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黑曲霉α-葡萄糖苷酶在毕赤酵母的表面展示及催化合成低聚异麦芽糖的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩略词表第12-13页
第一章 绪论第13-29页
    1.1 α-葡萄糖苷酶第13-20页
        1.1.1 α-葡萄糖苷酶的分类及催化反应机制第13-15页
        1.1.2 α-葡萄糖苷酶的表达与酶学性质第15-17页
        1.1.3 α-葡萄糖苷酶的应用第17-20页
    1.2 低聚异麦芽糖第20-22页
        1.2.1 低聚异麦芽糖的功能第20-21页
        1.2.2 低聚异麦芽糖的生产第21-22页
    1.3 毕赤酵母表面展示系统第22-27页
        1.3.1 表面展示系统的发展第22-23页
        1.3.2 毕赤酵母表达系统第23-24页
        1.3.3 毕赤酵母表面展示系统的细胞壁蛋白第24-26页
        1.3.4 毕赤酵母表面展示系统的应用第26-27页
    1.4 本课题的研究意义和主要研究内容第27-29页
        1.4.1 本课题的研究意义第27-28页
        1.4.2 本课题的主要研究内容第28-29页
第二章 黑曲霉 α-葡萄糖苷酶在毕赤酵母的表面展示第29-57页
    2.1 引言第29-30页
    2.2 材料与仪器第30-33页
        2.2.1 主要仪器与设备第30页
        2.2.2 菌株与质粒第30-31页
        2.2.3 实验试剂第31页
        2.2.4 培养基配制第31-32页
        2.2.5 试剂配置第32-33页
    2.3 实验方法第33-44页
        2.3.1 菌株的培养第33页
        2.3.2 菌株的保存第33页
        2.3.3 重组质粒pKANGL-GCWn(n=12,19,21,49,61)的构建第33-38页
        2.3.4 重组毕赤酵母菌株的构建和筛选第38-41页
        2.3.5 多个锚定蛋白共展示重组菌株的初步构建与鉴定第41-44页
    2.4 结果与讨论第44-55页
        2.4.1 展示型黑曲霉 α-葡萄糖苷酶重组质粒的构建第44-47页
        2.4.2 重组展示型毕赤酵母菌株的构建及筛选第47-48页
        2.4.3 重组毕赤酵母表面展示菌株的甲醇诱导表达第48-49页
        2.4.4 展示型毕赤酵母重组菌株水解活力和转苷合成能力分析第49-50页
        2.4.5 两拷贝多个锚定蛋白共展示重组菌株的初步构建第50-55页
    2.5 本章小结第55-57页
第三章 低聚异麦芽糖酶法合成条件的优化第57-69页
    3.1 引言第57页
    3.2 材料与仪器第57-58页
        3.2.1 主要仪器与设备第57页
        3.2.2 实验试剂第57-58页
    3.3 实验方法第58-61页
        3.3.1 全细胞催化剂Pp-ANGL-GCW61的制备第58页
        3.3.2 HPLC-ELSD测定全细胞催化剂的转苷活力第58-59页
        3.3.3 展示酶合成低聚异麦芽糖的反应条件优化第59-60页
        3.3.4 2-L转苷合成反应体系第60-61页
    3.4 结果与讨论第61-68页
        3.4.1 HPLC-ELSD测定标准品第61页
        3.4.2 2-mL转苷合成低聚异麦芽糖体系的反应条件优化第61-66页
        3.4.3 2-L转苷合成低聚异麦芽糖反应体系第66-68页
    3.5 本章小结第68-69页
结论与展望第69-71页
    结论第69-70页
    创新点第70页
    展望第70-71页
参考文献第71-77页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第77-78页
致谢第78-79页
附件第79页

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