中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11页 |
前言 | 第15-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-33页 |
1.1 酵母发酵获得的新产品研究开发 | 第18-19页 |
1.1.1 食品添加剂 | 第18-19页 |
1.1.2 香料及风味物质 | 第19页 |
1.1.3 其他 | 第19页 |
1.2 利用酵母细胞酶系生产产品 | 第19-21页 |
1.2.1 生物催化不对称合成 | 第20页 |
1.2.2 磷酸转移反应 | 第20-21页 |
1.2.3 其他酶反应 | 第21页 |
1.3 代谢工程开发酵母产品生产新功能 | 第21-24页 |
1.3.1 代谢工程原理 | 第21-23页 |
1.3.2 酵母代谢工程研究及应用 | 第23-24页 |
1.4 酵母代谢调节生产代谢中间物FDP研究进展 | 第24-28页 |
1.4.1 FDP药效学和临床药理学 | 第25页 |
1.4.2 FDP的用途研究 | 第25-26页 |
1.4.3 FDP生产技术研究 | 第26-28页 |
1.5 酵母作为外源基因表达系统的研究进展 | 第28-31页 |
1.5.1 酿酒酵母表达系统 | 第29-30页 |
1.5.2 非常规酵母表达系统 | 第30-31页 |
1.5.3 重组酵母发酵 | 第31页 |
1.6 本论文研究的基本思路 | 第31页 |
1.7 小结 | 第31-33页 |
第二章 材料和方法 | 第33-43页 |
2.1 生物转化合成FDP | 第33-38页 |
2.1.1 酵母源及保存 | 第33页 |
2.1.2 细胞透性化方法 | 第33页 |
2.1.3 磷酸化反应 | 第33-34页 |
2.1.4 分析方法 | 第34-38页 |
2.2 重组酿酒酵母高密度发酵 | 第38-40页 |
2.2.1 菌种 | 第38-39页 |
2.2.2 培养基 | 第39页 |
2.2.3 培养方法 | 第39-40页 |
2.2.4 测定方法 | 第40页 |
2.3 重组产朊假丝酵母高密度发酵 | 第40-43页 |
2.3.1 菌种 | 第40页 |
2.3.2 培养基 | 第40-41页 |
2.3.3 培养方法 | 第41-42页 |
2.3.4 测定方法 | 第42-43页 |
第三章 游离细胞酶促转化生产FDP反应条件研究 | 第43-54页 |
3.1 细胞透性化方法选择 | 第43-45页 |
3.2 酵母种类比较 | 第45-46页 |
3.3 反应温度对FDP积累的影响 | 第46页 |
3.4 pH对FDP积累的影响 | 第46页 |
3.5 糖及碳水化合物对FDP积累的影响 | 第46-49页 |
3.6 无机磷种类及浓度对FDP积累的影响 | 第49-51页 |
3.7 影响FDP积累的其它因素 | 第51-53页 |
3.7.1 FDP积累中对氧的需求 | 第51-52页 |
3.7.2 金属离子对FDP积累的影响 | 第52-53页 |
3.8 小结 | 第53-54页 |
第四章 生物转化合成FDP补料分批操作方式的研究 | 第54-63页 |
4.1 材料和方法 | 第54-55页 |
4.1.1 实验材料 | 第54-55页 |
4.1.2 实验装置 | 第55页 |
4.1.3 补料分批操作 | 第55页 |
4.2 结果和讨论 | 第55-62页 |
4.2.1 FDP的生成 | 第56-57页 |
4.2.2 代谢中间物的生成 | 第57-58页 |
4.2.3 辅因子的生成 | 第58-59页 |
4.2.4 最优反应时间 | 第59-60页 |
4.2.5 与固定化细胞法的比较 | 第60-62页 |
4.3 小结 | 第62-63页 |
第五章 透性酵母细胞糖代谢及FDP积累动力学分析 | 第63-72页 |
5.1 材料和方法 | 第63-64页 |
5.1.1 实验方法 | 第63页 |
5.1.2 代谢途径模型 | 第63-64页 |
5.2 结果和讨论 | 第64-69页 |
5.2.1 代谢通量分布分析 | 第64-68页 |
5.2.2 环境条件对代谢通量分布的影响 | 第68-69页 |
5.3 小结 | 第69-70页 |
本章符号说明 | 第70-72页 |
第六章 FDP分离提纯技术的研究 | 第72-80页 |
6.1 材料和方法 | 第72-73页 |
6.1.1 材料和试剂 | 第72页 |
6.1.2 仪器 | 第72页 |
6.1.3 分析方法 | 第72-73页 |
6.1.4 FDP的分离提纯过程 | 第73页 |
6.2 FDP分离纯化条件研究 | 第73-79页 |
6.2.1 FDP的稳定性与灭酶条件 | 第73-74页 |
6.2.2 除无机磷及回收FDP | 第74-76页 |
6.2.3 FDPZn_2的洗涤 | 第76页 |
6.2.4 FDPZn_2的解离 | 第76-77页 |
6.2.5 FDPHNa_3的结晶及干燥 | 第77-78页 |
6.2.6 分离产物分析 | 第78-79页 |
6.3 小结 | 第79-80页 |
第七章 重组酿酒酵母生产外源α-淀粉酶培养条件研究 | 第80-86页 |
7.1 材料和方法 | 第80页 |
7.2 结果与讨论 | 第80-84页 |
7.2.1 分泌表达的基本条件 | 第80-81页 |
7.2.2 分段培养及诱导时刻 | 第81-82页 |
7.2.3 天然氮源的选择 | 第82页 |
7.2.4 碳氮比 | 第82-84页 |
7.2.5 溶解氧 | 第84页 |
7.3 小结 | 第84-86页 |
第八章 提高重组酵母外源蛋白质产量的替代碳源流加培养方案 | 第86-93页 |
8.1 材料和方法 | 第86页 |
8.2 结果与讨论 | 第86-90页 |
8.2.1 诱导期碳源 | 第86-89页 |
8.2.2 流加乳酸培养工艺 | 第89-90页 |
8.3 重组酵母培养的动力学模拟 | 第90-92页 |
8.4 小结 | 第92页 |
本章符号说明 | 第92-93页 |
第九章 营养物震荡高密度培养提高重组酵母质粒稳定性和外源蛋白质产量 | 第93-100页 |
9.1 材料和方法 | 第93页 |
9.2 结果与讨论 | 第93-98页 |
9.2.1 培养过程中质粒不稳定性分析 | 第94-96页 |
9.2.2 营养物震荡稳定质粒的效果 | 第96-97页 |
9.2.3 营养物震荡高密度培养 | 第97-98页 |
9.3 小结 | 第98-100页 |
第十章 重组酵母Candida utilis高密度培养生产甜味蛋白质莫内林的研究 | 第100-108页 |
10.1 材料和方法 | 第100页 |
10.2 结果与讨论 | 第100-107页 |
10.2.1 菌体得率 | 第100-102页 |
10.2.2 高密度增殖的抑制因子 | 第102-104页 |
10.2.3 钠、钾离子对氧摄取的影响 | 第104-106页 |
10.2.4 改进流加培养基组成 | 第106-107页 |
10.3 小结 | 第107-108页 |
结论 | 第108-111页 |
参考文献 | 第111-123页 |
致谢 | 第123-124页 |
附录 攻读学位期间发表论文一览 | 第124-125页 |