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番鸭呼肠孤病毒感染的分子致病机制的转录组学研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
中文文摘第7-14页
绪论第14-28页
    一、呼肠孤病毒简介第14-16页
        1. 呼肠孤病毒第14页
        2. 呼肠孤病毒致病机理的研究进展第14-16页
    二、番鸭呼肠孤病毒研究进展及存在的问题第16-23页
        1. MDRV的分离鉴定及病毒分子特征第16-17页
        2. MDRV致病性研究进展第17-18页
        3. 天然免疫与宿主抗病毒的研究进展第18-23页
    三、病毒感染诱导的细胞凋亡第23-24页
        1. 细胞凋亡第23页
        2. 病毒诱导的细胞凋亡的信号通路第23-24页
    四、高通量测序和转录组技术在疾病研究中的应用进展第24-26页
        1. 高通量测序第24-25页
        2. 转录组在疾病研究中的应用第25-26页
    五、本实验的研究意义与目的第26-28页
第1章 10日龄番鸭转录组数据获得与分析第28-47页
    前言第28页
    第一节 材料与方法第28-31页
        1.1 样品的采集第28页
        1.2 实验方法第28-31页
            1.2.1 RNA-SEQ的获得第28-29页
            1.2.2 信息分析流程第29-31页
    第二节 实验结果第31-43页
        1.3.1 产量统计第31页
        1.3.2 组装质量统计第31-32页
        1.3.3 COG注释第32-33页
        1.3.4 GO分类第33-34页
        1.3.5 Unigene pathway代谢通路分析第34-42页
        1.3.6 预测编码阅读框第42-43页
    第三节 讨论第43-46页
        1.4.1 转录组在动物中的应用研究第43-44页
        1.4.2 新一代高通量测序的优点及比较第44页
        1.4.3 功能注释的有关数据库第44-45页
        1.4.4 番鸭转录组数据的意义第45-46页
    第四节 小结第46-47页
第2章 感染MDRV雏番鸭脾脏转录组数据获得、分析及与对照组差异表达基因分析第47-59页
    前言第47页
    第一节 材料与方法第47-51页
        2.1 病毒第47页
        2.2 方法第47-51页
            2.2.1 动物和样品采集第47页
            2.2.2 RNA-SEQ的获得第47-48页
            2.2.3 数据的获得与分析第48-51页
    第二节 结果第51-57页
        2.3.1 测序Reads质量评估第51-53页
        2.3.2 Reads的分布统计第53-54页
        2.3.3 样品和参考基因比对的统计结果第54页
        2.3.4 基因表达量统计第54-55页
        2.3.5 基因覆盖度分析第55页
        2.3.6 差异表达基因第55-56页
        2.3.7 差异表达基因的GO功能显著性富集分析第56页
        2.3.8 差异表达基因的Pathway显著性富集分析第56-57页
    第三节 讨论第57-58页
        2.4.1 差异表达基因筛选的意义第57页
        2.4.2 MDRV感染宿主细胞的差异表达基因第57-58页
    第四节 小结第58-59页
第3章 感染MDRV雏番鸭肝脏转录组数据获得、分析及与对照组差异表达基因分析第59-68页
    前言第59页
    第一节 材料与方法第59-60页
        3.1 病毒第59页
        3.2 方法第59-60页
            3.2.1 实验动物和样品采集第59-60页
    第二节 结果第60-66页
        3.3.1 肝脏reads质量评估结果第60-61页
        3.3.2 肝脏Reads在参考基因上的分布统计第61-62页
        3.3.3 基因比对第62-63页
        3.3.4 基因表达量统计第63页
        3.3.5 基因覆盖度分析第63-64页
        3.3.6 差异基因比对第64-65页
        3.3.7 差异表达基因GO功能显著性富集分析结果第65页
        3.3.8 差异表达基因Pathway显著性富集分析第65-66页
    第三节 讨论第66-67页
        3.4.1 MDRV感染差异表达基因的筛选第66页
        3.4.2 MDRV感染肝脏差异表达基因的功能分析第66-67页
    第四节 小结第67-68页
第4章 MDRV感染后病变脾脏和肝脏差异表达基因比较分析第68-76页
    前言第68页
    第一节 材料与方法第68页
        4.1 材料第68页
        4.2 方法第68页
    第二节 结果第68-75页
        4.3.1 MERV感染肝脏和脾脏中差异表达基因数量的比较第68-69页
        4.3.2 MDRV感染肝脏和脾脏中共有差异表达基因分析第69页
        4.3.3 MDRV感染肝脏和脾脏中共同差异表达基因GO显著性富集分析第69-72页
        4.3.4 Pathway显著性富集分析第72-75页
    第三节 讨论第75页
    第四节 小结第75-76页
第5章 MDRV激活机体先天性免疫功能的分子机制第76-84页
    前言第76页
    第一节 材料与方法第76-77页
        5.1 材料第76页
        5.2方法第76-77页
            5.2.1 引物设计第76-77页
            5.2.2 RNA的提取及反转录第77页
            5.2.3 荧光定量PCR第77页
    第二节 结果第77-81页
    第三节 讨论第81-83页
        5.4.1 先天性免疫第81-82页
        5.4.2 MDRV感染激活机体先天性免疫分子机制第82-83页
    第四节 小结第83-84页
第6章 MDRV诱导肝脏细胞凋亡的分子机制第84-95页
    前言第84页
    第一节 材料与方法第84-86页
        6.1 材料第84页
        6.2 方法第84-86页
            6.2.1 MDRV感染雏番鸭诱导肝脏细胞凋亡的观察第84页
            6.2.2 差异表达基因KEGG分析第84-85页
            6.2.3 Western blot和Q-PCR验证第85-86页
            6.2.4 MDRV抑制PI3K活化促进细胞凋亡第86页
    第二节 结果第86-92页
        6.3.1 MDRV感染雏番鸭诱导肝细胞凋亡的观察第86-88页
        6.3.2 细胞凋亡差异表达基因的KEGG分析第88-90页
        6.3.3 Western blot法和Q-PCR验证分析第90-91页
        6.3.4 MDRV抑制PI3K活化诱导细胞凋亡第91-92页
    第三节 讨论第92-94页
        6.4.1 细胞凋亡与病毒感染第92-93页
        6.4.2 MDRV诱导细胞凋亡的信号转导途径第93-94页
    第四节 小结第94-95页
第7章 MDRV诱导肝脏脂肪变性的分子机制研究第95-107页
    前言第95页
    第一节 材料与方法第95-98页
        7.1 材料第95页
        7.2 方法第95-98页
    第二节 结果第98-104页
        7.3.1 MDRV诱导肝脏脂肪变性观察第98-99页
        7.3.2 MDRV感染促进肝脏中游离脂肪酸含量的增加第99页
        7.3.3 KEGG显著性富集分析MDRV感染诱导肝脂肪变性的分子机制第99-103页
        7.3.4 荧光定量PCR验证结果第103-104页
    第三节 讨论第104-106页
    第四节 小结第106-107页
结论第107-108页
附录1第108-109页
附录2第109-110页
附录3第110-112页
附录4第112-126页
附录5第126-140页
参考文献第140-154页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第154-156页
致谢第156-157页
个人简历第157-159页

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