贝数的确定 | 第47页 |
| 4.4 小结 | 第47-48页 |
| 第五部分 10 L 发酵罐放大实验 | 第48-50页 |
| 5.1 实验材料与设备 | 第48页 |
| 5.1.1 材料 | 第48页 |
| 5.1.2 试剂及溶液 | 第48页 |
| 5.1.3 主要仪器与设备 | 第48页 |
| 5.2 实验方法 | 第48页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第48-49页 |
| 5.4 小结 | 第49-50页 |
| 第六部分 全文总结与讨论 | 第50-52页 |
| 6.1 讨论 | 第50-51页 |
| 6.2 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 论文发表情况 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
