| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第14-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-31页 |
| 1.1 植物蛋白激酶 | 第15-17页 |
| 1.1.1 蛋白激酶概述 | 第15页 |
| 1.1.2 蛋白激酶的种类与分类 | 第15-16页 |
| 1.1.3 蛋白激酶的结构 | 第16页 |
| 1.1.4 蛋白激酶的功能 | 第16-17页 |
| 1.2 植物酪蛋白激酶 | 第17-21页 |
| 1.2.1 植物酪蛋白激酶概述 | 第17-18页 |
| 1.2.2 植物酪蛋白激酶CK1 | 第18-19页 |
| 1.2.3 植物酪蛋白激酶CK2 | 第19-21页 |
| 1.3 类受体蛋白激酶 | 第21-22页 |
| 1.4 凝集素类受体蛋白激酶(LecRK) | 第22-25页 |
| 1.4.1 LecRK的结构 | 第22-23页 |
| 1.4.2 LecRK的信号转导途径 | 第23页 |
| 1.4.3 LecRK的生理功能 | 第23-25页 |
| 1.5 ABA与植物抗逆性 | 第25页 |
| 1.5.1 ABA与植物抗盐胁迫 | 第25页 |
| 1.5.2 ABA与植物的抗旱性 | 第25页 |
| 1.5.3 ABA与植物的抗冻性 | 第25页 |
| 1.6 蛋白质组学研究 | 第25-29页 |
| 1.6.1 蛋白质组学简介 | 第26页 |
| 1.6.2 植物蛋白质组学 | 第26-27页 |
| 1.6.3 蛋白质组学的主要研究方法 | 第27-28页 |
| 1.6.4 拟南芥蛋白质组学的研究 | 第28-29页 |
| 1.7 本论文的目的、意义与内容 | 第29-31页 |
| 第2章 拟南芥LecRK-ConA基因功能的初步研究 | 第31-45页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第31页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 2.2.1 转录调控区域元件分析 | 第32页 |
| 2.2.2 拟南芥种子的春化 | 第32页 |
| 2.2.3 拟南芥的播种以及生长条件 | 第32-33页 |
| 2.2.4 对拟南芥各组织取材 | 第33页 |
| 2.2.5 引物的设计与合成 | 第33页 |
| 2.2.6 植物基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.7 三引物法鉴定缺失突变体的纯合子 | 第34页 |
| 2.2.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
| 2.2.9 植物总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.10 总RNA中去除基因组DNA | 第36页 |
| 2.2.11 cDNA第一条链的合成 | 第36-37页 |
| 2.2.12 实时定量PCR的方法 | 第37页 |
| 2.2.13 使用ABA胁迫处理野生型植株 | 第37页 |
| 2.2.14 甘露醇、NaCl胁迫下的萌发率的统计 | 第37-38页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 2.3.1 拟南芥LecRK-ConA基因转录区域调控元件的分析一 | 第38-39页 |
| 2.3.2 ABA诱导拟南芥LecRK-ConA基因表达情况 | 第39页 |
| 2.3.3 拟南芥LecRK-ConA基因的组织表达情况 | 第39-40页 |
| 2.3.4 两种T-DNA插入突变体的鉴定 | 第40页 |
| 2.3.5 T-DNA的插入位点 | 第40-41页 |
| 2.3.6 拟南芥LecRK-ConA基因突变体萌发率的测定 | 第41-42页 |
| 2.3.7 野生型Col-0与突变体表型观察 | 第42-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-45页 |
| 第3章 拟南芥CKB1基因功能的初步研究 | 第45-70页 |
| 3.1 实验材料、试剂与仪器 | 第45-47页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第46-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-60页 |
| 3.2.1 CKB1基因转录调控区域元件分析 | 第47页 |
| 3.2.2 CKB1基因时空表达的特异性分析 | 第47页 |
| 3.2.3 拟南芥CK2家族基因系统进化树的构建 | 第47页 |
| 3.2.4 CKB1蛋白质亚细胞定位分析 | 第47页 |
| 3.2.5 CKB1蛋白质跨膜结构域的预测 | 第47-48页 |
| 3.2.6 拟南芥种子的春化 | 第48页 |
| 3.2.7 拟南芥的播种以及生长条件 | 第48页 |
| 3.2.8 植物基因组DNA的提取 | 第48-49页 |
| 3.2.9 高保真酶PCR | 第49页 |
| 3.2.10 质粒DNA的提取 | 第49-50页 |
| 3.2.11 PCR产物的回收 | 第50-51页 |
| 3.2.12 DNA的纯化 | 第51页 |
| 3.2.13 三引物法鉴定缺失突变体的纯合子 | 第51-52页 |
| 3.2.14 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第52-53页 |
| 3.2.15 农杆菌感受态细胞的制备 | 第53页 |
| 3.2.16 过表达载体的构建 | 第53-55页 |
| 3.2.17 植物总RNA的提取 | 第55-56页 |
| 3.2.18 总RNA中去除基因组DNA | 第56页 |
| 3.2.19 cDNA第一条链的合成 | 第56-57页 |
| 3.2.20 实时荧光定量PCR (Q-PCR)检测 | 第57页 |
| 3.2.21 拟南芥总蛋白质的提取 | 第57页 |
| 3.2.22 蛋白质含量的测定 | 第57-58页 |
| 3.2.23 固相pH梯度双向凝胶电泳 | 第58-59页 |
| 3.2.24 2D-PAGE电泳胶的染色与脱色 | 第59页 |
| 3.2.25 差异蛋白点的酶解 | 第59页 |
| 3.2.26 MALDI-TOF-TOF肽质谱指纹图分析 | 第59页 |
| 3.2.27 数据库查询 | 第59-60页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第60-68页 |
| 3.3.1 CKB1基因转录调控区域元件分析 | 第60页 |
| 3.3.2 CKB1基因时空表达的特异性分析 | 第60-61页 |
| 3.3.3 拟南芥CK2家族基因系统进化树的构建 | 第61-62页 |
| 3.3.4 CKB1蛋白质的亚细胞定位分析 | 第62-63页 |
| 3.3.5 CKB1蛋白质跨膜结构域的预测 | 第63页 |
| 3.3.6 缺失突变体的鉴定 | 第63-64页 |
| 3.3.7 过表达株系的构建 | 第64-65页 |
| 3.3.8 2D-PAGE电泳结果 | 第65-66页 |
| 3.3.9 质谱分析结果 | 第66页 |
| 3.3.10 差异蛋白质功能分析 | 第66-68页 |
| 3.4 本章小结 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-84页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
