| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 缩略语表 | 第14-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-36页 |
| 1 前言 | 第15-16页 |
| 2 动物采食量的调控 | 第16-29页 |
| 2.1 外周系统对动物采食调控 | 第16-24页 |
| 2.1.1 胃肠道 | 第17-19页 |
| 2.1.2 肠道微生物 | 第19-20页 |
| 2.1.3 外周其他部位 | 第20-24页 |
| 2.2 中枢神经系统对动物采食量的调控 | 第24-26页 |
| 2.2.1 下丘脑的采食量调控 | 第24-25页 |
| 2.2.2 中枢其他部位 | 第25-26页 |
| 2.3 采食量调控的分子机制 | 第26-29页 |
| 3 氨基酸对动物采食量的影响 | 第29-31页 |
| 3.1 必需氨基酸缺乏对动物采食量的影响 | 第29-30页 |
| 3.2 特异性氨基酸对动物采食量的影响 | 第30-31页 |
| 4 氨基酸对动物采食量的调控机制 | 第31-35页 |
| 4.1 必需氨基酸缺乏对动物采食量的调控机制 | 第31-34页 |
| 4.2 特异性氨基酸对动物采食量的调控机制 | 第34-35页 |
| 5 研究目的与意义 | 第35-36页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第36-49页 |
| 1 主要仪器设备 | 第36页 |
| 2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3 小鼠基因型鉴定 | 第37-40页 |
| 3.1 试剂配制 | 第37-38页 |
| 3.1.1 DNA提取相关溶液配制 | 第37页 |
| 3.1.2 常规电泳溶液配制 | 第37-38页 |
| 3.2 小鼠基因组DNA提取 | 第38页 |
| 3.3 引物设计及PCR反应体系 | 第38-39页 |
| 3.4 PCR产物的检测 | 第39页 |
| 3.5 PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）检测 | 第39-40页 |
| 3.6 DNA回收及扩增 | 第40页 |
| 3.7 DNA测序与突变区序列对比 | 第40页 |
| 4 动物饲养试验 | 第40-42页 |
| 4.1 试验动物及日粮 | 第40-41页 |
| 4.1.1 试验一日粮新奇性测试 | 第40-41页 |
| 4.1.3 试验三对比恢复试验 | 第41页 |
| 4.2 日粮设计 | 第41-42页 |
| 5 样品采集 | 第42-43页 |
| 6 指标测定及方法 | 第43-49页 |
| 6.1 小鼠采食量、体重统计 | 第43页 |
| 6.2 小鼠摄食行为观察统计 | 第43页 |
| 6.3 血浆中FGF21测定 | 第43页 |
| 6.4 胃肠道食欲相关基因和肝脏FGF21 mRNA表达量的测定 | 第43-45页 |
| 6.4.1 RNA提取 | 第43页 |
| 6.4.2 RNA的纯化 | 第43-44页 |
| 6.4.3 RNA反转录 | 第44页 |
| 6.4.4 实时荧光定量PCR | 第44-45页 |
| 6.5 肝脏Western Blot分析 | 第45-46页 |
| 6.5.1 试剂的配制 | 第45页 |
| 6.5.2 蛋白样品的制备 | 第45-46页 |
| 6.5.3 Western Blot分析及灰度扫描 | 第46页 |
| 6.6 中枢免疫组化检测 | 第46-47页 |
| 6.6.1 取材与固定 | 第46页 |
| 6.6.2 脱水透明 | 第46-47页 |
| 6.6.3 浸蜡包埋 | 第47页 |
| 6.6.4 制片 | 第47页 |
| 6.6.5 抗体孵育 | 第47页 |
| 6.7 血浆中氨基酸浓度测定 | 第47-48页 |
| 6.8 数据处理及分析 | 第48-49页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第49-68页 |
| 1 小鼠基因型鉴定 | 第49-51页 |
| 1.1 小鼠FGF21基因扩增结果 | 第49页 |
| 1.2 PAGE凝胶电泳结果 | 第49-50页 |
| 1.3 PAGE电泳DNA回收及检测 | 第50页 |
| 1.4 测序以及序列对比 | 第50-51页 |
| 2 日粮新奇性测试 | 第51-52页 |
| 3 Val缺乏对小鼠短期采食量和餐模式的影响 | 第52-56页 |
| 3.1 Val缺乏对短期采食量的影响 | 第52-54页 |
| 3.2 小鼠摄食行为及餐模式分析 | 第54-56页 |
| 4 Val缺乏对小鼠长期采食量和体重的影响 | 第56-58页 |
| 4.1 小鼠采食量变化 | 第56页 |
| 4.2 小鼠体重变化 | 第56-57页 |
| 4.3 Val缺乏对小鼠屠宰性能的影响 | 第57-58页 |
| 5 对比试验 | 第58-59页 |
| 6 Val缺乏对小鼠采食量调控的机制研究 | 第59-68页 |
| 6.1 Val缺乏对胃肠激素mRNA表达水平的影响 | 第59页 |
| 6.2 Val缺乏对肝脏FGF21表达的影响 | 第59-61页 |
| 6.3 Val缺乏对肝脏eIF2α 的影响 | 第61-62页 |
| 6.4 Val缺乏对血浆游离氨基酸浓度的影响 | 第62-65页 |
| 6.5 Val缺乏对中神经元活性的影响 | 第65-68页 |
| 6.5.1 Val缺乏对下丘脑弓状核NPY蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| 6.5.2 Val缺乏对下丘脑弓状核mTOR信号通路的影响 | 第66-67页 |
| 6.5.3 Val缺乏对前梨状皮层eIF2α 活性的影响 | 第67-68页 |
| 第四部分 讨论 | 第68-73页 |
| 1 Val缺乏对小鼠采食量和摄食行为的影响 | 第68-69页 |
| 2 Val缺乏对小鼠采食量调控的机制研究 | 第69-73页 |
| 2.1 Val缺乏对胃肠激素表达的影响 | 第69-70页 |
| 2.2 Val缺乏对肝脏FGF21表达的影响 | 第70-71页 |
| 2.3 Val缺乏对血液氨基酸模式的影响 | 第71-72页 |
| 2.4 Val缺乏对中枢神经元活性的调控 | 第72-73页 |
| 结语 | 第73-74页 |
| 1 研究结论 | 第73页 |
| 2 创新点 | 第73页 |
| 3 研究不足之处 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
