| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1.1 关节软骨组织 | 第14-16页 |
| 1.1.1 组成、结构与生理功能 | 第14-15页 |
| 1.1.2 关节软骨损伤 | 第15页 |
| 1.1.3 传统临床治疗策略 | 第15-16页 |
| 1.2 基于细胞的软骨再生治疗策略 | 第16-20页 |
| 1.2.1 自体软骨细胞移植术 | 第16-17页 |
| 1.2.2 基于MSCs的细胞治疗方法 | 第17-18页 |
| 1.2.3 软骨组织工程方法 | 第18-20页 |
| 1.3 应用于软骨再生治疗策略的细胞来源 | 第20-25页 |
| 1.3.1 软骨细胞 | 第20-21页 |
| 1.3.2 MSCs | 第21-23页 |
| 1.3.3 其它细胞类型 | 第23-24页 |
| 1.3.4 混合细胞 | 第24-25页 |
| 1.4 MSCs与ACs共培养应用于关节软骨再生 | 第25-29页 |
| 1.4.1 共培养基本概念 | 第25-26页 |
| 1.4.2 MSCs与ACs共培养 | 第26-29页 |
| 1.5 本文主要研究内容及其目的、意义 | 第29-31页 |
| 第2章 MSCs调控软骨细胞分化表型的普遍性特征 | 第31-47页 |
| 2.1 前言 | 第31-32页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第32-36页 |
| 2.2.1 细胞获取和培养 | 第32-33页 |
| 2.2.2 共培养实验方法 | 第33页 |
| 2.2.3 F-actin染色 | 第33-34页 |
| 2.2.4 GAG和DNA含量测定 | 第34页 |
| 2.2.5 组织化学染色 | 第34页 |
| 2.2.6 免疫荧光染色 | 第34-35页 |
| 2.2.7 实时定量逆转录聚合链式反应 | 第35-36页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第36页 |
| 2.3 结果 | 第36-44页 |
| 2.3.1 rbBMSCs与rbACs共培养 | 第36-40页 |
| 2.3.2 不同种类MSCs与不同种类软骨细胞的共培养 | 第40-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-45页 |
| 2.5 本章小结 | 第45-47页 |
| 第3章 rbBMSCs调控rbACs生物学行为的作用机制 | 第47-79页 |
| 3.1 前言 | 第47-48页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 细胞培养实验方法 | 第48-49页 |
| 3.2.2 F-actin染色 | 第49页 |
| 3.2.3 EdU检测 | 第49页 |
| 3.2.4 细胞计数 | 第49页 |
| 3.2.5 扫描电镜 | 第49页 |
| 3.2.6 GAG和DNA含量测定 | 第49页 |
| 3.2.7 番红-O染色 | 第49页 |
| 3.2.8 免疫荧光染色 | 第49-50页 |
| 3.2.9 RT-PCR | 第50-51页 |
| 3.2.10 统计学分析 | 第51页 |
| 3.3 结果 | 第51-76页 |
| 3.3.1 不同接种量的rbBMSCs与rbACs的共培养 | 第51-56页 |
| 3.3.2 ROCK抑制剂Y27632对共培养效果的影响 | 第56-62页 |
| 3.3.3 VEGFR1/2/3、FGFR1/2/3和PDGFRα/β抑制剂对共培养效果的影响 | 第62-66页 |
| 3.3.4 FGFR1抑制剂PD173074对共培养效果的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.5 生长因子及其组合对rbACs的作用效果 | 第67-74页 |
| 3.3.6 rbBMSCs条件培养基对rbACs的作用效果 | 第74-76页 |
| 3.4 讨论 | 第76-77页 |
| 3.5 本章小结 | 第77-79页 |
| 第4章 与rbBMSCs共培养的rbACs生物学特征系统表征 | 第79-101页 |
| 4.1 前言 | 第79页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第79-84页 |
| 4.2.1 共培养的rbACs再培养 | 第79-80页 |
| 4.2.2 成软骨诱导分化 | 第80页 |
| 4.2.3 细胞死活染色 | 第80页 |
| 4.2.4 组织化学染色 | 第80-81页 |
| 4.2.5 RT-PCR | 第81页 |
| 4.2.6 流式细胞仪检测 | 第81-82页 |
| 4.2.7 RNA Sequencing检测 | 第82页 |
| 4.2.8 qRT-PCR验证 | 第82-83页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第83-84页 |
| 4.3 结果 | 第84-98页 |
| 4.3.1 共培养后rbACs的传代培养 | 第84-86页 |
| 4.3.2 共培养后rbACs的成软骨诱导分化 | 第86-89页 |
| 4.3.3 共培养rbACs的表面分子表达特性 | 第89-92页 |
| 4.3.4 共培养rbACs的全基因表达谱分析 | 第92-98页 |
| 4.4 讨论 | 第98-100页 |
| 4.5 本章小结 | 第100-101页 |
| 第5章 复杂共培养模型中rbBMSCs对rbACs的调控作用 | 第101-113页 |
| 5.1 前言 | 第101页 |
| 5.2 实验材料和方法 | 第101-103页 |
| 5.2.1 rbBMSCs和rbACs混合共培养实验 | 第101页 |
| 5.2.2 海藻酸钙凝胶微球包裹细胞以及共培养实验 | 第101-102页 |
| 5.2.3 细胞死活染色 | 第102页 |
| 5.2.4 组织化学染色 | 第102页 |
| 5.2.5 GAG和DNA含量测定 | 第102页 |
| 5.2.6 qRT-PCR | 第102页 |
| 5.2.7 统计学分析 | 第102-103页 |
| 5.3 结果 | 第103-111页 |
| 5.3.1 rbBMSCs和rbACs直接混合共培养 | 第103-105页 |
| 5.3.2 海藻酸钙凝胶微球包裹rbBMSCs和rbACs的间接共培养 | 第105-111页 |
| 5.4 讨论 | 第111-112页 |
| 5.5 本章小结 | 第112-113页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第113-116页 |
| 参考文献 | 第116-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 研究成果 | 第129页 |
