| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1.1 杆状病毒概述 | 第14-15页 |
| 1.1.1 杆状病毒的分类 | 第14页 |
| 1.1.2 杆状病毒的感染过程 | 第14-15页 |
| 1.1.3 家蚕核型多角体病毒 | 第15页 |
| 1.2 昆虫中RNAi研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 RNAi作用机制 | 第15-16页 |
| 1.2.2 4 种RNAi过程 | 第16-17页 |
| 1.2.3 家蚕中的RNAi | 第17-18页 |
| 1.3 RNA干扰抑制子的研究进展 | 第18-28页 |
| 1.3.1 RNA干扰抑制子分类 | 第19-25页 |
| 1.3.2 GW/WG motif | 第25-27页 |
| 1.3.3 AcMNPV的RNA干扰抑制子——p35蛋白 | 第27-28页 |
| 第二章 引言 | 第28-30页 |
| 2.1 研究背景与目的意义 | 第28-29页 |
| 2.2 研究内容 | 第29页 |
| 2.2.1 BmNPV是否存在RNA干扰抑制子的检测 | 第29页 |
| 2.2.2 对BmNPV中的RNA干扰抑制子的预测 | 第29页 |
| 2.2.3 对RNA干扰抑制子候选基因的鉴定 | 第29页 |
| 2.3 研究路线 | 第29-30页 |
| 第三章 BmNPV对家蚕RNA silencing抑制作用的检测 | 第30-42页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器试剂及溶液配制 | 第30-31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-36页 |
| 3.2.1 体外设计dsRNA | 第31-33页 |
| 3.2.2 细胞培养及铺板 | 第33-35页 |
| 3.2.3 病毒感染、报告基因及dsRNA转染 | 第35页 |
| 3.2.4 酶活测定 | 第35-36页 |
| 3.3 实验结果 | 第36-39页 |
| 3.3.1 dsRNA的合成 | 第36-37页 |
| 3.3.2 dsRNA对萤火虫荧光素酶的干涉 | 第37页 |
| 3.3.3 BmNPV抑制Bm N4-SID1细胞中的RNA干扰过程 | 第37-38页 |
| 3.3.4 BmNPV抑制Bm E细胞中的RNA干扰过程 | 第38-39页 |
| 3.4 本章讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 BmNPV的RNA silencing抑制子候选基因的预测 | 第42-48页 |
| 4.1 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.1.1 四种病毒中含GW/WG motif的蛋白的筛选 | 第42页 |
| 4.1.2 VSR预测网站对BmNPV中RNAi抑制子的预测 | 第42-43页 |
| 4.1.3 蛋白结构分析及功能分析 | 第43页 |
| 4.2 实验结果 | 第43-45页 |
| 4.2.1 TCV、SPMMV及ToRSV中含GW/WG motifs的蛋白的筛选 | 第43-44页 |
| 4.2.2 BmNPV中含GW/WG motifs的蛋白的筛选 | 第44-45页 |
| 4.2.3 VSR预测网站对BmNPV中RNA干扰抑制子的预测 | 第45页 |
| 4.3 本章分析 | 第45-48页 |
| 第五章 BmNPV的RNA silencing抑制子的鉴定分析 | 第48-78页 |
| 5.1 实验材料与试剂 | 第48-52页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 5.1.2 主要仪器试剂及溶液配制 | 第48-52页 |
| 5.2 试验方法 | 第52-63页 |
| 5.2.1 提取BmNPV病毒DNA | 第52-53页 |
| 5.2.2 基因克隆 | 第53-56页 |
| 5.2.3 重组过表达载体构建 | 第56-58页 |
| 5.2.4 RNAi抑制子的鉴定 | 第58页 |
| 5.2.5 Western blot检测 | 第58-60页 |
| 5.2.6 酶活测定 | 第60页 |
| 5.2.7 PIWI domain原核表达重组载体构建 | 第60-61页 |
| 5.2.8 PIWI domain的原核表达 | 第61-62页 |
| 5.2.9 PIWI domain真核表达载体构建 | 第62-63页 |
| 5.3 实验结果 | 第63-75页 |
| 5.3.1 14 个基因全长克隆与过表达载体构建 | 第63-66页 |
| 5.3.2 抑制子候选基因对RNAi的抑制效果检测 | 第66-71页 |
| 5.3.3 PIWI domain全长克隆及原核表达载体构建 | 第71-72页 |
| 5.3.4 PIWI domian小量原核表达及检测 | 第72-74页 |
| 5.3.5 PIWI domain真核表达载体构建及表达检测 | 第74-75页 |
| 5.4 本章分析 | 第75-78页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第78-80页 |
| 6.1 BmNPV对BmN4-SID1和BmE细胞中RNAi的抑制作用的检测 | 第78页 |
| 6.2 对BmNPV中RNAi抑制子的预测研究 | 第78页 |
| 6.3 BmNPV中RNAi抑制子候选基因的鉴定 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 在读期间发表论文及参研课题 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
