摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-22页 |
1.1 口蹄疫概述 | 第13页 |
1.2 口蹄疫病毒流行病学 | 第13-14页 |
1.3 病原学 | 第14-16页 |
1.3.1 病毒形态及理化特性 | 第14页 |
1.3.2 病毒基因组结构及功能 | 第14-15页 |
1.3.3 病毒基因组 5’端结构及功能 | 第15页 |
1.3.4 病毒聚蛋白编码区 | 第15-16页 |
1.3.5 病毒 3’端 | 第16页 |
1.4 FMDV诊断技术研究进展 | 第16-21页 |
1.4.1 病原分离技术 | 第17页 |
1.4.2 病毒中和试验 | 第17页 |
1.4.3 补体结合试验 | 第17-18页 |
1.4.4 酶联免疫吸附试验 | 第18-19页 |
1.4.5 琼脂扩散试验 | 第19页 |
1.4.6 免疫荧光实验 | 第19页 |
1.4.7 反转录-聚合酶链式反应 | 第19-20页 |
1.4.8 实时定量RT-PCR | 第20页 |
1.4.9 环介导的等温扩增技术 | 第20-21页 |
1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 南非型口蹄疫病毒目的基因 1D2A2B片段的筛选、合成与鉴定 | 第22-32页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 主要试剂 | 第22页 |
2.1.2 主要生物信息学软件 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第22页 |
2.1.4 实验所需溶液及其配制方法 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-26页 |
2.2.1 SAT-FMDV 1D2A2B目的片段序列筛选与合成 | 第23-24页 |
2.2.2 合成SAT-FMDV 1D2A2B目的片段的鉴定 | 第24-26页 |
2.3 实验结果 | 第26-30页 |
2.3.1 SAT-FMDV全基因组序列相似性比对结果 | 第26-29页 |
2.3.2 重组质粒鉴定结果 | 第29-30页 |
2.3.3 重组质粒序列测定结果 | 第30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 南非型口蹄疫病毒常规RT-PCR检测方法的建立 | 第32-50页 |
3.1 实验材料 | 第32-33页 |
3.1.1 质粒、病毒 | 第32页 |
3.1.2 主要生物试剂 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-41页 |
3.2.1 引物设计 | 第33页 |
3.2.2 模板制备 | 第33页 |
3.2.3 常规PCR扩增 | 第33-34页 |
3.2.4 常规PCR产物进行检测 | 第34页 |
3.2.5 特异性测定 | 第34-39页 |
3.2.6 敏感性测定 | 第39-41页 |
3.2.7 临床样品检测 | 第41页 |
3.3 实验结果 | 第41-49页 |
3.3.1 常规PCR结果 | 第41-42页 |
3.3.2 特异性检测 | 第42-44页 |
3.3.3 灵敏度检测结果 | 第44-47页 |
3.3.4 临床样品检测结果 | 第47-49页 |
3.4 讨论 | 第49-50页 |
第四章 SAT-FMDV RT-PCR检测试剂盒的初步研制 | 第50-55页 |
4.1 实验材料 | 第50页 |
4.1.1 菌种、质粒 | 第50页 |
4.1.2 主要生物试剂 | 第50页 |
4.2 实验方法 | 第50-51页 |
4.2.1 制造试剂盒用试剂的制备 | 第50-51页 |
4.2.2 试剂盒组装 | 第51页 |
4.2.3 试剂盒稳定性检测 | 第51页 |
4.3 实验结果 | 第51-54页 |
4.3.1 第一个月时试剂盒稳定性检测结果 | 第51-52页 |
4.3.2 第二个月时试剂盒稳定性检测结果 | 第52页 |
4.3.3 第三个月时试剂盒稳定性检测结果 | 第52-53页 |
4.3.4 第六个月时试剂盒稳定性检测结果 | 第53-54页 |
4.4 结论 | 第54-55页 |
第五章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简历 | 第75页 |