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节节麦二氢黄酮-4-还原酶基因的克隆与功能分析

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
缩写词(Abbreviations)第7-10页
1 前言第10-20页
    1.1 节节麦的研究进展第10-12页
        1.1.1 节节麦第10-11页
        1.1.2 节节麦D基因组的研究进展第11页
        1.1.3 节节麦的生物和非生物抗性第11页
        1.1.4 节节麦在小麦遗传改良中的应用第11-12页
    1.2 植物中的类黄酮化合物第12-15页
        1.2.1 类黄酮化合物与植物的抗逆性第12-13页
        1.2.2 植物中的花青素第13-15页
    1.3 二氢黄酮4还原酶(DFR)基因的研究进展第15-17页
        1.3.1 DFR基因的生物信息学分析第15页
        1.3.2 DFR基因的底物特异性第15-16页
        1.3.3 DFR基因的作用机制第16页
        1.3.4 DFR基因的调控机制第16-17页
    1.4 本研究的目的和意义第17-20页
2 材料与方法第20-32页
    2.1 实验材料第20-21页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 菌株与载体第20页
        2.1.3 主要药品与试剂第20页
        2.1.4 常用溶液及培养基第20-21页
    2.2 实验方法第21-32页
        2.2.1 CTAB法提取植物基因组DNA第21-22页
        2.2.2 Trizol法提取植物RNA第22页
        2.2.3 cDNA第一链的合成第22-23页
        2.2.4 DFR基因cDNA和DNA的克隆第23-25页
        2.2.5 DFR的生物信息学分析第25-26页
        2.2.6 HPLC法检测DFR的酶促动力学反应第26页
        2.2.7 DFR基因的原核诱导表达及分析第26-29页
        2.2.8 DFR基因的植物表达载体的构建第29-30页
        2.2.9 农杆菌介导的拟南芥遗传转化第30-32页
3 结果与分析第32-44页
    3.1 DFR基因的实时荧光定量PCR检测第32页
    3.2 DFR基因的克隆、序列比较分析和生物信息学分析第32-37页
        3.2.1 DFR基因的克隆第32-33页
        3.2.2 DFR基因的序列比较分析第33-36页
        3.2.3 DFR基因的生物信息学分析第36-37页
    3.3 DFR的酶促动力学分析第37-39页
    3.4 DFR基因的表达分析第39-44页
        3.4.1 DFR基因的原核表达和免疫杂交分析第39-41页
        3.4.2 DFR基因的植物表达载体的构建第41-44页
4 讨论第44-46页
5 结论第46-48页
参考文献第48-56页
致谢第56-57页

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