摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-24页 |
1.1 油菜杂种优势利用 | 第14-16页 |
1.1.1 细胞质雄性不育系 | 第14页 |
1.1.2 细胞核雄性不育系 | 第14-15页 |
1.1.3 光温敏雄性不育系 | 第15-16页 |
1.2 花药败育的细胞学研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 花药发育的过程 | 第16页 |
1.2.2 花药败育的细胞学特征 | 第16-17页 |
1.2.3 导致花药败育的原因 | 第17-20页 |
1.3 细胞核雄性不育相关基因的定位与克隆 | 第20-21页 |
1.3.1 S45A相关基因的定位与克隆 | 第20页 |
1.3.2 9012A相关基因的定位与克隆 | 第20页 |
1.3.3 TE5A相关基因的定位与克隆 | 第20-21页 |
1.4 酵母双杂交技术 | 第21-22页 |
1.4.1 酵母双杂交cDNA文库 | 第21页 |
1.4.2 酵母双杂交技术的原理 | 第21-22页 |
1.4.3 酵母双杂交技术的应用 | 第22页 |
1.5 本研究的主要内容与目的意义 | 第22-24页 |
1.5.1 本研究的主要内容 | 第22页 |
1.5.2 本研究的目的意义 | 第22-24页 |
第二章 不育系TE5A花药发育的细胞学研究 | 第24-32页 |
2.1 材料与方法 | 第24-25页 |
2.1.1 试验材料 | 第24页 |
2.1.2 实验方法 | 第24-25页 |
2.2 结果与分析 | 第25-30页 |
2.2.0 TE5A花朵形态学观察 | 第25-26页 |
2.2.1 不育系TE5A花粉活力的检测 | 第26-27页 |
2.2.2 不育系TE5A半薄切片观察 | 第27-29页 |
2.2.3 不育系TE5A透射电镜观察 | 第29页 |
2.2.4 不育系TE5A脂染色观察 | 第29-30页 |
2.3 讨论 | 第30-31页 |
2.4 小结 | 第31-32页 |
第三章 不育系TE5A染色体行为观察 | 第32-39页 |
3.1 材料与方法 | 第32-33页 |
3.1.1 实验材料 | 第32页 |
3.1.2 不育系TE5A石蜡切片的DAPI染色 | 第32页 |
3.1.3 不育系TE5A染色体展片的制作 | 第32-33页 |
3.2 结果与分析 | 第33-37页 |
3.2.1 不育系TE5A石蜡切片染色体观察 | 第33-35页 |
3.2.2 不育系TE5A减数分裂过程中染色体的变化 | 第35-37页 |
3.3 讨论 | 第37页 |
3.4 小结 | 第37-39页 |
第四章 不育系TE5A幼蕾酵母双杂交CDNA文库的构建 | 第39-46页 |
4.1 材料与方法 | 第39-42页 |
4.1.1 实验材料 | 第39页 |
4.1.2 实验试剂 | 第39页 |
4.1.3 引物 | 第39-40页 |
4.1.4 RNA的提取 | 第40页 |
4.1.5 双链cDNA的合成 | 第40页 |
4.1.6 pGADT7载体的改造 | 第40-41页 |
4.1.7 初始cDNA文库的构建、扩增及质量鉴定 | 第41-42页 |
4.1.8 酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第42页 |
4.1.9 酵母双杂交cDNA文库的质量鉴定 | 第42页 |
4.2 结果与分析 | 第42-45页 |
4.2.1 总RNA的提取 | 第42-43页 |
4.2.2 双链cDNA的合成 | 第43页 |
4.2.3 大肠杆菌cDNA文库构建 | 第43-44页 |
4.2.4 Y187酵母双杂交cDNA文库构建及质量鉴定 | 第44-45页 |
4.3 讨论 | 第45页 |
4.4 小结 | 第45-46页 |
第五章 利用酵母双杂交技术筛选互作蛋白 | 第46-53页 |
5.1 材料与方法 | 第46-48页 |
5.1.1 实验材料 | 第46页 |
5.1.2 实验试剂 | 第46页 |
5.1.3 引物 | 第46-47页 |
5.1.4 诱饵蛋白载体的构建 | 第47页 |
5.1.5 诱饵载体的蛋白表达检测 | 第47页 |
5.1.6 诱饵蛋白毒性及自激活活性检测 | 第47-48页 |
5.1.7 酵母文库筛选 | 第48页 |
5.1.8 文库阳性克隆的鉴定 | 第48页 |
5.1.9 阳性克隆的测序和生物信息学分析 | 第48页 |
5.2 结果与分析 | 第48-51页 |
5.2.1 诱饵载体的构建及表达检测 | 第48-49页 |
5.2.2 诱饵蛋白毒性检测及自激活检测 | 第49-50页 |
5.2.3 酵母文库筛选 | 第50-51页 |
5.3 讨论 | 第51-52页 |
5.4 小结 | 第52-53页 |
第六章 全文结论 | 第53-55页 |
6.1 不育系TE5A花药败育的细胞学观察 | 第53页 |
6.2 不育系TE5A染色体行为观察 | 第53页 |
6.3 不育系TE5A幼蕾酵母双杂交CDNA文库的构建 | 第53-54页 |
6.4 利用酵母双杂交技术筛选互作蛋白 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |