| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 地黄研究现状 | 第11-13页 |
| 1.1.1 地黄化学成分的研究 | 第11页 |
| 1.1.2 地黄组培的研究 | 第11-12页 |
| 1.1.3 地黄组织结构的研究 | 第12页 |
| 1.1.4 地黄分子水平的研究 | 第12-13页 |
| 1.2 DNA甲基化的研究概况 | 第13-17页 |
| 1.2.1 DNA甲基化的发生机制 | 第13-14页 |
| 1.2.2 DNA甲基化的研究方法 | 第14-16页 |
| 1.2.3 DNA甲基化对植物生长发育的调控 | 第16-17页 |
| 1.3 DNA甲基化抑制剂及其在植物中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 引物 | 第19页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第19页 |
| 2.1.4 实验试剂及药品 | 第19-21页 |
| 2.1.5 主要试剂配方 | 第21-23页 |
| 2.2 实验材料的处理和取材 | 第23-24页 |
| 2.2.1 地黄的处理和种植 | 第23-24页 |
| 2.2.2 5-azaC处理对地黄植株形态的影响 | 第24页 |
| 2.3 地黄梓醇含量的HPLC法检测 | 第24页 |
| 2.3.1 实验材料处理 | 第24页 |
| 2.3.2 色谱分析条件 | 第24页 |
| 2.3.3 结果统计分析 | 第24页 |
| 2.4 地黄基因组甲基化的HPLC法检测 | 第24-26页 |
| 2.4.1 基因组DNA提取 | 第24-25页 |
| 2.4.2 基因组DNA质量检测 | 第25-26页 |
| 2.4.3 基因组DNA的水解 | 第26页 |
| 2.4.4 色谱分析条件 | 第26页 |
| 2.4.5 结果统计分析 | 第26页 |
| 2.5 地黄基因组甲基化的MSAP分析 | 第26-33页 |
| 2.5.1 酶切反应 | 第26-27页 |
| 2.5.2 接头、引物浓度和稀释方法 | 第27页 |
| 2.5.3 连接反应 | 第27-28页 |
| 2.5.4 预扩增反应 | 第28-29页 |
| 2.5.5 选择性扩增反应 | 第29-30页 |
| 2.5.6 聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第30-31页 |
| 2.5.7 差异片段的回收与纯化 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-69页 |
| 3.1 地黄生长发育指标的测定 | 第33-36页 |
| 3.1.1 产地对地黄生长发育的影响 | 第33-34页 |
| 3.1.2 5-azaC对地黄生长发育的影响 | 第34-36页 |
| 3.2 地黄梓醇含量的测定 | 第36-42页 |
| 3.2.1 梓醇对照品的制备及线性方程的绘制 | 第36-37页 |
| 3.2.2 精密度、重复性及稳定性检测 | 第37-38页 |
| 3.2.3 地黄梓醇含量的测定 | 第38页 |
| 3.2.4 地黄梓醇含量的分析 | 第38-42页 |
| 3.3 5-azaC对地黄基因组甲基化程度的影响 | 第42-48页 |
| 3.3.1 地黄基因组DNA的提取 | 第42页 |
| 3.3.2 标准品溶液的配制及线性方程的绘制 | 第42-44页 |
| 3.3.3 精密度、重复性及稳定性检测 | 第44页 |
| 3.3.4 地黄基因组甲基化程度的测定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 地黄基因组甲基化程度的分析 | 第45-48页 |
| 3.4 5-azaC对地黄基因组甲基化模式的影响 | 第48-64页 |
| 3.4.1 地黄基因组MSAP的扩增 | 第48-51页 |
| 3.4.2 产地对地黄基因组甲基化水平的影响 | 第51-54页 |
| 3.4.3 5-azaC对地黄基因组甲基化水平的影响 | 第54-61页 |
| 3.4.4 地黄基因组DNA的甲基化状态 | 第61-64页 |
| 3.5 DNA甲基化差异性条带 | 第64-69页 |
| 3.5.1 DNA甲基化差异性条带的分析 | 第64-66页 |
| 3.5.2 目的序列M8的生物信息学分析 | 第66-69页 |
| 4 讨论 | 第69-73页 |
| 4.1 产地对地黄基因组DNA甲基化的影响 | 第69-70页 |
| 4.2 DNA甲基化对地黄生长发育的影响 | 第70-71页 |
| 4.3 DNA甲基化对地黄梓醇积累的影响 | 第71-73页 |
| 5 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第85-87页 |