摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第8-21页 |
1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第8-9页 |
1.2 国内外研究进展 | 第9-19页 |
1.2.1 雄激素受体简介 | 第9-11页 |
1.2.2 泛素-蛋白酶体系统与自噬溶酶体系统 | 第11-17页 |
1.2.3 雄激素受体在自噬中的作用 | 第17-19页 |
1.3 本课题的主要研究内容 | 第19-21页 |
1.3.1 明确硼替佐米降低 AR 表达 | 第19页 |
1.3.2 确认 AR 影响 BTZ 诱导的自噬反应 | 第19-20页 |
1.3.3 分析 BTZ 诱导自噬的生物学效应 | 第20-21页 |
第2章 实验材料与实验方法 | 第21-29页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验对象 | 第21页 |
2.1.2 实验药品与试剂 | 第21-23页 |
2.2 实验设备 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-29页 |
2.3.1 细胞培养 | 第23-24页 |
2.3.2 质粒转染 | 第24页 |
2.3.3 稳定表达外源质粒的细胞系的筛选 | 第24-25页 |
2.3.4 细胞总蛋白提取以及蛋白浓度的测定 | 第25页 |
2.3.5 Western blotting | 第25-26页 |
2.3.6 RNA 提取 | 第26-27页 |
2.3.7 RT-PCR | 第27页 |
2.3.8 实时定量 PCR 反应 | 第27-28页 |
2.3.9 MTT 法检测细胞活力 | 第28-29页 |
第3章 蛋白酶体抑制剂硼替佐米在前列腺癌细胞诱导细胞自噬 | 第29-34页 |
3.1 引言 | 第29-30页 |
3.2 BTZ 在前列腺癌细胞诱导自噬相关基因表达 | 第30页 |
3.3 建立稳定表达 LC3-GFP 蛋白的 LNCAP 细胞系,分析 BTZ 诱导 LC3 荧光斑的形成 | 第30-32页 |
3.4 硼替佐米(BTZ)在前列腺癌细胞中诱导自噬体的形成 | 第32-33页 |
3.5 本章小结 | 第33-34页 |
第4章 雄激素受体在前列腺癌细胞对硼替佐米诱导的细胞自噬的影响 | 第34-41页 |
4.1 引言 | 第34页 |
4.2 BTZ 在诱导细胞自噬的同时,降低 AR 蛋白的表达 | 第34-35页 |
4.3 AR 基因表达水平降低增强基础自噬水平 | 第35-36页 |
4.4 前列腺癌细胞中 AR 表达差异对 BTZ 诱导自噬的影响 | 第36-37页 |
4.5 在 AR 阳性的 LNCAP 细胞强制 AR 过表达 | 第37-38页 |
4.6 AR 过表达对 BTZ 诱导的细胞自噬的影响 | 第38页 |
4.7 在 AR 阴性的 PC3 和 DU145 细胞表达外源性 AR | 第38-39页 |
4.8 外源性 AR 表达对 BTZ 诱导细胞自噬的影响 | 第39-40页 |
4.9 本章小结 | 第40-41页 |
第5章 BTZ 诱导的细胞自噬的生物学效应初步研究 | 第41-44页 |
5.1 引言 | 第41页 |
5.2 MTT 法检测 BTZ 联合 BAFILOMYCIN A1 处理对于细胞活力的影响 | 第41-42页 |
5.3 BTZ 联合 BAFILOMYCI A1 作用对细胞凋亡影响 | 第42-43页 |
5.4 本章小结 | 第43-44页 |
结论 | 第44-45页 |
展望 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第50-52页 |
致谢 | 第52页 |