摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 立题依据与文献综述 | 第13-34页 |
1.1 灰霉病研究概述 | 第13-18页 |
1.1.1 灰葡萄孢菌的传播和侵染机制 | 第13-14页 |
1.1.2 灰葡萄孢菌的致病机理 | 第14-15页 |
1.1.3 灰霉病的防治措施 | 第15-16页 |
1.1.4 番茄果实感染灰霉病的特点 | 第16-18页 |
1.2 植物MAPK级联的研究进展 | 第18-23页 |
1.2.1 MAPK级联系统概述 | 第18-19页 |
1.2.2 MAPK级联参与调控植物的生理活动 | 第19-21页 |
1.2.3 番茄MAPK家族 | 第21-23页 |
1.3 MAPK级联与ROS信号的交叉调控 | 第23-24页 |
1.4 NO在植物抗逆中的作用 | 第24-28页 |
1.4.1 植物中NO的来源 | 第24-26页 |
1.4.2 NO在植物抗病反应中的作用 | 第26页 |
1.4.3 NO在植物非生物胁迫中的作用 | 第26-27页 |
1.4.4 MAPK级联参与NO信号传导 | 第27-28页 |
1.5 乙烯在抗病中的作用 | 第28-32页 |
1.5.1 乙烯生物合成途径 | 第28-29页 |
1.5.2 乙烯信号转导途径 | 第29-31页 |
1.5.3 乙烯在病害防御中的作用 | 第31-32页 |
1.6 研究目的与意义 | 第32-34页 |
1.6.1 研究意义 | 第32-33页 |
1.6.2 研究目的 | 第33-34页 |
第二章 番茄果实中MAPKs基因对灰霉侵染的响应 | 第34-47页 |
2.1 材料与方法 | 第34-39页 |
2.1.1 材料 | 第34页 |
2.1.2 处理方式 | 第34-35页 |
2.1.3 主要试剂 | 第35页 |
2.1.4 仪器设备 | 第35-36页 |
2.1.5 番茄果实接种灰霉 | 第36页 |
2.1.6 番茄果实总RNA提取、电泳检测和浓度测定 | 第36-37页 |
2.1.7 反转录 | 第37页 |
2.1.8 实时定量PCR | 第37-39页 |
2.1.9 统计分析 | 第39页 |
2.2 结果 | 第39-46页 |
2.2.1 番茄果实RNA提取结果 | 第39-40页 |
2.2.2 灰霉侵染对SlMPK1-16基因相对表达量的影响 | 第40-44页 |
2.2.3 SA处理对番茄果实SlMPK1/2/3/4/5/16基因相对表达量的影响 | 第44-46页 |
2.3 讨论 | 第46页 |
2.4 本章小结 | 第46-47页 |
第三章 SlMPK1/2/3调节番茄果实抗病反应的作用机制 | 第47-72页 |
3.1 材料与方法 | 第48-57页 |
3.1.1 材料 | 第48页 |
3.1.2 处理方式 | 第48-49页 |
3.1.3 主要试剂 | 第49页 |
3.1.4 仪器设备 | 第49-50页 |
3.1.5 果实接种灰霉及发病率统计 | 第50页 |
3.1.6 β-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性测定 | 第50-51页 |
3.1.7 几丁质酶(CHI)活性测定 | 第51-52页 |
3.1.8 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定 | 第52页 |
3.1.9 多酚氧化酶(PPO)活性测定 | 第52-53页 |
3.1.10 果实总RNA的提取、基因组消化、RNA定量及电泳检测 | 第53页 |
3.1.11 反转录 | 第53页 |
3.1.12 实时定量PCR | 第53-54页 |
3.1.13 H_2O_2含量测定 | 第54页 |
3.1.14 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第54-55页 |
3.1.15 APX活性测定 | 第55页 |
3.1.16 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第55页 |
3.1.17 IAA、ABA、GA、MeJA含量测定 | 第55-56页 |
3.1.18 乙烯释放量测定 | 第56页 |
3.1.19 ACC含量测定 | 第56页 |
3.1.20 ACO含量测定 | 第56页 |
3.1.21 ACS活性测定 | 第56-57页 |
3.1.22 统计分析 | 第57页 |
3.2 结果与讨论 | 第57-70页 |
3.2.1 MAPKs抑制剂对SlMPK1/2/3抑制效果 | 第57-59页 |
3.2.2 SlMPK1/2/3对采后番茄果实抵抗灰霉病原菌侵染能力的影响 | 第59-60页 |
3.2.3 激素参与SlMPK1/2/3调控的采后番茄果实抗病过程 | 第60-62页 |
3.2.4 SlMPK1/2/3对采后番茄果实抗病相关酶活性的影响 | 第62-63页 |
3.2.5 活性氧参与SlMPK1/2/3调控的采后番茄果实抗病过程 | 第63-64页 |
3.2.6 激素含量、抗病和抗氧化酶活性以及H202含量Pearson相关性分析 | 第64-65页 |
3.2.7 U0126处理对番茄果实乙烯释放量的影响 | 第65-67页 |
3.2.8 U0126处理对番茄果实ACC含量的影响 | 第67页 |
3.2.9 U0126处理对番茄果实ACO活性的影响 | 第67-68页 |
3.2.10 U0126处理对番茄果实ACS活性的影响 | 第68页 |
3.2.11 U0126处理对番茄果实ACS基因表达量的影响 | 第68-69页 |
3.2.12 U0126处理对番茄果实ACO基因表达量的影响 | 第69-70页 |
3.3 本章小结 | 第70-72页 |
第四章 SlMPK1/2/3植物表达载体的构建及其在番茄中的遗传转化 | 第72-87页 |
4.1 材料与方法 | 第72-80页 |
4.1.1 试验材料 | 第72页 |
4.1.2 菌株和质粒 | 第72页 |
4.1.3 酶及主要试剂 | 第72-73页 |
4.1.4 溶液和试剂配制 | 第73-74页 |
4.1.5 仪器设备 | 第74-75页 |
4.1.6 SIMPK1/2/3植物表达载体的构建流程 | 第75页 |
4.1.7 PCR 扩増 | 第75-76页 |
4.1.8 DNA 回收 | 第76-77页 |
4.1.9 目的片段与pEASY-Blunt载体连接 | 第77页 |
4.1.10 大肠杆菌 transllO/transl-Tl 的转化 | 第77页 |
4.1.11 大肠杆菌质粒提取 | 第77-78页 |
4.1.12 质粒DNA双酶切 | 第78页 |
4.1.13 PCAMBIA-2300-MAPK1/2/3 重组质粒的构建 | 第78-79页 |
4.1.14 农杆菌感受态的制备 | 第79页 |
4.1.15 农杆菌的转化 | 第79页 |
4.1.16 番痴子叶转化与植株再生 | 第79-80页 |
4.1.17 转基因苗的鉴定 | 第80页 |
4.2 结论与分析 | 第80-86页 |
4.2.1 SIMPK1/2/3目的片段的克隆 | 第80-81页 |
4.2.2 菌落PCR验证 | 第81-83页 |
4.2.3 SIMPKI/3载体的叶盘法转化番前及植株再生 | 第83-84页 |
4.2.4 转基因植株的鉴定 | 第84-85页 |
4.2.5 转基因植株SIMPK1/3基因相对表达量分析 | 第85-86页 |
4.2.6 转基因植株抵抗灰霉能力分析 | 第86页 |
4.3 小结 | 第86-87页 |
第五章 SIMPK1/2/3参与NO诱导的采后番SB果实抗病反应 | 第87-98页 |
5.1 材料与方法 | 第87-90页 |
5.1.1 材料 | 第87-88页 |
5.1.2 处理方式 | 第88页 |
5.1.3 主要试剂 | 第88页 |
5.1.4 仪器设备 | 第88-89页 |
5.1.5 果实接种灰霉及发病率统计 | 第89页 |
5.1.6 NO含量测定 | 第89页 |
5.1.7 NOS含量测定 | 第89页 |
5.1.8 0-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性测定 | 第89页 |
5.1.9 几丁质酶(CHI)活性测定 | 第89-90页 |
5.1.10 苯两氨酸解氨醜(PAL)活性测定 | 第90页 |
5.1.11 多酣氧化酶(PPO)活性测定 | 第90页 |
5.1.12 果实总RNA旳提取、基因组消化、RNA定量及电泳检测 | 第90页 |
5.1.13 反转录 | 第90页 |
5.1.14 SIMPK1/2/3 相对表达量 | 第90页 |
5.1.15 统计分析 | 第90页 |
5.2 结果与讨论 | 第90-97页 |
5.2.1 U0126处理对番庙果实抵抗灰霉病原菌侵染能力的影响 | 第90-91页 |
5.2.2 SNP和SNP+U0126处理对番前果实抵抗灰霉病原菌侵染能力的影响 | 第91-93页 |
5.2.3 SNP和SNP+U0126处理对番前果实NOS活性和NO含量的影响 | 第93-94页 |
5.2.4 SNP和SNP+U0126对采后番前果实抗病相关酶活性的影响 | 第94-95页 |
5.2.5 SNP和SNP+U0126对采后番痴果实SmPKl/2/3相对表达量的影响 | 第95-97页 |
5.3 本章小结 | 第97-98页 |
第六章 精氨酸诱导的采后番莉果实抗病反应中NOS和MAPKs的作用 | 第98-108页 |
6.1 材料与方法 | 第98-101页 |
6.1.1 材料 | 第98-99页 |
6.1.2 处理方式 | 第99页 |
6.1.3 主要试剂 | 第99页 |
6.1.4 仪器设备 | 第99-100页 |
6.1.5 果实接种灰霉及发病率统计 | 第100页 |
6.1.6 NO含量测定 | 第100页 |
6.1.7 NOS含量测定 | 第100页 |
6.1.8 |3-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性测定 | 第100页 |
6.1.9 几丁质酶(CHI)活性测定 | 第100页 |
6.1.10 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定 | 第100页 |
6.1.11 多醋氧化酶(PPO)活性测定 | 第100页 |
6.1.12 果实总RNA的提取、基因组消化、RNA定量及电泳检测 | 第100页 |
6.1.13 反转录 | 第100-101页 |
6.1.14 实时定量PCR | 第101页 |
6.1.15 统计分析 | 第101页 |
6.2 结果与讨论 | 第101-107页 |
6.2.1 L-Arg和L-NAME处理对番痴果实抵抗灰霉病原菌侵染能力的影响 | 第101-102页 |
6.2.2 L-Axg和L-NAME处理对番前果实NO含量和NOS活性的影响 | 第102-104页 |
6.2.3 L-Arg和L-NAME处理对番痴果实精氨酸含量旳影响 | 第104页 |
6.2.4 L-Arg和L-NAME对采后番筋果实抗病相关酶活性的影响 | 第104-106页 |
6.2.5 L-Arg和L-NAME对采后番筋果实SlMPn/2/3相对表达量的影响 | 第106-107页 |
6.3 本章小结 | 第107-108页 |
第七章 结论与展望 | 第108-112页 |
7.1 结论 | 第108-110页 |
7.2 创新点 | 第110-111页 |
7.3 展望 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-133页 |
致谢 | 第133-135页 |
附录 | 第135-136页 |
个人简介 | 第136页 |