摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1 橘小实蝇概述 | 第12页 |
2 昆虫免疫 | 第12-14页 |
2.1 昆虫细胞免疫 | 第13页 |
2.2 昆虫体液免疫 | 第13-14页 |
2.3 昆虫肠道免疫 | 第14页 |
3 肽聚糖识别蛋白 | 第14-15页 |
4 昆虫肠道微生物 | 第15-21页 |
4.1 肠道微生物对昆虫的作用 | 第16-18页 |
4.1.1 参与代谢,提供营养物质 | 第16-17页 |
4.1.2 提高宿主昆虫定殖抗力 | 第17-18页 |
4.1.3 肠道微生物与昆虫免疫 | 第18页 |
4.2 实蝇肠道微生物研究 | 第18-19页 |
4.3 肠道微生物调控策略 | 第19-21页 |
5 本研究的目的意义及创新点 | 第21-22页 |
5.1 本研究的目的意义 | 第21页 |
5.2 本研究的创新点 | 第21-22页 |
6 技术路线 | 第22-23页 |
第二章 基因克隆及表达模式检测 | 第23-48页 |
1 材料与方法 | 第23-48页 |
1.1 材料 | 第23-25页 |
1.1.1 供试昆虫 | 第23-24页 |
1.1.2 实验常用仪器和设备 | 第24页 |
1.1.3 培养基、常用缓冲液及抗生素的配制 | 第24-25页 |
1.1.4 主要试剂及试剂盒 | 第25页 |
1.2 实验方法 | 第25-31页 |
1.2.1 橘小实蝇整虫总 RNA 提取 | 第25-26页 |
1.2.2 引物的设计与合成 | 第26-27页 |
1.2.3 RT-PCR 扩增相关基因片段 | 第27-28页 |
1.2.4 PCR 产物的克隆与测序 | 第28-30页 |
1.2.5 3'RACE 和 5’RACE扩增 | 第30页 |
1.2.6 扩增效率确认 | 第30页 |
1.2.7 目的基因的筛选 | 第30-31页 |
1.2.8 基因表达模式检测 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-46页 |
2.1 橘小实蝇总RNA提取 | 第31页 |
2.2 RT-PCR 扩增相关基因片段 | 第31页 |
2.3 PCR 产物的克隆与测序 | 第31-41页 |
2.4 荧光引物扩增效率确认 | 第41-43页 |
2.5 目的基因的筛选 | 第43-45页 |
2.6 表达模式检测 | 第45-46页 |
3 小结 | 第46-48页 |
第三章 PGRP-LB和PGRP-SB基因的免疫功能与RNAi效应研究 | 第48-66页 |
1 材料与方法 | 第48-55页 |
1.1 材料 | 第48-49页 |
1.2 实验方法 | 第49-55页 |
2 结果与分析 | 第55-64页 |
2.1 目标基因dsRNA检测 | 第55-57页 |
2.2 病原菌液注射感染对橘小实蝇系统免疫的影响 | 第57-58页 |
2.3 病原菌液喂食感染对橘小实蝇肠道免疫的影响 | 第58-60页 |
2.4 PGRP-LB和PGRP-SB基因的dsRNA干扰效果 | 第60页 |
2.5 PGRP-LB和PGRP-SB干扰后菌液注射感染处理 | 第60-62页 |
2.6 PGRP-LB和PGRP-SB干扰后菌液喂食感染处理 | 第62页 |
2.7 肠道菌群变化 | 第62-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
结论与展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-78页 |
附录 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |