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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP2蛋白B细胞表位和T细胞表位筛选

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 文献综述第12-23页
    1.1 PRRSV的危害第12页
    1.2 PRRSV的分子病原学第12-16页
        1.2.1 形态结构及理化性质第12-13页
        1.2.2 PRRSV的基因组构成第13-14页
        1.2.3 PRRSV的主要结构蛋白第14-15页
        1.2.4 PRRSV的次要囊膜蛋白第15-16页
    1.3 PRRSV的流行病学概述第16-18页
        1.3.1 PRRSV的传播途径第16-17页
        1.3.2 PRRSV的宿主特异性第17页
        1.3.3 PRRSV的感染特征第17-18页
    1.4 PRRSV感染诱导的特异性免疫应答反应第18-19页
        1.4.1 体液免疫第18-19页
        1.4.2 细胞免疫第19页
    1.5 PRRS的防控及诊断第19-20页
        1.5.1 PRRS的防控第19页
        1.5.2 PRRS的诊断第19-20页
    1.6 抗原表位研究进展第20-21页
        1.6.1 PRRSV结构蛋白T细胞表位研究现状第20-21页
        1.6.2 PRRSV结构蛋白B细胞表位研究现状第21页
    1.7 研究目的及意义第21-23页
2 PRRSVGP2蛋白基因扩增及原核表达第23-42页
    2.1 试验材料第23-27页
        2.1.1 病毒株、载体、菌株和细胞第23页
        2.1.2 试验试剂及试剂盒第23-24页
        2.1.3 主要试验仪器与耗材第24页
        2.1.4 试剂配制方法第24-27页
    2.2 试验方法第27-36页
        2.2.1 PRRSVJXA1-R毒株扩繁第27页
        2.2.2 病毒感染力测定第27-29页
        2.2.3 ORF2目的基因获取第29-31页
        2.2.4 克隆载体构建并回收测序第31-33页
        2.2.5 GP2蛋白原核表达载体构建第33-34页
        2.2.6 GP2蛋白的表达纯化与鉴定第34-36页
    2.3 试验结果第36-40页
        2.3.1 病毒感染力测定第36-37页
        2.3.2 ORF2目的基因获取第37页
        2.3.3 ORF2克隆载体鉴定并测序第37-38页
        2.3.4 GP2蛋白表达载体构建第38-39页
        2.3.5 GP2蛋白的表达纯化及WesternBlot鉴定第39-40页
    2.4 讨论第40-41页
    2.5 小结第41-42页
3 PRRSVGP2蛋白B细胞、T细胞表位筛选第42-60页
    3.1 试验材料第42-44页
        3.1.1 病毒株和试验动物第42页
        3.1.2 试验试剂及试剂盒第42-43页
        3.1.3 主要试验仪器与耗材第43页
        3.1.4 试剂配制方法第43-44页
    3.2 试验方法第44-48页
        3.2.1 试验猪PRRSV抗体检测第44页
        3.2.2 试验动物免疫第44-45页
        3.2.3 分离血清样品与外周血单核细胞第45-46页
        3.2.4 GP2蛋白抗体检测第46页
        3.2.5 GP2蛋白重叠多肽设计第46-47页
        3.2.6 GP2蛋白B细胞表位筛选第47页
        3.2.7 B细胞表位保守性分析第47-48页
        3.2.8 GP2蛋白T细胞表位筛选第48页
    3.3 试验结果第48-57页
        3.3.1 试验猪PRRSV抗体检测第48-49页
        3.3.2 GP2蛋白抗体水平检测第49-50页
        3.3.3 GP2蛋白重叠多肽合成第50页
        3.3.4 GP2蛋白B细胞表位筛选第50页
        3.3.5 B细胞表位保守性分析第50-55页
        3.3.6 GP2蛋白T细胞表位筛选第55-57页
    3.4 讨论第57-59页
    3.5 小结第59-60页
4 结论第60-61页
参考文献第61-69页
附录 英文缩略词表第69-70页
致谢第70-71页
个人简历第71页

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