| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 植物体中的萜类化合物 | 第12-16页 |
| 1.1.1 萜类物质简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 萜类物质的生物学功能 | 第13页 |
| 1.1.3 萜类物质的生物合成途径 | 第13-15页 |
| 1.1.4 影响萜类物质合成的因素 | 第15-16页 |
| 1.2 HMGR的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.1 HMGR简介 | 第16页 |
| 1.2.2 HMGR的蛋白结构及定位 | 第16-17页 |
| 1.2.3 HMGR的调控因素 | 第17页 |
| 1.2.4 不同物种中HMGR的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.5 HMGR的生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.3 基因组学与生物信息学 | 第19-20页 |
| 1.3.1 基因组学 | 第19页 |
| 1.3.2 生物信息学 | 第19-20页 |
| 1.4 研究内容及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 材料培养及处理 | 第21页 |
| 2.1.3 菌株及质粒 | 第21页 |
| 2.1.4 酶及生化试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 引物 | 第21-22页 |
| 2.1.6 数据库及软件资源 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 HMGR基因的鉴定 | 第23页 |
| 2.2.2 HMGR蛋白性质及结构分析 | 第23页 |
| 2.2.3 苹果HMGR基因进化树构建 | 第23页 |
| 2.2.4 苹果HMGR基因结构及蛋白保守结构域分析 | 第23-24页 |
| 2.2.5 苹果HMGR基因的染色体定位及基因复制分析 | 第24页 |
| 2.2.6 苹果HMGR基因启动子顺式作用元件分析 | 第24页 |
| 2.2.7 总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.8 RNA的反转录 | 第25页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
| 2.2.10 真核表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.10.1 pBI121+Ht表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.10.2 pBI121+Ht+HMGR1L表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.11 转化农杆菌 | 第28-29页 |
| 2.2.11.1 LBA4404根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 2.2.11.2 冻融法转化农杆菌 | 第28-29页 |
| 2.2.12 本生烟的遗传转化 | 第29页 |
| 2.2.12.1 农杆菌菌液的培养 | 第29页 |
| 2.2.12.2 烟草的转化及培养 | 第29页 |
| 2.2.13 基因组水平筛选转基因本生烟 | 第29-30页 |
| 2.2.13.1 CTAB法提取基因组DNA | 第29-30页 |
| 2.2.13.2 PCR鉴定 | 第30页 |
| 2.2.14 转录水平筛选转基因本生烟 | 第30-31页 |
| 2.2.15 烟草挥发物的测定 | 第31页 |
| 2.2.16 ELISA法测定激素含量 | 第31页 |
| 2.2.17 本生烟色素含量测定 | 第31-32页 |
| 2.2.18 胁迫相关生理指标的测定 | 第32-34页 |
| 2.2.18.1 光合参数的测定 | 第32页 |
| 2.2.18.2 丙二醛含量的测定 | 第32页 |
| 2.2.18.3 超氧阴离子自由基测定 | 第32页 |
| 2.2.18.4 可溶性蛋白含量测定 | 第32页 |
| 2.2.18.5 抗氧化酶活性测定 | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-55页 |
| 3.1 苹果HMGR基因家族生物信息学分析 | 第34-42页 |
| 3.1.1 苹果HMGR基因家族的鉴定 | 第34页 |
| 3.1.2 苹果HMGR基因的染色体定位 | 第34-35页 |
| 3.1.3 苹果HMGR蛋白特性分析 | 第35-36页 |
| 3.1.4 苹果HMGR蛋白二级结构分析及三级结构预测 | 第36-37页 |
| 3.1.5 苹果HMGR氨基酸的多序列比对和进化树构建 | 第37-39页 |
| 3.1.6 苹果HMGR基因结构分析 | 第39-40页 |
| 3.1.7 苹果HMGR蛋白的保守结构域分析 | 第40-41页 |
| 3.1.8 苹果HMGR基因的复制现象分析 | 第41-42页 |
| 3.2 苹果HMGR基因家族表达模式分析 | 第42-47页 |
| 3.2.1 HMGR基因家族的组织表达模式 | 第42-43页 |
| 3.2.2 苹果HMGR基因对不同逆境胁迫处理的响应 | 第43-47页 |
| 3.2.2.1 HMGR基因启动子逆境响应元件分析 | 第44-45页 |
| 3.2.2.2 HMGR基因逆境响应模式分析 | 第45-47页 |
| 3.3 苹果HMGR1L基因的异源表达 | 第47-55页 |
| 3.3.1 Ht::HMGR1L表达载体的构建 | 第47页 |
| 3.3.2 Ht::HMGR1L转基因本生烟的筛选 | 第47-48页 |
| 3.3.3 转基因本生烟中HMGR1L基因表达的空间特异性 | 第48-49页 |
| 3.3.4 Ht::HMGR1L过表达植株表型分析 | 第49-50页 |
| 3.3.5 HMGR1L在烟草中过表达对萜类代谢产物的影响 | 第50-52页 |
| 3.3.5.1 HMGR1L在烟草中过表达对烟草色素含量的影响 | 第50页 |
| 3.3.5.2 HMGR1L在烟草中过表达对相关激素含量的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.5.3 HMGR1L在烟草中过表达对挥发物的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.6 转基因本生烟抗低温能力检测 | 第52-55页 |
| 3.3.6.1 HMGR1L基因在低温下的表达分析 | 第52-53页 |
| 3.3.6.2 HMGR1L基因过表达提高了烟草的抗低温能力 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
