摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-16页 |
符号说明及缩略词 | 第16-17页 |
第一章 前言 | 第17-39页 |
·表面活性剂(Surfactants) | 第17-18页 |
·生物表面活性剂(biosurfactants) | 第18-21页 |
·生物表面活性剂概述 | 第18-19页 |
·生物表面活性剂的种类及相应的微生物来源 | 第19-21页 |
·槐糖脂 | 第21-29页 |
·槐糖脂的结构和性质 | 第21-23页 |
·槐糖脂产生菌株 | 第23-25页 |
·槐糖脂的应用 | 第25-29页 |
·槐糖脂理论合成通路及关键酶 | 第29-33页 |
·脂肪酸羟基化酶 | 第31页 |
·UDP-葡萄糖基转移酶 | 第31-32页 |
·槐糖脂乙酰化酶 | 第32页 |
·槐糖脂内酯化酶 | 第32-33页 |
·碳源及氮源对槐糖脂组分的影响 | 第33-35页 |
·碳源对槐糖脂组分的影响 | 第34-35页 |
·氮源对槐糖脂组分的影响 | 第35页 |
·槐糖脂产生菌的基因工程改造技术 | 第35-36页 |
·槐糖脂产生菌的遗传操作体系建立 | 第35-36页 |
·槐糖脂产生菌的遗传改造 | 第36页 |
·选题依据、研究目的和研究内容 | 第36-39页 |
第二章 槐糖脂代谢相关单加氧酶基因的功能研究 | 第39-75页 |
引言 | 第39-40页 |
·材料方法 | 第40-55页 |
·菌株及质粒 | 第40页 |
·仪器及生化试剂 | 第40-41页 |
·菌种活化及发酵培养基 | 第41-42页 |
·本源强启动子筛选 | 第42-46页 |
·单加氧酶MoA蛋白生物信息学分析 | 第46页 |
·单加氧酶moA、moB敲除株构建 | 第46-49页 |
·单加氧酶moA过表达菌株构建 | 第49-51页 |
·突变菌株表型分析 | 第51-53页 |
·单加氧酶MoA蛋白的异源表达及催化性质分析 | 第53-55页 |
·结果与讨论 | 第55-74页 |
·本源烯醇化酶强启动子Peno筛选 | 第55-58页 |
·单加氧酶MoA为FMO家族单加氧酶 | 第58-62页 |
·单加氧酶MoA的敲除株和过表达菌株验证及表型分析 | 第62-70页 |
·单加氧酶MoA催化槐糖脂组分C18:2 DASL分解 | 第70-74页 |
·本章小结 | 第74-75页 |
第三章 球拟假丝酵母长链脂肪酸转运蛋白基因的功能研究 | 第75-109页 |
引言 | 第75-76页 |
·材料方法 | 第76-91页 |
·菌株及质粒 | 第76页 |
·仪器及生化试剂 | 第76-77页 |
·菌种活化及发酵培养基 | 第77-78页 |
·球拟假丝酵母潮霉素筛选标记自删除系统的构建 | 第78-81页 |
·脂肪酸转运蛋白ALCS生物信息学分析 | 第81页 |
·实时荧光定量PCR分析脂肪酸转运蛋白基因alcs | 第81-82页 |
·脂肪酸转运蛋白基因alcs敲除株构建 | 第82-84页 |
·脂肪酸转运蛋白alcs过表达菌株构建 | 第84-87页 |
·突变菌株表型分析 | 第87-89页 |
·脂肪酸转运蛋白ALCS异源表达及催化性质分析 | 第89-91页 |
·结果与讨论 | 第91-107页 |
·球拟假丝酵母潮霉素抗性自删除系统构建 | 第91-93页 |
·脂肪酸转运蛋白ALCS生物信息学分析 | 第93-97页 |
·脂肪酸转运蛋白ALCS转录受胞外油酸的诱导 | 第97-98页 |
·脂肪酸转运蛋白ALCS突变菌株表型分析 | 第98-105页 |
·脂肪酸转运蛋白ALCS具有长链酯酰-CoA合成酶活性 | 第105-107页 |
·本章小结 | 第107-109页 |
第四章 槐糖脂合成相关调控基因初步研究 | 第109-133页 |
引言 | 第109页 |
·材料方法 | 第109-120页 |
·菌株及质粒 | 第109-110页 |
·仪器及生化试剂 | 第110页 |
·菌种活化及发酵培养基 | 第110-111页 |
·球拟假丝酵母酸性蛋白酶敲除及表型分析 | 第111-114页 |
·球拟假丝酵母ESCRT-Ⅲ结合蛋白PalA功能分析 | 第114-120页 |
·结果与讨论 | 第120-131页 |
·球拟假丝酵母的酸性蛋白酶Axps分析 | 第120-124页 |
·球拟假丝酵母PalA蛋白功能分析 | 第124-131页 |
·本章小结 | 第131-133页 |
第五章 通过RecET重组构建槐糖脂高产菌株 | 第133-161页 |
引言 | 第133页 |
·材料方法 | 第133-145页 |
·菌株及质粒 | 第133页 |
·仪器及生化试剂 | 第133-134页 |
·菌种活化及发酵培养基 | 第134-135页 |
·球拟假丝酵母槐糖脂合成基因簇鉴定 | 第135-139页 |
·槐糖脂合成基因簇克隆 | 第139-144页 |
·含双拷贝槐糖脂合成基因簇过表达菌株的构建 | 第144-145页 |
·过表达菌株产槐糖脂发酵 | 第145页 |
·结果与讨论 | 第145-159页 |
·球拟假丝酵母槐糖脂合成基因簇分析 | 第145-152页 |
·过表达菌株OE-5构建、验证及产槐糖脂发酵分析 | 第152-159页 |
·本章小结 | 第159-161页 |
全文总结与展望 | 第161-163页 |
参考文献 | 第163-177页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第177-179页 |
致谢 | 第179-181页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第181页 |