| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 小麦的重要性 | 第11页 |
| 1.2 干旱胁迫在小麦生产中的影响 | 第11-12页 |
| 1.3 植物 miRNA 的研究现状 | 第12-15页 |
| 1.3.1 miRNA 的研究历史 | 第12-13页 |
| 1.3.2 miRNA 的特征 | 第13-14页 |
| 1.3.3 miRNA 的合成及作用机制 | 第14-15页 |
| 1.3.4 植物中 miRNA 功能 | 第15页 |
| 1.4 miRNA 和植物抗逆性关系 | 第15-17页 |
| 1.5 miR159 研究现状 | 第17-18页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第18-32页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第18-20页 |
| 2.1.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第18-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-32页 |
| 2.2.1 拟南芥的种植 | 第20页 |
| 2.2.2 植物基因组 DNA 提取 | 第20-21页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳检测 DNA | 第21页 |
| 2.2.4 miR159 前体的扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶回收目的片段 | 第22-23页 |
| 2.2.6 质粒载体和外源 DNA 的连接反应 | 第23页 |
| 2.2.7 连接产物对大肠杆菌的转化 | 第23-24页 |
| 2.2.8 阳性克隆的筛选和快速鉴定 | 第24页 |
| 2.2.9 细菌在液体培养基中过夜培养 | 第24页 |
| 2.2.10 利用碱裂解法提取质粒 DNA | 第24-25页 |
| 2.2.11 重组质粒 DNA 酶切鉴定 | 第25页 |
| 2.2.12 测序、序列分析 | 第25页 |
| 2.2.13 植物表达载体基本构建思路（图 2-1） | 第25-26页 |
| 2.2.14 Kannibal 中间载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.15 植物表达载体 part 27 的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.16 植物表达载体 part 27-miR159 电转化农杆菌 | 第29-30页 |
| 2.2.17 利用 foral-dipping 法侵染拟南芥 | 第30-31页 |
| 2.2.18 转基因拟南芥的筛选 | 第31页 |
| 2.2.19 Northern blotting 检测 | 第31页 |
| 2.2.20 miR159 的抗旱性分析 | 第31-32页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第32-40页 |
| 3.1 拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第32页 |
| 3.2 miR159 前体的克隆 | 第32-33页 |
| 3.3 pT-miR159 载体的酶切鉴定及序列分析 | 第33-34页 |
| 3.4 miR159 的植物表达载体的构建及鉴定 | 第34-36页 |
| 3.5 miR159 对拟南芥的转化 | 第36-37页 |
| 3.6 miR159 在转基因拟南芥中的表达 | 第37页 |
| 3.7 miR159 的功能分析 | 第37-40页 |
| 3.7.1 miR159 抗旱功能分析 | 第37-39页 |
| 3.7.2 miR159 其他功能分析 | 第39-40页 |
| 第四章 结论 | 第40-41页 |
| 4.1 结论 | 第40页 |
| 4.2 创新点 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 作者简介及硕士期间发表论文 | 第45页 |
