中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 同源二聚体 | 第12-14页 |
1.1.1 同源二聚体的研究发现 | 第12页 |
1.1.2 同源二聚体的应用进展 | 第12-13页 |
1.1.3 重组抗原亚单位疫苗的研究 | 第13-14页 |
1.2 TgDLC8a的研究 | 第14页 |
1.3 鸡球虫概述 | 第14-16页 |
1.3.1 抗鸡球虫感染的免疫机制 | 第15页 |
1.3.2 鸡球虫抗原蛋白研究 | 第15页 |
1.3.3 新型球虫疫苗的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-41页 |
2.1 试验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 试验菌株、寄生虫株与载体 | 第18页 |
2.1.2 试验动物 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂与药品 | 第18页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第18页 |
2.1.5 试剂的配制 | 第18-19页 |
2.2 试验方法 | 第19-41页 |
2.2.1 引物设计 | 第19页 |
2.2.2 TgDLC8a-GST多聚体的构建 | 第19-26页 |
2.2.3 重组多聚体表达平台外源表达基因插入位点的构建 | 第26-30页 |
2.2.4 TgDLC8a-GST多聚体复合物表达载体插入鸡球虫抗原基因的构建与鉴定 | 第30-35页 |
2.2.5 多聚体鸡球虫抗原表达蛋白质复合物作为疫苗的应用与评价 | 第35-41页 |
3 结果与分析 | 第41-51页 |
3.1 TgDLC8a-GST多聚体的构建及其表达复合物的鉴定 | 第41-42页 |
3.1.1 TgDLC8a-GST多聚体的构建 | 第41页 |
3.1.2 TgDLC8a-GST多聚体表达二聚体及多聚体复合物的鉴定 | 第41-42页 |
3.2 重组多聚体表达平台外源表达基因插入位点的构建 | 第42-44页 |
3.2.1 TgDLC8a基因的分析及酶切位点的选取 | 第42页 |
3.2.2 插入酶切位点BamHI和SmaI的创建与鉴定 | 第42-44页 |
3.2.3 新建酶切位点对形成多聚体的影响 | 第44页 |
3.3 TgDLC8a-GST多聚体复合物表达载体插入鸡球虫抗原基因的构建与鉴定 | 第44-47页 |
3.3.1 多聚体复合物表达载体插入鸡球虫MIC2基因的鉴定 | 第44-45页 |
3.3.2 多聚体复合物表达载体插入鸡球虫MIC2、MIC1H基因的鉴定 | 第45-46页 |
3.3.3 多聚体插入鸡球虫MIC2、MIC1H基因后蛋白质复合物共同表达的鉴定 | 第46-47页 |
3.4 多聚体鸡球虫抗原表达蛋白质复合物作为疫苗的应用与评价 | 第47-51页 |
3.4.1 体重增长情况 | 第47页 |
3.4.2 卵囊排出 | 第47页 |
3.4.3 盲肠病变计分 | 第47-48页 |
3.4.4 抗球虫指数(ACI) | 第48页 |
3.4.5 血清IgG抗体检测 | 第48-49页 |
3.4.6 盲肠黏膜sIgA抗体水平检测结果 | 第49页 |
3.4.7 外周血T淋巴细胞增值试验 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
4.1 重组蛋白复合物可以作为载体表达抗原 | 第51-52页 |
4.2 单个多价复合物载体表达两个球虫蛋白有助于增强免疫原性 | 第52页 |
4.3 佐剂对蛋白保护效果的影响 | 第52-53页 |
4.4 血液抗体及T淋巴细胞在抗球虫感染免疫保护中的作用 | 第53-54页 |
4.5 盲肠黏膜在球虫免疫中的作用以及抗体水平的变化 | 第54-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附录 | 第63-66页 |
致谢 | 第66页 |