| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1.1 引言 | 第13-14页 |
| 1.2 微生物对Cu/Zn的抗性机制 | 第14-26页 |
| 1.2.1 Cu/Zn毒性的分子机制 | 第14-16页 |
| 1.2.2 微生物对Cu的抗性机制 | 第16-20页 |
| 1.2.3 微生物对Zn的抗性机制 | 第20-25页 |
| 1.2.4 根瘤菌的重金属抗性机制 | 第25-26页 |
| 1.3 重金属抗性的根瘤菌促进重金属污染土壤的生物修复 | 第26-31页 |
| 1.3.1 植物根际促生菌-植物联合修复重金属污染土壤 | 第26-28页 |
| 1.3.2 根瘤菌在微生物-植物联合修复中的作用 | 第28-30页 |
| 1.3.3 根瘤菌重金属抗性因子的作用 | 第30-31页 |
| 1.4 研究内容及技术路线 | 第31-33页 |
| 1.4.1 本文选题依据 | 第31页 |
| 1.4.2 本文研究内容 | 第31-32页 |
| 1.4.3 本文技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 Cu和Zn胁迫下S. meliloti CCNWSX0020的转录组分析 | 第33-50页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 实验材料和仪器 | 第33-34页 |
| 2.2.1 供试菌株和培养基 | 第33页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第33-34页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.3.1 供试菌株的活化及检测 | 第34-35页 |
| 2.3.2 S. meliloti CCNWSX0020 RNA提取 | 第35页 |
| 2.3.3 RNA质量检测 | 第35-36页 |
| 2.3.4 RNA-Seq测序流程 | 第36页 |
| 2.3.5 测序数据分析 | 第36-37页 |
| 2.3.6 转录组测序数据验证 | 第37-38页 |
| 2.4 结果与分析 | 第38-47页 |
| 2.4.1 菌株纯化检测 | 第38页 |
| 2.4.2 RNA样品检测 | 第38-39页 |
| 2.4.3 转录组测序结果 | 第39-47页 |
| 2.5 讨论 | 第47-50页 |
| 第三章 S. meliloti CCNWSX0020中P_(1B)-type ATPase功能研究 | 第50-71页 |
| 3.1 引言 | 第50页 |
| 3.2 实验材料和仪器 | 第50-52页 |
| 3.2.1 供试菌株和培养基 | 第50-51页 |
| 3.2.2 实验所用试剂（盒） | 第51-52页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-58页 |
| 3.3.1 P_(1B)-type ATPase生物信息学分析 | 第52页 |
| 3.3.2 基因敲除 | 第52-55页 |
| 3.3.3 突变体重金属敏感性检测 | 第55页 |
| 3.3.4 重金属敏感的突变体功能互补分析 | 第55-56页 |
| 3.3.5 细胞内重金属含量测定 | 第56-57页 |
| 3.3.6 抗氧化分析 | 第57页 |
| 3.3.7 实时荧光定量PCR分析 | 第57-58页 |
| 3.4 结果与分析 | 第58-68页 |
| 3.4.1 S. meliloti CCNWSX0020中的P_(1B)-type ATPase生物信息学分析 | 第58-59页 |
| 3.4.2 基因敲除突变体构建 | 第59-60页 |
| 3.4.3 突变体金属敏感性检测 | 第60-61页 |
| 3.4.4 突变体功能互补分析 | 第61-66页 |
| 3.4.5 copA1b和zntA基因的表达分析 | 第66页 |
| 3.4.6 细胞内重金属含量测定 | 第66-67页 |
| 3.4.7 突变体抗氧化酶活性测定 | 第67-68页 |
| 3.5 讨论 | 第68-71页 |
| 第四章 Cu/Zn抗性相关操纵子的功能验证 | 第71-83页 |
| 4.1 引言 | 第71页 |
| 4.2 实验材料和仪器 | 第71-72页 |
| 4.2.1 供试菌株和培养基 | 第71-72页 |
| 4.2.2 实验所用试剂（盒） | 第72页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第72页 |
| 4.3 实验方法 | 第72-75页 |
| 4.3.1 生物信息学分析 | 第72页 |
| 4.3.2 基因表达分析 | 第72-73页 |
| 4.3.3 共转录验证 | 第73-74页 |
| 4.3.4 基因敲除突变体构建 | 第74页 |
| 4.3.5 突变体重金属敏感性检测 | 第74-75页 |
| 4.4 结果与分析 | 第75-80页 |
| 4.4.1 Cu/Zn抗性相关基因的生物信息学分析 | 第75-78页 |
| 4.4.2 Cu/Zn抗性相关操纵子的基因表达分析 | 第78页 |
| 4.4.3 突变体的重金属敏感性检测 | 第78-80页 |
| 4.5 讨论 | 第80-83页 |
| 第五章 重金属抗性因子对植物修复重金属污染土壤的促进作用 | 第83-96页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 实验材料和仪器 | 第83-84页 |
| 5.2.1 供试菌株和培养基 | 第83-84页 |
| 5.2.2 实验所用试剂（盒） | 第84页 |
| 5.2.3 主要仪器 | 第84页 |
| 5.3 实验方法 | 第84-86页 |
| 5.3.1 构建表达绿色荧光蛋白的根瘤菌 | 第84页 |
| 5.3.2 根瘤菌-豆科植物的共生体系建立 | 第84-85页 |
| 5.3.3 植物各项生长指标测定 | 第85页 |
| 5.3.4 根瘤石蜡切片制作和观察 | 第85页 |
| 5.3.5 植物N含量测定 | 第85-86页 |
| 5.3.6 植物重金属含量测定 | 第86页 |
| 5.3.7 植物抗氧化酶活性测定 | 第86页 |
| 5.4 结果与分析 | 第86-93页 |
| 5.4.1 Cu/Zn敏感突变体对结瘤的影响 | 第86-89页 |
| 5.4.2 Cu/Zn敏感突变体对植物生长的影响 | 第89页 |
| 5.4.3 Cu/Zn敏感突变体对植物重金属吸收的影响 | 第89-93页 |
| 5.4.4 Cu/Zn敏感突变体对植物抗氧化酶活性的影响 | 第93页 |
| 5.5 讨论 | 第93-96页 |
| 第六章 结论与创新 | 第96-99页 |
| 6.1 结论 | 第96-98页 |
| 6.1.1 不同重金属处理条件下S. meliloti CCNWSX0020的转录组差异 | 第96页 |
| 6.1.2 P_(1B)-type ATPase参与S. meliloti CCNWSX0020的Zn/Cd/Pb抗性机制 | 第96-97页 |
| 6.1.3 MCO操纵子参与S. meliloti CCNWSX0020的多种重金属抗性机制 | 第97页 |
| 6.1.4 假定的CopG操纵子是一个新的重金属抗性操纵子 | 第97页 |
| 6.1.5 YedYZ操纵子与S. meliloti CCNWSX0020多种重金属抗性有关 | 第97-98页 |
| 6.1.6 重金属抗性因子对植物修复的促进作用 | 第98页 |
| 6.2 创新点 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 附录 | 第115-129页 |
| 缩略词 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 作者简介 | 第131页 |
