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TgDLC8a-GST多聚体蛋白复合物表达载体的构建及其在鸡球虫疫苗上的应用

中文摘要第9-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-18页
    1.1 同源二聚体第12-14页
        1.1.1 同源二聚体的研究发现第12页
        1.1.2 同源二聚体的应用进展第12-13页
        1.1.3 重组抗原亚单位疫苗的研究第13-14页
    1.2 TgDLC8a的研究第14页
    1.3 鸡球虫概述第14-16页
        1.3.1 抗鸡球虫感染的免疫机制第15页
        1.3.2 鸡球虫抗原蛋白研究第15页
        1.3.3 新型球虫疫苗的研究进展第15-16页
    1.4 本研究的目的和意义第16-18页
2 材料与方法第18-41页
    2.1 试验材料第18-19页
        2.1.1 试验菌株、寄生虫株与载体第18页
        2.1.2 试验动物第18页
        2.1.3 主要试剂与药品第18页
        2.1.4 主要仪器设备第18页
        2.1.5 试剂的配制第18-19页
    2.2 试验方法第19-41页
        2.2.1 引物设计第19页
        2.2.2 TgDLC8a-GST多聚体的构建第19-26页
        2.2.3 重组多聚体表达平台外源表达基因插入位点的构建第26-30页
        2.2.4 TgDLC8a-GST多聚体复合物表达载体插入鸡球虫抗原基因的构建与鉴定第30-35页
        2.2.5 多聚体鸡球虫抗原表达蛋白质复合物作为疫苗的应用与评价第35-41页
3 结果与分析第41-51页
    3.1 TgDLC8a-GST多聚体的构建及其表达复合物的鉴定第41-42页
        3.1.1 TgDLC8a-GST多聚体的构建第41页
        3.1.2 TgDLC8a-GST多聚体表达二聚体及多聚体复合物的鉴定第41-42页
    3.2 重组多聚体表达平台外源表达基因插入位点的构建第42-44页
        3.2.1 TgDLC8a基因的分析及酶切位点的选取第42页
        3.2.2 插入酶切位点BamHI和SmaI的创建与鉴定第42-44页
        3.2.3 新建酶切位点对形成多聚体的影响第44页
    3.3 TgDLC8a-GST多聚体复合物表达载体插入鸡球虫抗原基因的构建与鉴定第44-47页
        3.3.1 多聚体复合物表达载体插入鸡球虫MIC2基因的鉴定第44-45页
        3.3.2 多聚体复合物表达载体插入鸡球虫MIC2、MIC1H基因的鉴定第45-46页
        3.3.3 多聚体插入鸡球虫MIC2、MIC1H基因后蛋白质复合物共同表达的鉴定第46-47页
    3.4 多聚体鸡球虫抗原表达蛋白质复合物作为疫苗的应用与评价第47-51页
        3.4.1 体重增长情况第47页
        3.4.2 卵囊排出第47页
        3.4.3 盲肠病变计分第47-48页
        3.4.4 抗球虫指数(ACI)第48页
        3.4.5 血清IgG抗体检测第48-49页
        3.4.6 盲肠黏膜sIgA抗体水平检测结果第49页
        3.4.7 外周血T淋巴细胞增值试验第49-51页
4 讨论第51-55页
    4.1 重组蛋白复合物可以作为载体表达抗原第51-52页
    4.2 单个多价复合物载体表达两个球虫蛋白有助于增强免疫原性第52页
    4.3 佐剂对蛋白保护效果的影响第52-53页
    4.4 血液抗体及T淋巴细胞在抗球虫感染免疫保护中的作用第53-54页
    4.5 盲肠黏膜在球虫免疫中的作用以及抗体水平的变化第54-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63-66页
致谢第66页

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