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液泡膜ATP酶亚基通过使巨噬细胞极化调节胃癌细胞的生物学行为

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
引言第9-11页
第一章 实验资料第11-13页
    1.1 细胞及试剂第11页
    1.2 主要仪器及耗材第11-12页
    1.3 试剂配制第12-13页
        1.3.1 RPMI1640细胞培养基的配置第12页
        1.3.2 M-CSF和a2NTD的配置第12-13页
第二章 实验方法第13-20页
    第一部分第13-17页
        2.1 a2NTD在调节巨噬细胞极化方面的作用第13-17页
            2.1.1 Ficoll密度梯度离心法分离培养外周血巨噬细胞第13页
            2.1.2 实验分组及处理第13-14页
            2.1.3 巨噬细胞的鉴定第14-17页
                2.1.3.1 瑞氏染色法鉴定各组巨噬细胞形态第14页
                2.1.3.2 双色免疫荧光细胞化学法检测巨噬细胞膜表面抗原的表达情况第14-15页
                2.1.3.3 酶联免疫分析(ELISA)检测细胞培养上清中IL-10和IL-12的分泌第15-17页
    第二部分第17-20页
        2.2 极化后的巨噬细胞对胃癌细胞生物学行为的影响第17-19页
            2.2.1 SGC-7901胃癌细胞株的复苏、传代与培养第17页
                2.2.1.1 SGC-7901胃癌细胞株的复苏与培养第17页
                2.2.1.2 SGC-7901胃癌细胞株的传代培养第17页
            2.2.2 实验分组及处理第17-18页
            2.2.3 极化后的巨噬细胞对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的影响第18-19页
                2.2.3.1 CCK-8 法检测胃癌SGC-7901细胞的增殖活力第18页
                2.2.3.2 Hoechst染色检测胃癌SGC-7901细胞的凋亡第18-19页
                2.2.3.3 Transwell侵袭实验检测胃癌SGC-7901细胞的侵袭力第19页
        2.3 统计学方法第19-20页
第三章 实验结果第20-35页
    第一部分第20-27页
        3.1 a2NTD在调节巨噬细胞极化方面的相关实验结果第20-27页
            3.1.1 单个核细胞的诱导培养第20页
            3.1.2 巨噬细胞的培养结果第20-21页
            3.1.3 巨噬细胞的鉴定结果第21-27页
                3.1.3.1 瑞氏染色法鉴定巨噬细胞形态第21页
                3.1.3.2 双色免疫荧光细胞化学法检测巨噬细胞膜表面抗原的表达情况第21-22页
                3.1.3.3 巨噬细胞相关细胞因子IL-10和IL-12的表达情况第22-27页
                    3.1.3.3.1 根据标准品的浓度及对应的OD值计算直线回归方程第22-23页
                    3.1.3.3.2 4组细胞上清液中IL-10和IL-12的分泌水平检测第23-24页
                    3.1.3.3.3 析因设计分析a2NTD和M-CSF对IL-10、IL-12分泌的影响第24-27页
                    3.1.3.3.4 a2NTD组巨噬细胞相关细胞因子IL-10和IL-12分泌的相关性第27页
    第二部分第27-35页
        3.2 极化后的巨噬细胞对胃癌细胞生物学行为影响的相关实验结果第27-35页
            3.2.1 胃癌SGC-7901细胞生长曲线的测定第27-31页
                3.2.1.1 胃癌SGC-7901细胞标准生长曲线OD490测定值第27-28页
                3.2.1.2 a2NTD组、对照组和空白组生长曲线OD490测定值第28-29页
                3.2.1.3 a2NTD组、对照组和空白组各时间点细胞总数第29-30页
                3.2.1.4 根据各时间点细胞数绘制各组细胞168小时生长曲线第30-31页
            3.2.2 Hoechst检测胃癌细胞的凋亡第31-33页
                3.2.2.1 荧光显微镜下观察各组胃癌细胞的形态第31页
                3.2.2.2 各组细胞凋亡率第31-33页
            3.2.3 Transwell侵袭实验检测胃癌细胞侵袭力第33-35页
                3.2.3.1 各组相对穿膜细胞数第33-35页
第四章 讨论第35-38页
结论第38-39页
参考文献第39-42页
文献综述第42-51页
    综述参考文献第47-51页
攻读学位期间的研究成果第51-52页
致谢第52-53页

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