摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第7-11页 |
1 前言 | 第11-18页 |
1.1 NAC基因的研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 NAC转录因子的结构特征分析 | 第11-12页 |
1.1.2 NAC家族转录因子的生物学功能研究 | 第12-15页 |
1.1.2.1 NAC家族转录因子参与了植物生长发育中的调控 | 第12页 |
1.1.2.2 NAC家族转录因子参与植物的逆境胁迫应答有关 | 第12-13页 |
1.1.2.3 NAC家族转录因子参与了植物的抗病性的调控 | 第13页 |
1.1.2.4 NAC家族转录因子参与了植物体次生生长的调控 | 第13-14页 |
1.1.2.5 NAC家族转录因子参与植物激素信号的转导 | 第14页 |
1.1.2.6 NAC家族转录因子参与果实成熟的调控 | 第14-15页 |
1.2 茄子抗青枯病的研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 植物抗青枯病致病机理研究 | 第15-16页 |
1.2.2 植物抗青枯病遗传研究 | 第16页 |
1.2.3 茄子抗青枯病性状连锁分子标记研究进展 | 第16-17页 |
1.3 研究的目的及意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-31页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.1.1 植株材料 | 第18页 |
2.1.2 载体 | 第18页 |
2.1.3 菌株 | 第18页 |
2.2 方法 | 第18-31页 |
2.2.1 茄子RNA的提取 | 第18页 |
2.2.2 茄子DNA的提取 | 第18页 |
2.2.3 SmNAC生物信息学分析 | 第18-19页 |
2.2.4 青枯病菌的分离和接种 | 第19-20页 |
2.2.5 大肠杆菌E.coli DH5α感受态的制备 | 第20页 |
2.2.6 连接产物转化大肠杆菌E.coli DH5α感受态 | 第20页 |
2.2.7 农杆菌感受态的制备 | 第20-21页 |
2.2.8 连接产物转化农杆菌感受态 | 第21页 |
2.2.9 亚细胞定位 | 第21-23页 |
2.2.9.1 SmNAC亚细胞定位载体构建 | 第21-22页 |
2.2.9.2 原生质体的制备及PEG诱导融合 | 第22-23页 |
2.2.10 SmNAC在茄子中的组织免疫化学分析 | 第23页 |
2.2.11 SmNAC的VIGS载体的构建 | 第23-26页 |
2.2.11.1 SmNAC的VIGS载体的构建 | 第23-24页 |
2.2.11.2 PTRV-2 GV3101植株材料的侵染 | 第24-25页 |
2.2.11.3 qRT-PCR测定不同接种时期SmNAC和各信号基因的表达量 | 第25-26页 |
2.2.12 SmNAC的超表达载体的构建及遗传转化 | 第26-31页 |
2.2.12.1 超表达载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.12.2 茄子的遗传转化 | 第27-30页 |
2.2.12.3 转基因植株的检测 | 第30页 |
2.2.12.4 qRT-PCR 测定 SA 途径中各信号基因的表达量 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-51页 |
3.1 SmNAC生物信息学分析 | 第31-40页 |
3.1.1 SmNAC序列分析 | 第31-35页 |
3.1.2 SmNAC蛋白的理化性质分析 | 第35-36页 |
3.1.3 SmNAC二级结构预测 | 第36-37页 |
3.1.4 SmNAC的功能注释 | 第37-40页 |
3.2 SmNAC亚细胞定位分析 | 第40-41页 |
3.3 SmNAC表达特性与免疫组织化学分析 | 第41-44页 |
3.3.1 SmNAC表达特性分析 | 第41-42页 |
3.3.2 SmNAC组织化学免疫分析 | 第42-44页 |
3.4 SmNAC功能研究 | 第44-49页 |
3.4.1 VIGS鉴定SmNAC功能 | 第44-45页 |
3.4.1.1 VIGS载体构建 | 第44页 |
3.4.1.2 SmNAC沉默植株青枯病抗性鉴定 | 第44-45页 |
3.4.2 超表达鉴定SmNAC功能 | 第45-49页 |
3.4.2.1 超表达载体的载体构建 | 第45-46页 |
3.4.2.2 转基因植株的分子生物学检测 | 第46-48页 |
3.4.2.3 转基因植株的青枯病抗性鉴定 | 第48-49页 |
3.5 SA途径中信号基因的表达分析 | 第49-51页 |
3.5.1 SmNAC沉默后对各信号基因的表达影响分析 | 第49-50页 |
3.5.2 SmNAC过表达后对各信号基因的表达影响分析 | 第50-51页 |
4 讨论与结论 | 第51-55页 |
4.1 讨论 | 第51-54页 |
4.1.1 NAC结构分析 | 第51页 |
4.1.2 SmNAC在抗青枯病中的作用 | 第51-53页 |
4.1.3 SmNAC参与调控抗逆途径信号基因表达分析 | 第53-54页 |
4.2 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附录A 读研期间发表的论文 | 第63-64页 |
附录B 附图 | 第64-65页 |