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球拟假丝酵母Starmerella bombicola槐糖脂合成、代谢相关基因功能的研究

摘要第1-11页
Abstract第11-16页
符号说明及缩略词第16-17页
第一章 前言第17-39页
   ·表面活性剂(Surfactants)第17-18页
   ·生物表面活性剂(biosurfactants)第18-21页
     ·生物表面活性剂概述第18-19页
     ·生物表面活性剂的种类及相应的微生物来源第19-21页
   ·槐糖脂第21-29页
     ·槐糖脂的结构和性质第21-23页
     ·槐糖脂产生菌株第23-25页
     ·槐糖脂的应用第25-29页
   ·槐糖脂理论合成通路及关键酶第29-33页
     ·脂肪酸羟基化酶第31页
     ·UDP-葡萄糖基转移酶第31-32页
     ·槐糖脂乙酰化酶第32页
     ·槐糖脂内酯化酶第32-33页
   ·碳源及氮源对槐糖脂组分的影响第33-35页
     ·碳源对槐糖脂组分的影响第34-35页
     ·氮源对槐糖脂组分的影响第35页
   ·槐糖脂产生菌的基因工程改造技术第35-36页
     ·槐糖脂产生菌的遗传操作体系建立第35-36页
     ·槐糖脂产生菌的遗传改造第36页
   ·选题依据、研究目的和研究内容第36-39页
第二章 槐糖脂代谢相关单加氧酶基因的功能研究第39-75页
 引言第39-40页
   ·材料方法第40-55页
     ·菌株及质粒第40页
     ·仪器及生化试剂第40-41页
     ·菌种活化及发酵培养基第41-42页
     ·本源强启动子筛选第42-46页
     ·单加氧酶MoA蛋白生物信息学分析第46页
     ·单加氧酶moA、moB敲除株构建第46-49页
     ·单加氧酶moA过表达菌株构建第49-51页
     ·突变菌株表型分析第51-53页
     ·单加氧酶MoA蛋白的异源表达及催化性质分析第53-55页
   ·结果与讨论第55-74页
     ·本源烯醇化酶强启动子Peno筛选第55-58页
     ·单加氧酶MoA为FMO家族单加氧酶第58-62页
     ·单加氧酶MoA的敲除株和过表达菌株验证及表型分析第62-70页
     ·单加氧酶MoA催化槐糖脂组分C18:2 DASL分解第70-74页
   ·本章小结第74-75页
第三章 球拟假丝酵母长链脂肪酸转运蛋白基因的功能研究第75-109页
 引言第75-76页
   ·材料方法第76-91页
     ·菌株及质粒第76页
     ·仪器及生化试剂第76-77页
     ·菌种活化及发酵培养基第77-78页
     ·球拟假丝酵母潮霉素筛选标记自删除系统的构建第78-81页
     ·脂肪酸转运蛋白ALCS生物信息学分析第81页
     ·实时荧光定量PCR分析脂肪酸转运蛋白基因alcs第81-82页
     ·脂肪酸转运蛋白基因alcs敲除株构建第82-84页
     ·脂肪酸转运蛋白alcs过表达菌株构建第84-87页
     ·突变菌株表型分析第87-89页
     ·脂肪酸转运蛋白ALCS异源表达及催化性质分析第89-91页
   ·结果与讨论第91-107页
     ·球拟假丝酵母潮霉素抗性自删除系统构建第91-93页
     ·脂肪酸转运蛋白ALCS生物信息学分析第93-97页
     ·脂肪酸转运蛋白ALCS转录受胞外油酸的诱导第97-98页
     ·脂肪酸转运蛋白ALCS突变菌株表型分析第98-105页
     ·脂肪酸转运蛋白ALCS具有长链酯酰-CoA合成酶活性第105-107页
   ·本章小结第107-109页
第四章 槐糖脂合成相关调控基因初步研究第109-133页
 引言第109页
   ·材料方法第109-120页
     ·菌株及质粒第109-110页
     ·仪器及生化试剂第110页
     ·菌种活化及发酵培养基第110-111页
     ·球拟假丝酵母酸性蛋白酶敲除及表型分析第111-114页
     ·球拟假丝酵母ESCRT-Ⅲ结合蛋白PalA功能分析第114-120页
   ·结果与讨论第120-131页
     ·球拟假丝酵母的酸性蛋白酶Axps分析第120-124页
     ·球拟假丝酵母PalA蛋白功能分析第124-131页
   ·本章小结第131-133页
第五章 通过RecET重组构建槐糖脂高产菌株第133-161页
 引言第133页
   ·材料方法第133-145页
     ·菌株及质粒第133页
     ·仪器及生化试剂第133-134页
     ·菌种活化及发酵培养基第134-135页
     ·球拟假丝酵母槐糖脂合成基因簇鉴定第135-139页
     ·槐糖脂合成基因簇克隆第139-144页
     ·含双拷贝槐糖脂合成基因簇过表达菌株的构建第144-145页
     ·过表达菌株产槐糖脂发酵第145页
   ·结果与讨论第145-159页
     ·球拟假丝酵母槐糖脂合成基因簇分析第145-152页
     ·过表达菌株OE-5构建、验证及产槐糖脂发酵分析第152-159页
   ·本章小结第159-161页
全文总结与展望第161-163页
参考文献第163-177页
攻读学位期间发表的学术论文第177-179页
致谢第179-181页
学位论文评阅及答辩情况表第181页

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