| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第10-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-29页 |
| 1 深色有隔内生真菌( dark septate endophytes,DSE)与植物重金属胁迫 | 第16-17页 |
| 2 ATP结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白研究进展 | 第17-27页 |
| 2.1 ABC转运蛋白结构与分类 | 第18-23页 |
| 2.2 ABC转运蛋白与宿主重金属胁迫耐性 | 第23-25页 |
| 2.3 ABC转运蛋白提高宿主重金属胁迫耐性的机制探讨 | 第25-27页 |
| 3 本文主要研究内容及研究意义 | 第27页 |
| 4 本研究技术路线 | 第27-29页 |
| 第二章 ABC转运蛋白基因生物信息学分析及目标基因筛选 | 第29-63页 |
| 1 前言 | 第29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-39页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第29页 |
| 2.2 主要仪器设备、试剂 | 第29-30页 |
| 2.3 培养基及试剂的配制 | 第30-31页 |
| 2.4 实验方法 | 第31-39页 |
| 2.5 实验数据处理 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-60页 |
| 3.1 基于层pisciphila转录组ABC转运蛋白基因信息分析 | 第39-42页 |
| 3.2 目标ABC转运蛋白基因的筛选 | 第42-44页 |
| 3.3 EpABC1、EpABC2、EpABC3、EpABC16基因的克隆及生物信息学分析 | 第44-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 4.1 qPCR技术与基因筛选 | 第60页 |
| 4.2 生物信息学分析在现代分子生物学研究上的应用 | 第60-61页 |
| 5 小结 | 第61-63页 |
| 第三章 EpABC1、EpABC2和EpABC3表达特性及亚细胞定位分析 | 第63-79页 |
| 1 前言 | 第63页 |
| 2 材料与方法 | 第63-67页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第63页 |
| 2.2 主要仪器设备、试剂及耗材 | 第63-64页 |
| 2.3 实验方法 | 第64-67页 |
| 2.4 实验数据处理 | 第67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-76页 |
| 3.1 不同浓度Pb~(2+)、Zn~(2+)、Cd~(2+)胁迫条件下,E.pisciphila EpABC1、EpABC2、EpABC3表达特性的分析 | 第67-72页 |
| 3.2 EpABC1、EpABC2和EpABC3亚细胞定位分析 | 第72-76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 4.1 ABC转运蛋白基因表达与环境胁迫 | 第76-77页 |
| 4.2 ABC转运蛋白基因亚细胞定位与生物功能之间的关系 | 第77-78页 |
| 5 小结 | 第78-79页 |
| 第四章 酵母异源表达EpABC1、EpABC2、EpABC3功能验证 | 第79-106页 |
| 1 前言 | 第79页 |
| 2 材料与方法 | 第79-86页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第79-80页 |
| 2.2 主要仪器设备、试剂及耗材 | 第80页 |
| 2.3 培养基的配制 | 第80-81页 |
| 2.4 实验方法 | 第81-86页 |
| 2.5 实验数据处理 | 第86页 |
| 3 结果与分析 | 第86-102页 |
| 3.1 酵母表达载体酶切验证结果 | 第86-87页 |
| 3.2 不同浓度的Pb~(2+)对酵母转化子生长的影响 | 第87-91页 |
| 3.3 不同浓度的Zn~(2+)对酵母转化子生长的影响 | 第91-95页 |
| 3.4 不同浓度的Cd~(2+)对酵母转化子生长的影响 | 第95-99页 |
| 3.5 酵母异源表达EpABC1、EpABC2和EpABC3对Pb、Zn、Cd在细胞中积累的影响 | 第99-102页 |
| 4 讨论 | 第102-104页 |
| 4.1 ABC转运蛋白提高宿主重金属胁迫耐性可能作用机制探讨 | 第102-104页 |
| 5 小结 | 第104-106页 |
| 第五章 拟南芥超表达EpABC1、EpABC2、EpABC3功能分析 | 第106-133页 |
| 1 前言 | 第106页 |
| 2 材料与方法 | 第106-116页 |
| 2.1 菌株、质粒及拟南芥种子 | 第106-107页 |
| 2.2 主要仪器设备、试剂及耗材 | 第107页 |
| 2.3 主要培养基的配制 | 第107-108页 |
| 2.4 实验方法 | 第108-115页 |
| 2.5 实验数据处理 | 第115-116页 |
| 3 结果与分析 | 第116-129页 |
| 3.1 拟南芥表达载体酶切验证结果 | 第116页 |
| 3.2 转基因拟南芥TO代植株PCR验证结果 | 第116-117页 |
| 3.3 Cd~(2+)胁迫条件下,转基因拟南芥在平板上生长状况 | 第117-121页 |
| 3.4 Cd~(2+)胁迫条件下,拟南芥超表达EpABC1、EpABC2和EpABC3对幼苗生物量的影响 | 第121-125页 |
| 3.5 Cd~(2+)胁迫条件下,EpABC1、EpABC2和EpABC3在超表达拟南芥mRNA中相对表达量分析 | 第125-126页 |
| 3.6 EpABC1、EpABC2和EpABC3过表达对拟南芥中Cd积累的影响 | 第126-127页 |
| 3.7 转基因拟南芥纯系植株验证 | 第127-129页 |
| 4 讨论 | 第129-131页 |
| 4.1 ABC转运蛋白与逆境胁迫、生物量提高之间的关系 | 第129-130页 |
| 4.2 ABC转运蛋白转录调控与代谢 | 第130-131页 |
| 4.3 表达载体与拟南芥转化效率 | 第131页 |
| 5 小结 | 第131-133页 |
| 第六章 全文总结和展望 | 第133-138页 |
| 1 本文主要结论 | 第133-134页 |
| 2 EpABC1、EpABC2和EpABC3提高宿主重金属耐性作用机制 | 第134-135页 |
| 3 本文主要创新点 | 第135-136页 |
| 3.1 研究工作的开创性 | 第135页 |
| 3.2 DSE重金属耐性相基因结构与功能 | 第135页 |
| 3.3 在DSE基因资源的发掘上属创新性工作 | 第135-136页 |
| 4 展望 | 第136-138页 |
| 4.1 深化EpABC1、EpABC2和EpABC3分子作用机制 | 第136页 |
| 4.2 EpABC1、EpABC2和EpABC3在转基因遗传育种上的应用前景 | 第136-138页 |
| 附录 | 第138-143页 |
| 参考文献 | 第143-167页 |
| 攻读博士学位期间完成的科研成果 | 第167-169页 |
| 致谢 | 第169-170页 |
