缩略词 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
前言 | 第15-27页 |
1.鼠疫耶尔森氏菌的生物学特性 | 第15页 |
2.鼠疫菌的流行病学特征及鼠疫的危害 | 第15-16页 |
3.鼠疫菌的蚤传播模型以及生物被膜形成的主要决定性因子 | 第16-19页 |
4.鼠疫菌的致病机制以及主要的毒力因子 | 第19-20页 |
5.细菌基因转录调控 | 第20-21页 |
6.鼠疫菌中影响生物被膜形成和毒力的整体调控子 | 第21-24页 |
7.研究目的、研究假设和技术路线 | 第24-27页 |
材料和方法 | 第27-48页 |
1.材料 | 第27-31页 |
·菌株和质粒 | 第27页 |
·主要的酶和试剂 | 第27-28页 |
·本研究中所用引物 | 第28-31页 |
2.方法 | 第31-48页 |
·菌种保存与培养 | 第31-32页 |
·菌株总RNA提取 | 第32页 |
·RNA逆转录及实时定量荧光PCR(Real time Quantitative PCR) | 第32-34页 |
·引物延伸实验(Primer extension assay) | 第34-37页 |
·LacZ报告基因融合实验(LacZ fusion) | 第37-41页 |
·凝胶阻滞实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA) | 第41-43页 |
·生物被膜相关表型实验 | 第43-47页 |
·小鼠毒力实验 | 第47-48页 |
结果与讨论 | 第48-83页 |
1.RovM和RovA对鼠疫菌生物被膜的形成和毒力的影响 | 第48-51页 |
·RovM/RovA分别促进/抑制生物被膜形成且抑制/促进毒力 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
2.RovM和RovA对鼠疫菌生物被膜形成相关靶基因的调控机制研究 | 第51-62页 |
·RovM直接促进hmsT表达 | 第51-53页 |
·RovM间接促进hmsHFRS表达 | 第53-54页 |
·RovM直接促进hmsCDE表达 | 第54-55页 |
·RovM间接抑制hmsP表达 | 第55-56页 |
·RovM不调控waaAE-coaD表达 | 第56-57页 |
·RovA直接抑制hmsT表达 | 第57-58页 |
·RovA间接抑制waaAE-coaD表达 | 第58页 |
·RovA不调控hmsHFRS表达 | 第58-59页 |
·RovA不调控hmsCDE表达 | 第59-60页 |
·RovA不调控hmsP表达 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
3. RovM对毒力因子pH6抗原的调控机制研究 | 第62-65页 |
·RovM间接抑制psaABC表达 | 第62-63页 |
·RovM间接抑制psaEF表达 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-65页 |
4. 生物被膜形成相关及毒力相关的调控子之间的调控机制研究 | 第65-74页 |
·RovM间接抑制YPO1635-phoPQ-YPO1632的表达 | 第65-66页 |
·RovM不调控phoPQ-YPO1632表达 | 第66-67页 |
·RovM不调控fur表达 | 第67-68页 |
·RovM直接抑制rovA的表达 | 第68-69页 |
·RovA间接抑制YPO1635-phoPQ-YPO1632表达 | 第69-70页 |
·RovA间接抑制phoPQ-YPO1632的表达 | 第70-71页 |
·RovA不调控fur表达 | 第71-72页 |
·RovA不调控rovM表达 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-74页 |
5. RovM的自调控以及温度对rovM表达的影响 | 第74-77页 |
·RovM促进自身基因的表达 | 第74-76页 |
·温度从 26 °C变化到 37 °C时,rovM基因表达水平降低 | 第76-77页 |
·讨论 | 第77页 |
6. rovM基因和rovA基因敲除后的非极性突变验证 | 第77-78页 |
7. RovM和RovA参与的调控网络以及假想模式 | 第78-82页 |
8. 总结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-93页 |
附录 | 第93-97页 |
个人简历 | 第97-99页 |
致谢 | 第99-100页 |