摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
前言 | 第14-19页 |
第一章 检测ELF对脐带MSCs生长状况及免疫特性的影响 | 第19-36页 |
1.1 引言 | 第19页 |
1.2 实验材料 | 第19-21页 |
1.2.1 实验对象 | 第19-20页 |
1.2.2 主要试剂 | 第20页 |
1.2.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
1.3 实验方法 | 第21-27页 |
1.3.1 脐带MSCs的获取 | 第21页 |
1.3.2 磁场处理MSCs | 第21-22页 |
1.3.3 细胞形态的观察及免疫荧光标记法检测细胞骨架 | 第22-23页 |
1.3.4 流式细胞仪检测MSCs表面标志的变化 | 第23-24页 |
1.3.5 细胞周期的检测 | 第24页 |
1.3.6 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡 | 第24-25页 |
1.3.7 CCK-8法检测细胞活力 | 第25页 |
1.3.8 Real-time PCR检测MSCs分泌的细胞因子的变化 | 第25-27页 |
1.3.9 数据统计分析 | 第27页 |
1.4 实验结果与分析 | 第27-34页 |
1.4.1 成功获取脐带来源MSCs | 第27-29页 |
1.4.2 ELF对MSCs细胞形态及细胞骨架没有影响 | 第29-30页 |
1.4.3 ELF对MSCs表面标志没有影响 | 第30-31页 |
1.4.4 ELF对MSCs细胞周期没有影响 | 第31-32页 |
1.4.5 ELF对MSCs细胞凋亡没有影响 | 第32-33页 |
1.4.6 ELF对MSCs细胞活力没有影响 | 第33-34页 |
1.4.7 ELF对MSCs免疫调节功能没有影响 | 第34页 |
1.5 讨论 | 第34-36页 |
第二章 ELF对脐带MSCs成骨成脂诱导分化的影响 | 第36-49页 |
2.1 引言 | 第36-37页 |
2.2 实验材料 | 第37-38页 |
2.2.1 实验对象 | 第37页 |
2.2.2 主要试剂 | 第37-38页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第38页 |
2.3 实验方法 | 第38-44页 |
2.3.1 脐带来源间充质干细胞的分离及纯化 | 第38-39页 |
2.3.2 脐带来源间充质干细胞的成骨成脂分化的诱导 | 第39-40页 |
2.3.3 暴磁处理 | 第40页 |
2.3.4 染色法检测MSCs的成骨成脂诱导分化 | 第40页 |
2.3.5 Q-PCR检测成骨成脂诱导相关基因的表达 | 第40-42页 |
2.3.6 细胞免疫荧光检测成脂诱导相关蛋白PPARγ2的表达 | 第42-43页 |
2.3.7 Western blot检测蛋白表达 | 第43-44页 |
2.4 实验结果与分析 | 第44-48页 |
2.4.1 Alizarin Red S染色法和Oil Red O染色法显示ELF对MSCs成骨分化无影响,但能够抑制MSCs的成脂分化 | 第44-45页 |
2.4.2 ELF对成骨分化的关键基因的表达无影响,但能抑制成脂分化关键基因的表达 | 第45-46页 |
2.4.3 ELF抑制MSCs成脂分化关键分子PPARγ2的蛋白表达 | 第46-47页 |
2.4.4 ELF抑制MSCs成脂分化的机制 | 第47-48页 |
2.5 讨论 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录 | 第56-59页 |
硕士期间科研成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |