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茄子SmNAC转录因子表达特性及功能鉴定分析

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略词表(Abbreviation)第7-11页
1 前言第11-18页
    1.1 NAC基因的研究进展第11-15页
        1.1.1 NAC转录因子的结构特征分析第11-12页
        1.1.2 NAC家族转录因子的生物学功能研究第12-15页
            1.1.2.1 NAC家族转录因子参与了植物生长发育中的调控第12页
            1.1.2.2 NAC家族转录因子参与植物的逆境胁迫应答有关第12-13页
            1.1.2.3 NAC家族转录因子参与了植物的抗病性的调控第13页
            1.1.2.4 NAC家族转录因子参与了植物体次生生长的调控第13-14页
            1.1.2.5 NAC家族转录因子参与植物激素信号的转导第14页
            1.1.2.6 NAC家族转录因子参与果实成熟的调控第14-15页
    1.2 茄子抗青枯病的研究进展第15-17页
        1.2.1 植物抗青枯病致病机理研究第15-16页
        1.2.2 植物抗青枯病遗传研究第16页
        1.2.3 茄子抗青枯病性状连锁分子标记研究进展第16-17页
    1.3 研究的目的及意义第17-18页
2 材料与方法第18-31页
    2.1 实验材料第18页
        2.1.1 植株材料第18页
        2.1.2 载体第18页
        2.1.3 菌株第18页
    2.2 方法第18-31页
        2.2.1 茄子RNA的提取第18页
        2.2.2 茄子DNA的提取第18页
        2.2.3 SmNAC生物信息学分析第18-19页
        2.2.4 青枯病菌的分离和接种第19-20页
        2.2.5 大肠杆菌E.coli DH5α感受态的制备第20页
        2.2.6 连接产物转化大肠杆菌E.coli DH5α感受态第20页
        2.2.7 农杆菌感受态的制备第20-21页
        2.2.8 连接产物转化农杆菌感受态第21页
        2.2.9 亚细胞定位第21-23页
            2.2.9.1 SmNAC亚细胞定位载体构建第21-22页
            2.2.9.2 原生质体的制备及PEG诱导融合第22-23页
        2.2.10 SmNAC在茄子中的组织免疫化学分析第23页
        2.2.11 SmNAC的VIGS载体的构建第23-26页
            2.2.11.1 SmNAC的VIGS载体的构建第23-24页
            2.2.11.2 PTRV-2 GV3101植株材料的侵染第24-25页
            2.2.11.3 qRT-PCR测定不同接种时期SmNAC和各信号基因的表达量第25-26页
        2.2.12 SmNAC的超表达载体的构建及遗传转化第26-31页
            2.2.12.1 超表达载体的构建第26-27页
            2.2.12.2 茄子的遗传转化第27-30页
            2.2.12.3 转基因植株的检测第30页
            2.2.12.4 qRT-PCR 测定 SA 途径中各信号基因的表达量第30-31页
3 结果第31-51页
    3.1 SmNAC生物信息学分析第31-40页
        3.1.1 SmNAC序列分析第31-35页
        3.1.2 SmNAC蛋白的理化性质分析第35-36页
        3.1.3 SmNAC二级结构预测第36-37页
        3.1.4 SmNAC的功能注释第37-40页
    3.2 SmNAC亚细胞定位分析第40-41页
    3.3 SmNAC表达特性与免疫组织化学分析第41-44页
        3.3.1 SmNAC表达特性分析第41-42页
        3.3.2 SmNAC组织化学免疫分析第42-44页
    3.4 SmNAC功能研究第44-49页
        3.4.1 VIGS鉴定SmNAC功能第44-45页
            3.4.1.1 VIGS载体构建第44页
            3.4.1.2 SmNAC沉默植株青枯病抗性鉴定第44-45页
        3.4.2 超表达鉴定SmNAC功能第45-49页
            3.4.2.1 超表达载体的载体构建第45-46页
            3.4.2.2 转基因植株的分子生物学检测第46-48页
            3.4.2.3 转基因植株的青枯病抗性鉴定第48-49页
    3.5 SA途径中信号基因的表达分析第49-51页
        3.5.1 SmNAC沉默后对各信号基因的表达影响分析第49-50页
        3.5.2 SmNAC过表达后对各信号基因的表达影响分析第50-51页
4 讨论与结论第51-55页
    4.1 讨论第51-54页
        4.1.1 NAC结构分析第51页
        4.1.2 SmNAC在抗青枯病中的作用第51-53页
        4.1.3 SmNAC参与调控抗逆途径信号基因表达分析第53-54页
    4.2 结论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-63页
附录A 读研期间发表的论文第63-64页
附录B 附图第64-65页

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