摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-29页 |
1.1 α-葡萄糖苷酶 | 第13-20页 |
1.1.1 α-葡萄糖苷酶的分类及催化反应机制 | 第13-15页 |
1.1.2 α-葡萄糖苷酶的表达与酶学性质 | 第15-17页 |
1.1.3 α-葡萄糖苷酶的应用 | 第17-20页 |
1.2 低聚异麦芽糖 | 第20-22页 |
1.2.1 低聚异麦芽糖的功能 | 第20-21页 |
1.2.2 低聚异麦芽糖的生产 | 第21-22页 |
1.3 毕赤酵母表面展示系统 | 第22-27页 |
1.3.1 表面展示系统的发展 | 第22-23页 |
1.3.2 毕赤酵母表达系统 | 第23-24页 |
1.3.3 毕赤酵母表面展示系统的细胞壁蛋白 | 第24-26页 |
1.3.4 毕赤酵母表面展示系统的应用 | 第26-27页 |
1.4 本课题的研究意义和主要研究内容 | 第27-29页 |
1.4.1 本课题的研究意义 | 第27-28页 |
1.4.2 本课题的主要研究内容 | 第28-29页 |
第二章 黑曲霉 α-葡萄糖苷酶在毕赤酵母的表面展示 | 第29-57页 |
2.1 引言 | 第29-30页 |
2.2 材料与仪器 | 第30-33页 |
2.2.1 主要仪器与设备 | 第30页 |
2.2.2 菌株与质粒 | 第30-31页 |
2.2.3 实验试剂 | 第31页 |
2.2.4 培养基配制 | 第31-32页 |
2.2.5 试剂配置 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-44页 |
2.3.1 菌株的培养 | 第33页 |
2.3.2 菌株的保存 | 第33页 |
2.3.3 重组质粒pKANGL-GCWn(n=12,19,21,49,61)的构建 | 第33-38页 |
2.3.4 重组毕赤酵母菌株的构建和筛选 | 第38-41页 |
2.3.5 多个锚定蛋白共展示重组菌株的初步构建与鉴定 | 第41-44页 |
2.4 结果与讨论 | 第44-55页 |
2.4.1 展示型黑曲霉 α-葡萄糖苷酶重组质粒的构建 | 第44-47页 |
2.4.2 重组展示型毕赤酵母菌株的构建及筛选 | 第47-48页 |
2.4.3 重组毕赤酵母表面展示菌株的甲醇诱导表达 | 第48-49页 |
2.4.4 展示型毕赤酵母重组菌株水解活力和转苷合成能力分析 | 第49-50页 |
2.4.5 两拷贝多个锚定蛋白共展示重组菌株的初步构建 | 第50-55页 |
2.5 本章小结 | 第55-57页 |
第三章 低聚异麦芽糖酶法合成条件的优化 | 第57-69页 |
3.1 引言 | 第57页 |
3.2 材料与仪器 | 第57-58页 |
3.2.1 主要仪器与设备 | 第57页 |
3.2.2 实验试剂 | 第57-58页 |
3.3 实验方法 | 第58-61页 |
3.3.1 全细胞催化剂Pp-ANGL-GCW61的制备 | 第58页 |
3.3.2 HPLC-ELSD测定全细胞催化剂的转苷活力 | 第58-59页 |
3.3.3 展示酶合成低聚异麦芽糖的反应条件优化 | 第59-60页 |
3.3.4 2-L转苷合成反应体系 | 第60-61页 |
3.4 结果与讨论 | 第61-68页 |
3.4.1 HPLC-ELSD测定标准品 | 第61页 |
3.4.2 2-mL转苷合成低聚异麦芽糖体系的反应条件优化 | 第61-66页 |
3.4.3 2-L转苷合成低聚异麦芽糖反应体系 | 第66-68页 |
3.5 本章小结 | 第68-69页 |
结论与展望 | 第69-71页 |
结论 | 第69-70页 |
创新点 | 第70页 |
展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
附件 | 第79页 |