| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 干旱对植物的伤害 | 第12-13页 |
| 1.1.1 干旱对植物生物膜系统的影响 | 第12页 |
| 1.1.2 干旱胁迫对植物生长的影响 | 第12-13页 |
| 1.1.3 干旱对植物代谢的影响 | 第13页 |
| 1.2 抗旱生理机制 | 第13-15页 |
| 1.2.1 活性氧产生及抗氧化系统的作用 | 第13-15页 |
| 1.2.2 渗透调节 | 第15页 |
| 1.3 WHIRLY转录因子研究进展 | 第15-20页 |
| 1.3.1 WHIRLY蛋白分子结构 | 第16页 |
| 1.3.2 WHIRLY蛋白晶体结构 | 第16-17页 |
| 1.3.3 WHIRLY转录因子在植物中的分布 | 第17-18页 |
| 1.3.4 WHIRLY蛋白功能 | 第18-20页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 材料处理 | 第22页 |
| 2.1.3 菌株与载体 | 第22页 |
| 2.1.4 酶与各种生化试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.5 PCR引物 | 第23-24页 |
| 2.1.6 营养液和培养基配方 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 植物总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 c DNA第一条链的合成 | 第26页 |
| 2.2.3 番茄Sl WHY2基因的克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.4 目的片段的回收 | 第27-28页 |
| 2.2.5 真核表达载体构建 | 第28-31页 |
| 2.2.5.1 正义克隆载体构建 | 第28页 |
| 2.2.5.2 大肠杆菌DH5α 感受态的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.5.3 转化及克隆筛选 | 第29页 |
| 2.2.5.4 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.5.5 正义表达载体构建 | 第30页 |
| 2.2.5.6 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞制备 | 第30-31页 |
| 2.2.5.7 农杆菌转化 | 第31页 |
| 2.2.6 农杆菌介导的烟草转化 | 第31-32页 |
| 2.2.7 转基因烟草植株的PCR检测 | 第32-34页 |
| 2.2.7.1 CTAB法提取叶片基因组DNA | 第32页 |
| 2.2.7.2 过表达植株的PCR筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.7.3 转录水平的鉴定 | 第33页 |
| 2.2.7.4 实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 2.2.8 转基因株系的抗逆试验 | 第34页 |
| 2.2.8.1 烟草抗干旱萌发试验 | 第34页 |
| 2.2.8.2 烟草幼苗干旱胁迫处理 | 第34页 |
| 2.2.8.3 烟草成苗胁迫处理 | 第34页 |
| 2.2.9 生理指标测定 | 第34-38页 |
| 2.2.9.1 酶活性测定 | 第34-35页 |
| 2.2.9.2 氧自由基的测定 | 第35页 |
| 2.2.9.3 过氧化氢含量测定 | 第35-36页 |
| 2.2.9.4 叶片相对电导率测定 | 第36页 |
| 2.2.9.5 叶片相对含水量测定 | 第36页 |
| 2.2.9.6 植物组织中丙二醛含量的测定 | 第36页 |
| 2.2.9.7 植物组织中游离脯氨酸含量测定 | 第36-37页 |
| 2.2.9.8 NBT、DAB染色和台盼蓝染色 | 第37页 |
| 2.2.9.9 植物对病原菌的抗性分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-51页 |
| 3.1 SlWHY2基因的分离和结构特征 | 第38-40页 |
| 3.1.1 SlWHY2基因的克隆 | 第38页 |
| 3.1.2 SlWHY2基因序列分析 | 第38-40页 |
| 3.2 SlWHY2基因在番茄中的表达分析 | 第40-41页 |
| 3.2.1 SlWHY2基因组织特异性表达 | 第40-41页 |
| 3.2.2 SlWHY2基因在不同胁迫条件下的表达分析 | 第41页 |
| 3.3 SlWHY2正义表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.4 SlWHY2基因在烟草中的遗传转化 | 第42-44页 |
| 3.5 SlWHY2过表达提高了转基因烟草的抗旱性 | 第44-49页 |
| 3.5.1 SlWHY2转基因烟草在干旱胁迫条件下的生长分析 | 第44-45页 |
| 3.5.2 SlWHY2转基因烟草在干旱条件下的生理指标的变化 | 第45-46页 |
| 3.5.3 SlWHY2转基因烟草植株积累较少的ROS | 第46-48页 |
| 3.5.4 SlWHY2过表达增强了转基因烟草中应激防御基因的表达 | 第48-49页 |
| 3.6 Sl WHY2过表达增强了转基因烟草的抗病性 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第65页 |
