| 摘要 | 第5-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 英文缩写索引 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-22页 |
| 1.1 伤寒沙门菌简介 | 第18-19页 |
| 1.2 沙门菌mig-14 基因简介 | 第19-20页 |
| 1.3 孔道蛋白Omp C、Omp F简介 | 第20页 |
| 1.4 细菌生物膜简介 | 第20-22页 |
| 第二章 研究目的、方法、方案 | 第22-46页 |
| 2.1 研究目的 | 第22页 |
| 2.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方案 | 第23-25页 |
| 2.3.1 基因芯片分析 | 第23-24页 |
| 2.3.2 Westorn Blot法检测WT和△mig-14 中Omp C、Omp F蛋白水平 | 第24页 |
| 2.3.3 耐PB及生物膜形成能力测定 | 第24-25页 |
| 2.4 实验材料 | 第25-32页 |
| 2.4.1 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.4.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.4.3 主要溶液 | 第26-31页 |
| 2.4.4 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.5 实验方法 | 第32-46页 |
| 2.5.1 PB刺激作用下mig-14 对其他基因的影响 | 第32-35页 |
| 2.5.2 Omp C::3×Flag、Omp F::3×Flag融合突变株制备 | 第35-40页 |
| 2.5.3 伤寒沙门菌mig-14 对孔道蛋白Omp C，Omp F表达的影响 | 第40-41页 |
| 2.5.4 伤寒沙门菌△mig-14/omp F、△mig-14/omp C及△mig-14/omp C/omp F缺陷株的构建 | 第41-44页 |
| 2.5.5 伤寒沙门菌野生株与缺陷株抵制多粘菌素B杀伤能力分析 | 第44页 |
| 2.5.6 生物膜试验 | 第44-46页 |
| 第三章 实验结果 | 第46-63页 |
| 3.1 基因芯片分析 | 第46-47页 |
| 3.1.1 总RNA的抽提结果 | 第46页 |
| 3.1.2 芯片结果 | 第46-47页 |
| 3.2 实时荧光定量PCR测定 | 第47-48页 |
| 3.2.1 实时荧光定量PCR测定 | 第47-48页 |
| 3.3 WT与△mig-14 的Omp C::3×Flag、Omp F::3×Flag融合突变株制备结果 | 第48-53页 |
| 3.3.1 Omp C::3×Flag、Omp F::3×Flag融合基因上下游片段的扩增 | 第49页 |
| 3.3.2 重组载体p GMB151-Omp C::3×Flag、Omp F::3×Flag的鉴定 | 第49-52页 |
| 3.3.3 重组自杀质粒电击转化及缺陷株的筛选 | 第52-53页 |
| 3.4 伤寒沙门菌mig-14 基因缺陷对孔道蛋白表达的影响 | 第53-55页 |
| 3.4.1 Western Blot检测Omp C、Omp F在WT、△mig-14 中的表达 | 第53-55页 |
| 3.5 伤寒沙门菌△mig-14/omp C、△mig14/omp F、△mig/14/omp C/omp F缺陷株的制备 | 第55-60页 |
| 3.5.1 omp C上下游片段的扩增 | 第55-56页 |
| 3.5.2 重组载体p GMB151-△omp C的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.5.3 重组自杀质粒电击转化及缺陷株的筛选 | 第57-60页 |
| 3.6 伤寒沙门菌与各缺陷株在药物处理下生存能力分析 | 第60-61页 |
| 3.6.1 伤寒沙门菌各菌株在药物PB处理培养下的生存能力比较 | 第60页 |
| 3.6.2 伤寒沙门菌各菌株在普通LB培养下的生存能力比较 | 第60-61页 |
| 3.7 生物膜试验 | 第61-63页 |
| 3.7.1 伤寒沙门菌WT、△mig-14、△mig-14（空p BAD）与△mig-14回补株（p BAD-mig-14）生物膜生成对比分析 | 第61-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-66页 |
| 4.1 mig-14 基因的调节功能 | 第63-64页 |
| 4.2 mig-14 与外膜孔道蛋白 | 第64页 |
| 4.3 mig-14 与生物膜 | 第64-66页 |
| 第五章 主要结论及展望 | 第66-67页 |
| 5.1 主要结论 | 第66页 |
| 5.2 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第74页 |
