| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-28页 |
| 1.1 氮素 | 第11-14页 |
| 1.1.1 氮素的功能 | 第11-13页 |
| 1.1.2 植物体内氮素的分布及含量 | 第13页 |
| 1.1.3 当代农业氮肥施用情况及造成的环境危害 | 第13-14页 |
| 1.2 氮素的吸收与转运 | 第14-25页 |
| 1.2.1 植物对硝态氮的吸收 | 第14-19页 |
| 1.2.2 植物对硝态氮的同化 | 第19-20页 |
| 1.2.3 植物对铵态氮的吸收和利用 | 第20页 |
| 1.2.4 硝态氮调控基因 | 第20-25页 |
| 1.3 蛋白互作 | 第25-27页 |
| 1.3.1 酵母双杂交系统（Y2H） | 第25-26页 |
| 1.3.2 双分子荧光互补（BiFC） | 第26-27页 |
| 1.4 本实验的研究意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第28页 |
| 2.1.3 酶与试剂 | 第28-33页 |
| 2.1.3.1 酶 | 第28页 |
| 2.1.3.2 试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3.3 试剂盒 | 第29页 |
| 2.1.3.4 缓冲液及培养基配方 | 第29-33页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第33页 |
| 2.1.5 引物 | 第33-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-50页 |
| 2.2.1 实验材料的准备 | 第35-37页 |
| 2.2.1.1 种子的播种 | 第35页 |
| 2.2.1.2 植株的生长 | 第35-36页 |
| 2.2.1.3 种子的收集 | 第36页 |
| 2.2.1.4 种子的消毒处理 | 第36-37页 |
| 2.2.1.5 六孔板培养法 | 第37页 |
| 2.2.1.6 Magenta Box培养法 | 第37页 |
| 2.2.2 拟南芥基因组的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.3 植物总RNA的提取（试剂盒法） | 第38-39页 |
| 2.2.4 反转录 | 第39-40页 |
| 2.2.5 表达载体构建 | 第40-44页 |
| 2.2.5.1 Phusion PCR扩增 | 第40页 |
| 2.2.5.2 PCR产物回收（试剂盒法） | 第40-41页 |
| 2.2.5.3 TOPO连接反应 | 第41页 |
| 2.2.5.4 大肠杆菌感受态的制备 | 第41页 |
| 2.2.5.5 大肠杆菌的转化及鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2.5.6 质粒提取 | 第42-43页 |
| 2.2.5.7 DNA序列测定 | 第43页 |
| 2.2.5.8 LR反应 | 第43页 |
| 2.2.5.9 质粒DNA的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2.6 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第44-45页 |
| 2.2.6.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第44页 |
| 2.2.6.2 表达载体转化农杆菌 | 第44页 |
| 2.2.6.3 拟南芥的转化 | 第44-45页 |
| 2.2.7 qPCR实验技术 | 第45-46页 |
| 2.2.8 硝态氮含量测定 | 第46-47页 |
| 2.2.8.1 标准曲线的制作 | 第46页 |
| 2.2.8.2 样品中硝态氮含量测定 | 第46-47页 |
| 2.2.9 酵母双杂交 | 第47-48页 |
| 2.2.10 双分子荧光互补实验 | 第48-50页 |
| 3 实验结果与分析 | 第50-62页 |
| 3.1 NRG2与NLP7的互作分析 | 第50-52页 |
| 3.1.1 酵母双杂交实验表明NRG2能与NLP7互作 | 第50-51页 |
| 3.1.2 双分子荧光互补实验验证NRG2和NLP7的互作关系 | 第51-52页 |
| 3.2 探究NRG2在互作关系中发挥作用的区段 | 第52-56页 |
| 3.3 NRG2互作蛋白的筛选以及硝态氮调控基因的验证 | 第56-62页 |
| 3.3.1 NRG2互作蛋白的筛选 | 第56-58页 |
| 3.3.2 检测At1g20100和At5g61590突变体中硝态氮响应基因的表达 | 第58-62页 |
| 3.3.2.1 At1g20100和At5g61590 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第58-59页 |
| 3.3.2.2 突变体内硝态氮响应基因的表达量变化 | 第59-61页 |
| 3.3.2.3 At1g20100突变体内硝态氮含量检测 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第74页 |
