| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第11-20页 |
| 1.1 发根农杆菌及其应用研究 | 第11-14页 |
| 1.1.1 发根农杆菌及其致病机理 | 第11-12页 |
| 1.1.2 发根农杆菌转化及发根鉴定方法 | 第12页 |
| 1.1.3 发根农杆菌应用 | 第12-14页 |
| 1.1.3.1 植株再生 | 第13页 |
| 1.1.3.2 提高植物自身次级代谢 | 第13页 |
| 1.1.3.3 外源基因表达 | 第13-14页 |
| 1.2 白藜芦醇研究 | 第14-17页 |
| 1.2.1 白藜芦醇资源分布及其理化性质 | 第14-15页 |
| 1.2.1.1 白藜芦醇资源分布 | 第14页 |
| 1.2.1.2 白藜芦醇理化性质 | 第14-15页 |
| 1.2.2 生物技术在白藜芦醇生产中的应用 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 白藜芦醇合成代谢途径 | 第15页 |
| 1.2.2.2 植物组织培养 | 第15-16页 |
| 1.2.2.3 生物转化法 | 第16页 |
| 1.2.2.4 基因工程法 | 第16-17页 |
| 1.3 白藜芦醇提取及检测研究 | 第17-19页 |
| 1.3.1 白藜芦醇提取 | 第17-18页 |
| 1.3.1.1 溶剂提取法 | 第17页 |
| 1.3.1.2 辅助萃取法 | 第17-18页 |
| 1.3.2 白藜芦醇分析检测 | 第18-19页 |
| 1.3.2.1 定性分析 | 第18页 |
| 1.3.2.2 紫外分光光度度计法 | 第18页 |
| 1.3.2.3 色谱法 | 第18-19页 |
| 1.3.2.4 电化学法 | 第19页 |
| 1.4 课题研究动态及研究特色 | 第19-20页 |
| 第二章 花生发根的诱导及鉴定 | 第20-29页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-22页 |
| 2.1.1 材料与仪器 | 第20页 |
| 2.1.2 方法 | 第20-22页 |
| 2.1.2.1 无菌外植体制备 | 第20-21页 |
| 2.1.2.2 菌种活化培养 | 第21页 |
| 2.1.2.3 发根农杆菌对头孢霉素(Cef)敏感性研究 | 第21页 |
| 2.1.2.4 发根诱导 | 第21页 |
| 2.1.2.5 发根冠瘿碱鉴定 | 第21页 |
| 2.1.2.6 发根与非转化根水溶性蛋白的提取与分离 | 第21-22页 |
| 2.2 结果与分析 | 第22-27页 |
| 2.2.1 发根农杆菌对Cef敏感性 | 第22页 |
| 2.2.2 不同理化因素对发根诱导的影响 | 第22-25页 |
| 2.2.2.1 不同发根农杆菌对外植体侵染能力比较 | 第23页 |
| 2.2.2.2 菌液浓度对发根诱导率影响 | 第23-24页 |
| 2.2.2.3 共培养时间对发根诱导率影响 | 第24页 |
| 2.2.2.4 侵染时间对发根诱导率影响 | 第24-25页 |
| 2.2.2.5 添加乙酰丁香酮(AS)对发根率诱导影响 | 第25页 |
| 2.2.3 发根的鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.4 发根与非转化根蛋白差异 | 第27页 |
| 2.3 结论 | 第27-29页 |
| 第三章 花生发根培养条件的优化 | 第29-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-32页 |
| 3.1.1 材料 | 第29-30页 |
| 3.1.2 方法 | 第30-32页 |
| 3.1.2.1 培养基筛选 | 第30页 |
| 3.1.2.2 激素对发根生长影响 | 第30页 |
| 3.1.2.3 培养基优化 | 第30-31页 |
| 3.1.2.4 发根生物量测定 | 第31页 |
| 3.1.2.5 发根在优化培养基中生长曲线绘制 | 第31页 |
| 3.1.2.6 诱导子添加对发根中白藜芦醇及其苷的合成影响 | 第31页 |
| 3.1.2.7 HPLC检测 | 第31-32页 |
| 3.2 结果与分析 | 第32-39页 |
| 3.2.1 基本培养基筛选 | 第32-33页 |
| 3.2.2 激素对发根生长及形态的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.2.1 NAA、6-BA、IBA对发根生长的影响 | 第33页 |
| 3.2.2.2 NAA、6-BA、IBA对发根生长形态的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.3 单因素实验 | 第34-36页 |
| 3.2.3.1 蔗糖含量对发根生长的影响 | 第34页 |
| 3.2.3.2 氮源浓度对发根生长的影响 | 第34-35页 |
| 3.2.3.3 磷酸盐浓度对发根生长的影响 | 第35页 |
| 3.2.3.4 初始pH对发根生长的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.4 正交实验优化培养基 | 第36-37页 |
| 3.2.5 优化后发根生长曲线 | 第37页 |
| 3.2.6 诱导子处理对发根白藜芦醇及白藜芦醇苷合成的影响 | 第37-39页 |
| 3.3 结论 | 第39-40页 |
| 第四章 发根农杆菌介导白藜芦醇合酶基因转化花生 | 第40-47页 |
| 4.1 材料与方法 | 第40-42页 |
| 4.1.1 材料 | 第40-41页 |
| 4.1.2 方法 | 第41-42页 |
| 4.1.2.1 未转化发根农杆菌ATCC11325卡那(Km)抗性检测 | 第41页 |
| 4.1.2.2 含有白藜芦醇合酶基因植物表达载体的提取及Rs基因鉴定 | 第41页 |
| 4.1.2.3 发根农杆菌感受态制备、目的基因质粒导入及抗性筛选 | 第41页 |
| 4.1.2.4 抗性菌落的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 4.1.2.5 重组发根农杆菌介导的遗传转化不同基因型花生的遗传转化 | 第42页 |
| 4.1.2.6 转化发根的PCR鉴定 | 第42页 |
| 4.2 结果与分析 | 第42-46页 |
| 4.2.1 未转化发根农杆菌的卡那抗生素敏感性检测 | 第42-43页 |
| 4.2.2 E.coli提取质粒的Rs基因检测 | 第43页 |
| 4.2.3 质粒导入发根农杆菌的抗性筛选及PCR扩增鉴定 | 第43-44页 |
| 4.2.4 重组发根农杆菌介导对不同基因型花生叶片发根诱导的影响 | 第44-45页 |
| 4.2.5 转化发根的PCR鉴定 | 第45-46页 |
| 4.3 结论 | 第46-47页 |
| 第五章 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 硕士期间参与的科研项目及成果 | 第56页 |
