摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第12-29页 |
1.1 口蹄疫 | 第12-13页 |
1.1.1 口蹄疫简介 | 第12-13页 |
1.1.2 口蹄疫病毒基因组结构及其功能 | 第13页 |
1.2 病毒样颗粒 | 第13-15页 |
1.2.1 病毒样颗粒疫苗具有的优势 | 第14-15页 |
1.2.2 病毒样颗粒疫苗的分类 | 第15页 |
1.2.3 口蹄疫病毒样颗粒 | 第15页 |
1.3 免疫反应 | 第15-17页 |
1.3.1 体液免疫反应 | 第16页 |
1.3.2 细胞免疫反应 | 第16-17页 |
1.4 佐剂 | 第17-21页 |
1.4.1 传统佐剂 | 第18-19页 |
1.4.2 纳米佐剂 | 第19-21页 |
1.5 介孔二氧化硅 | 第21-26页 |
1.5.1 介孔二氧化硅的合成方法 | 第22-23页 |
1.5.2 介孔纳米二氧化硅的生物相容性和安全评价 | 第23页 |
1.5.3 介孔中空二氧化硅在疫苗类药物缓释方面的应用 | 第23-26页 |
1.6 本文选题意义和研究内容 | 第26-29页 |
第二章介孔纳米二氧化硅的制备和表征 | 第29-38页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 实验部分 | 第29-30页 |
2.2.1 实验试剂 | 第29页 |
2.2.2 实验仪器 | 第29-30页 |
2.3 实验步骤 | 第30-32页 |
2.3.1 介孔纳米二氧化硅的制备 | 第30页 |
2.3.2 纯化蛋白 | 第30-31页 |
2.3.2.1 His - Tag融合蛋白的纯化原理 | 第30页 |
2.3.2.2 LB液 体培养基的配制 | 第30页 |
2.3.2.3 转化 | 第30-31页 |
2.3.2.4 FMDV衣壳蛋白VP0,VP3 和VP1的表达 | 第31页 |
2.3.2.5 FMDV衣壳蛋白VP0,VP3 和VP1的纯化 | 第31页 |
2.3.3 ULP1的SDS - PAGE分析 | 第31-32页 |
2.3.4 口蹄疫病毒样颗粒的体外组装 | 第32页 |
2.3.5 粒径分布图 | 第32页 |
2.4 结果与讨论 | 第32-37页 |
2.4.1 电镜分析 | 第32-33页 |
2.4.2 氮气吸附脱附和孔径分布 | 第33页 |
2.4.3 蛋白纯化 | 第33-35页 |
2.4.4 ULP1 酶的纯化 | 第35页 |
2.4.5 O型 口蹄疫衣壳蛋白 | 第35页 |
2.4.6 酶切鉴定 | 第35-36页 |
2.4.7 粒径分布 | 第36-37页 |
2.5 本章小结 | 第37-38页 |
第三章 中空多孔硅作为口蹄疫病毒衣壳蛋白缓释载体的应用 | 第38-49页 |
3.1 引言 | 第38页 |
3.2 实验部分 | 第38页 |
3.2.1 实验试剂 | 第38页 |
3.2.2 实验动物 | 第38页 |
3.2.3 实验仪器 | 第38页 |
3.3 实验步骤 | 第38-44页 |
3.3.1 介孔硅吸附口蹄疫病毒样颗粒实验 | 第38-39页 |
3.3.1.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第39页 |
3.3.1.2 蛋白吸附曲线 | 第39页 |
3.3.2 动物免疫 | 第39页 |
3.3.3 检测F M D V特 异性杭体水平 | 第39-40页 |
3.3.3.1 原理 | 第39-40页 |
3.3.3.2 实验操作 | 第40页 |
3.3.4 细胞因子测定 | 第40-41页 |
3.3.4.1 γ-干扰素 | 第40-41页 |
3.3.5 豚鼠T淋 巴细胞增殖试验 | 第41-43页 |
3.3.5.1 原理 | 第41-43页 |
3.3.5.2 试剂与溶液的配制 | 第43页 |
3.3.6 方法 | 第43页 |
3.3.7 淋巴细胞悬液的制备 | 第43-44页 |
3.4 实验结果讨论 | 第44-48页 |
3.4.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第44-45页 |
3.4.2 吸附蛋白曲线 | 第45页 |
3.4.3 抗体水平 | 第45-46页 |
3.4.4 细胞因子 | 第46-47页 |
3.4.5 MTT结果 | 第47-48页 |
3.5 本章小结 | 第48-49页 |
第四章 豚鼠攻毒保护实验 | 第49-53页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 实验部分 | 第49页 |
4.2.1 实验材料 | 第49页 |
4.2.2 实验动物 | 第49页 |
4.3 实验步骤 | 第49-50页 |
4.3.1 预实验 | 第49-50页 |
4.3.2 豚鼠攻毒试验 | 第50页 |
4.4 结果讨论 | 第50-52页 |
4.4.1 预实验结果 | 第50-51页 |
4.4.2 豚鼠攻毒保护实验效果 | 第51-52页 |
4.5 本章小结 | 第52-53页 |
总结与展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-59页 |
攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第59页 |