| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-15页 |
| 1 前言 | 第15-34页 |
| ·乙烯与植物非生物胁迫应答 | 第15-25页 |
| ·乙烯的生物合成与调控 | 第15-17页 |
| ·乙烯的信号转导途径 | 第17-19页 |
| ·乙烯在植物非生物胁迫应答中的作用 | 第19-25页 |
| ·ERF转录因子研究进展 | 第25-31页 |
| ·ERF转录因子的结构特征与分类 | 第25-27页 |
| ·ERF转录因子的功能特征 | 第27-28页 |
| ·ERF转录因子在植物逆境胁迫应答中的作用 | 第28-30页 |
| ·ERF转录因子在植物抗逆性改良中的作用 | 第30-31页 |
| ·葡萄ERF转录因子研究进展 | 第31-32页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第32-34页 |
| 2 乙烯对葡萄抗寒性的影响 | 第34-41页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·化学试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-36页 |
| ·乙烯含量测定 | 第35页 |
| ·ACC含量测定 | 第35-36页 |
| ·ACO活性测定 | 第36页 |
| ·相对电导率测定 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·低温促进葡萄内源乙烯的合成 | 第36-38页 |
| ·低温促进ACC的合成并激活ACO的活性 | 第38-39页 |
| ·乙烯正调控葡萄的抗寒性 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 3 ERF057和ERF080基因的克隆及序列分析 | 第41-56页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·菌株及载体 | 第41页 |
| ·酶及化学试剂 | 第41页 |
| ·引物合成与测序 | 第41-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·总RNA的纯化 | 第43-44页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第44页 |
| ·目的基因ORF扩增 | 第44-45页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第45页 |
| ·回收产物与载体连接 | 第45-46页 |
| ·热激法转化大肠杆菌 | 第46-47页 |
| ·质粒提取 | 第47页 |
| ·基因序列生物信息学分析 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-55页 |
| ·ERF057和ERF080基因ORF序列的获得 | 第48页 |
| ·ERF057和ERF080基因序列特征分析 | 第48-51页 |
| ·ERF057和ERF080蛋白保守域同源性比对及进化树分析 | 第51-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 4 ERF057和ERF080基因的表达模式分析 | 第56-64页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·菌株及载体 | 第56页 |
| ·酶及化学试剂 | 第56页 |
| ·引物合成与测序 | 第56-57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·实验材料的处理 | 第57页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-63页 |
| ·低温处理条件下ERF057和ERF080的表达模式 | 第58-60页 |
| ·ACC处理条件下ERF057和ERF080的表达模式 | 第60-61页 |
| ·低温和AVG互作条件下ERF057和ERF080的表达模式 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| 5 VaERF057和VaERF080在拟南芥中过表达及抗性分析 | 第64-80页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·植物材料 | 第64页 |
| ·菌株及载体 | 第64页 |
| ·酶及化学试剂 | 第64-65页 |
| ·引物合成与测序 | 第65页 |
| ·主要仪器设备 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-73页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第66-68页 |
| ·农杆菌介导法转化拟南芥 | 第68-69页 |
| ·转基因拟南芥插入及表达验证 | 第69-70页 |
| ·转基因拟南芥表型检测 | 第70页 |
| ·转基因拟南芥生理指标测定 | 第70-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-78页 |
| ·转基因拟南芥插入与表达分析 | 第73-74页 |
| ·转基因拟南芥抗寒性鉴定 | 第74-76页 |
| ·转基因拟南芥生理指标测定 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 6 VaERF057下游基因分析 | 第80-95页 |
| ·实验材料 | 第80-84页 |
| ·植物材料 | 第80页 |
| ·菌株及载体 | 第80页 |
| ·酶及化学试剂 | 第80页 |
| ·引物合成与测序 | 第80-84页 |
| ·主要仪器设备 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-87页 |
| ·酵母单杂交载体的构建 | 第84-86页 |
| ·酵母感受态的制备与转化 | 第86-87页 |
| ·RNA-Seq | 第87页 |
| ·转基因拟南芥中差异表达基因启动子顺式作用元件分析 | 第87页 |
| ·结果与分析 | 第87-93页 |
| ·VaERF057可以和GCC-box和DRE元件结合 | 第87-89页 |
| ·VaERF057下游基因分析 | 第89-93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| 7 结论与展望 | 第95-97页 |
| ·结论 | 第95-96页 |
| ·展望 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-113页 |
| 附录 | 第113-119页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
