| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 前言 | 第14-18页 |
| 2 材料方法 | 第18-33页 |
| 2.1 实验材料与处理 | 第18-20页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第18页 |
| 2.1.2 试验处理 | 第18页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要试剂与配方 | 第19-20页 |
| 2.2 表观指数观察和生理指标的测定 | 第20-23页 |
| 2.2.1 褐变指数的观察 | 第20页 |
| 2.2.2 褐变率的观察 | 第20页 |
| 2.2.3 菠萝转黄指数的评价 | 第20页 |
| 2.2.4 果实失重率的测定 | 第20页 |
| 2.2.5 可溶性固形物（SSC）含量的测定 | 第20-21页 |
| 2.2.6 可滴定酸（TA）含量的测定 | 第21页 |
| 2.2.7 抗坏血酸含量的测定 | 第21页 |
| 2.2.8 总酚含量测定 | 第21页 |
| 2.2.9 苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的测定 | 第21页 |
| 2.2.10 多酚氧化酶（PPO）活性测定 | 第21-22页 |
| 2.2.11 过氧化物酶（POD）活性测定 | 第22页 |
| 2.2.12 过氧化氢酶（CAT）活性测定 | 第22页 |
| 2.2.13 超氧阴离子产生速率的测定 | 第22页 |
| 2.2.14 过氧化氢（H_2O_2）含量测定 | 第22页 |
| 2.2.15 赤霉素和脱落酸含量的测定 | 第22-23页 |
| 2.3 基因表达水平检测（实时荧光定量法) | 第23-25页 |
| 2.3.1 菠萝果肉RNA的提取 | 第23页 |
| 2.3.2 菠萝总RNA纯化及检测 | 第23-24页 |
| 2.3.3 c DNA第一链的合成 | 第24页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR引物的设计 | 第24-25页 |
| 2.3.5 实时荧光定量PCR产物的扩增 | 第25页 |
| 2.4 菠萝AcGA2ox的克隆 | 第25-26页 |
| 2.4.1 菠萝AcGA2ox的PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.5 菠萝AcGA2ox超表达 | 第26-31页 |
| 2.5.1 菠萝AcGA2ox重组载体构建 | 第26-28页 |
| 2.5.2 表达载体转化农杆菌 | 第28-29页 |
| 2.5.3 拟南芥的栽培与转化 | 第29页 |
| 2.5.4 转基因植株的筛选 | 第29-30页 |
| 2.5.5 cDNA第一链的合成以及基因表达水平检测 | 第30页 |
| 2.5.6 转化植株的PCR检测 | 第30-31页 |
| 2.6 拟南芥表型分析 | 第31页 |
| 2.6.1 种子萌发率的检测 | 第31页 |
| 2.6.2 下胚轴长度、株高、根长、苗重测定 | 第31页 |
| 2.6.3 赤霉素含量的测定 | 第31页 |
| 2.6.4 拟南芥AcGA2ox表达量的测定 | 第31页 |
| 2.7 实验所用主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.8 数据处理与分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-61页 |
| 3.1 ABA控制采后菠萝黑心病的生理机理 | 第33-43页 |
| 3.1.1 ABA对采后菠萝褐变指数的影响 | 第33页 |
| 3.1.2 ABA对采后菠萝褐变率的影响 | 第33-34页 |
| 3.1.3 ABA对采后菠萝失重率的影响 | 第34页 |
| 3.1.4 ABA对采后菠萝转黄指数的影响 | 第34-35页 |
| 3.1.5 ABA对采后菠萝SSC含量的影响 | 第35页 |
| 3.1.6 ABA对采后菠萝TA含量的影响 | 第35-36页 |
| 3.1.7 ABA对采后菠萝抗坏血酸含量的影响 | 第36页 |
| 3.1.8 ABA对采后菠萝总酚含量的影响 | 第36-37页 |
| 3.1.9 ABA对采后菠萝PPO活性的影响 | 第37页 |
| 3.1.10 ABA对采后菠萝PAL活性的影响 | 第37-38页 |
| 3.1.11 ABA对采后菠萝POD活性的影响 | 第38页 |
| 3.1.12 ABA对采后菠萝CAT活性的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.13 ABA对采后菠萝H_2O_2含量影响 | 第39页 |
| 3.1.14 ABA对采后菠萝超氧阴离子产生速率的影响 | 第39-40页 |
| 3.1.15 ABA对采后菠萝相关基因表达的影响 | 第40-41页 |
| 3.1.16 ABA对采后菠萝ABA含量的影响 | 第41-42页 |
| 3.1.17 ABA对采后菠萝GAs含量的影响 | 第42-43页 |
| 3.2 ABA对赤霉素诱发菠萝黑心病的拮抗作用 | 第43-47页 |
| 3.2.1 GA与ABA结合处理对采后菠萝褐变指数的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.2 GA与ABA结合处理对采后菠萝褐变率的影响 | 第44页 |
| 3.2.3 GA与ABA结合处理对采后菠萝GA2ox基因表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.4 GA与ABA结合处理对采后菠萝PPO基因表达的影响 | 第45页 |
| 3.2.5 GA与ABA结合处理对采后菠萝PAL基因表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.6 GA与ABA结合处理对采后菠萝ABA含量的影响 | 第46页 |
| 3.2.7 GA与ABA结合处理对采后菠萝GAs含量的影响 | 第46-47页 |
| 3.3 ABA对乙烯诱发菠萝黑心病的拮抗作用 | 第47-51页 |
| 3.3.1 Eth与ABA结合处理对采后菠萝褐变指数的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.2 Eth与ABA结合处理对采后菠萝褐变率的影响 | 第48页 |
| 3.3.3 Eth与ABA结合处理对采后菠萝GA2ox基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.4 Eth与ABA结合处理对采后菠萝PPO基因表达的影响 | 第49页 |
| 3.3.5 Eth与ABA结合处理对采后菠萝PAL基因表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.6 Eth与ABA结合处理对采后菠萝ABA含量的影响 | 第50页 |
| 3.3.7 Eth与ABA结合处理对采后菠萝GAs含量的影响 | 第50-51页 |
| 3.4 菠萝赤霉素代谢基因AcGA2ox对内源GA含量的调控 | 第51-61页 |
| 3.4.1 分离AcGA2ox | 第51-52页 |
| 3.4.2 重组载体的构建与鉴定 | 第52-53页 |
| 3.4.3 转基因植株的筛选 | 第53-54页 |
| 3.4.4 转基因植株T1代PCR检测 | 第54页 |
| 3.4.5 转基因植株T3代PCR检测 | 第54-56页 |
| 3.4.6 种子萌发率 | 第56-57页 |
| 3.4.7 下胚轴长度 | 第57-58页 |
| 3.4.8 根长 | 第58页 |
| 3.4.9 株高 | 第58-59页 |
| 3.4.10 苗重 | 第59页 |
| 3.4.11 赤霉素含量 | 第59-60页 |
| 3.4.12 拟南芥AcGA2ox的表达 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-68页 |
| 4.1 外源ABA处理对菠萝品质的影响及其机理 | 第61-63页 |
| 4.1.1 ABA对菠萝成熟进程和品质的影响 | 第61页 |
| 4.1.2 ABA对菠萝黑心病的影响及其机理 | 第61-63页 |
| 4.2 ABA和赤霉素的拮抗作用对菠萝黑心病的影响 | 第63-64页 |
| 4.3 ABA和乙烯的拮抗作用对菠萝黑心病的影响 | 第64-66页 |
| 4.4 菠萝赤霉素代谢基因Ac GA2ox对内源GA含量的调控 | 第66-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 一、部分试验的图片 | 第77-79页 |
| 二、攻读硕士期间发表的论文 | 第79页 |
