| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-27页 |
| 1.1 糖尿病概况及发病机理 | 第14-15页 |
| 1.2 糖尿病诊断标准及治疗方法 | 第15-16页 |
| 1.2.1 糖尿病诊断标准 | 第15页 |
| 1.2.2 糖尿病治疗药物及措施 | 第15-16页 |
| 1.3 2型糖尿病动物模型 | 第16-17页 |
| 1.4 下丘脑-垂体-肾上腺轴 | 第17-21页 |
| 1.4.1 下丘脑-垂体-肾上腺轴分泌特点 | 第17-19页 |
| 1.4.2 下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱与2型糖尿病 | 第19-21页 |
| 1.5 内源性大麻素系统 | 第21-25页 |
| 1.5.1 大麻素与内源性大麻素系统 | 第21-23页 |
| 1.5.2 内源性大麻素系统在2型糖尿病发病过程中的变化 | 第23-25页 |
| 1.6 内源性大麻素系统参与HPA轴调控与糖尿病的发生 | 第25-27页 |
| 2 选题意义 | 第27页 |
| 实验部分 | 第27-59页 |
| 1 实验材料 | 第27-31页 |
| 1.1 实验动物 | 第27-28页 |
| 1.2 实验仪器 | 第28-29页 |
| 1.3 耗材与试剂 | 第29-30页 |
| 1.4 部分溶液配制 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-39页 |
| 2.1 样品采集 | 第31-32页 |
| 2.2 免疫组织化学检测CRH、CRHR1、ACTH、ACTHR、GR、CB1R、FAAH及MAGL组织分布 | 第32-33页 |
| 2.2.1 下丘脑、垂体及肾上腺石蜡切片制作 | 第32页 |
| 2.2.2 免疫组织化学SABC法 | 第32页 |
| 2.2.3 显微摄影、图像分析及数据处理 | 第32-33页 |
| 2.3 蛋白质印迹法检测CRH、CRHR1、ACTH、ACTHR、GR、CB1R、FAAH及MAGL蛋白表达量 | 第33-35页 |
| 2.3.1 组织蛋白提取 | 第33页 |
| 2.3.2 BCA蛋白质浓度测定 | 第33页 |
| 2.3.3 蛋白质电泳 | 第33-34页 |
| 2.3.4 免疫印迹 | 第34页 |
| 2.3.5 数据分析 | 第34-35页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR检测CRH、POMC、CYP11B1、CRHR1、MC2R、NR3C1、CNR1、FAAH及MGLL的基因表达量 | 第35-37页 |
| 2.4.1 引物设计及用品处理 | 第35页 |
| 2.4.2 总RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.4.3 总RNA纯度和完整性检测 | 第36页 |
| 2.4.4 去除基因组DNA及反转录 | 第36-37页 |
| 2.4.5 Real-Time PCR | 第37页 |
| 2.5 免疫酶联吸附实验检测肾上腺皮质醇含量 | 第37-38页 |
| 2.5.1 样品处理 | 第37-38页 |
| 2.5.2 肾上腺皮质醇含量检测 | 第38页 |
| 2.6 数据统计分析 | 第38-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-54页 |
| 3.1 下丘脑-垂体-肾上腺病理变化 | 第39-42页 |
| 3.2 下丘脑-垂体-肾上腺轴分泌功能变化 | 第42-50页 |
| 3.2.1 CRH、CRHR1、ACTH、ACTHR及GR免疫组织化学染色结果 | 第42-46页 |
| 3.2.2 CRH、CRHR1、ACTH、ACTHR及GR蛋白质印迹检测结果 | 第46页 |
| 3.2.3 CRH、POMC、CYP11B1、CRHR1、MC2R及NR3C1荧光定量PCR检测结果 | 第46-49页 |
| 3.2.4 肾上腺皮质醇浓度变化ELISA检测结果 | 第49-50页 |
| 3.3 下丘脑内源性大麻素受体及大麻素水解酶表达变化 | 第50-54页 |
| 3.3.1 CB1R、FAAH及MAGL免疫组织化学染色 | 第50-51页 |
| 3.3.2 CB1R、FAAH及MAGL蛋白质印迹检测结果 | 第51-52页 |
| 3.3.3 CNR1、FAAH及MGLL荧光定量PCR检测结果 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 糖尿病猕猴下丘脑-垂体-肾上腺轴激素及受体变化 | 第54-55页 |
| 4.2 糖尿病猕猴下丘脑大麻素受体及内源性大麻素水解酶变化 | 第55-56页 |
| 4.3 糖尿病发病过程中内源性大麻素系统与HPA轴紊乱的关系 | 第56-57页 |
| 5 结论与创新点 | 第57-59页 |
| 5.1 结论 | 第57-58页 |
| 5.2 创新点 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间第一作者身份发表的学术论文 | 第71页 |
