| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 总体研究方案 | 第12-13页 |
| 第一部分 HSV-2 gC真核表达载体的构建 | 第13-27页 |
| 材料与方法 | 第13-21页 |
| 一、实验材料 | 第13-14页 |
| 二、化学合成基因的设计原则 | 第14页 |
| 三、真核表达载体构建 | 第14-21页 |
| 结果 | 第21-25页 |
| 一、优化合成HSV-2 gC蛋白胞外区基因序列 | 第21-22页 |
| 二、真核表达载体的构建与鉴定 | 第22-25页 |
| 分析与讨论 | 第25-27页 |
| 第二部分 稳定高表达HSV-2 gC细胞株的建立 | 第27-44页 |
| 材料与方法 | 第27-35页 |
| 一、实验材料 | 第27-28页 |
| 二、质粒的大量提取 | 第28-29页 |
| 三、瞬时表达评估 | 第29-32页 |
| 四、稳定细胞系的构建 | 第32-34页 |
| 五、筛选细胞的稳定性检测 | 第34-35页 |
| 结果 | 第35-41页 |
| 一、瞬时表达评估 | 第35页 |
| 二、高表达重组gC_2蛋白细胞株的筛选 | 第35-37页 |
| 三、筛选细胞的稳定性检测和表达量估计 | 第37-41页 |
| 分析与讨论 | 第41-44页 |
| 第三部分 稳定高表达细胞株的无血清悬浮培养及表达蛋白的纯化鉴定 | 第44-66页 |
| 材料与方法 | 第44-49页 |
| 一、实验材料 | 第44-45页 |
| 二、稳定高表达gC_2蛋白细胞株的无血清悬浮培养（fed-batch） | 第45页 |
| 三、重组gC_2蛋白的小量纯化（条件摸索） | 第45-47页 |
| 四、重组gC_2蛋白的大量纯化 | 第47-49页 |
| 结果 | 第49-64页 |
| 一、clone24细胞fed-batch培养 | 第49-50页 |
| 二、重组gC_2蛋白的小量纯化 | 第50-56页 |
| 三、重组gC_2蛋白的扩大纯化 | 第56-64页 |
| 分析与讨论 | 第64-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 综述 蛋白在哺乳动物细胞中稳定高效表达的研究进展 | 第73-94页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第94-96页 |
| 一、发表论文 | 第94页 |
| 三、申报发明专利 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96页 |