| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 ：前言 | 第9-22页 |
| ·朊病毒疾病简介 | 第9-10页 |
| ·朊蛋白的生理功能 | 第10-12页 |
| ·朊蛋白在细胞抗凋亡中的作用 | 第11页 |
| ·朊蛋白在神经细胞黏附、增殖、分化中的作用 | 第11-12页 |
| ·疯牛病与食品安全 | 第12-13页 |
| ·疯牛病的常用检测方法 | 第13-14页 |
| ·荧光定量RT- PCR法 | 第13页 |
| ·Western blot免疫印迹法 | 第13-14页 |
| ·SAF的电镜观察 | 第14页 |
| ·组织病理学法 | 第14页 |
| ·酶联免疫ELISA法 | 第14页 |
| ·朊病毒病的治疗展望 | 第14-15页 |
| ·miRNA概述 | 第15-17页 |
| ·miRNA在神经系统中的作用 | 第16-17页 |
| ·朊病毒疾病中miRNA研究现状 | 第17-20页 |
| ·miRNA在朊病毒疾病中异常表达 | 第17-18页 |
| ·miRNA与朊病毒疾病中的机体免疫和炎症应答 | 第18-19页 |
| ·miRNA作为朊病毒诱导的神经变性疾病标记 | 第19-20页 |
| ·本研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 ：miR-142-3p等miRNA在朊病毒病中表达水平研究 | 第22-33页 |
| ·材料与方法 | 第22-24页 |
| ·实验材料与试剂 | 第22页 |
| ·耗材及动物 | 第22页 |
| ·毒株 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| ·细胞培养试剂的配置 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·细胞培养 | 第24-25页 |
| ·神经瘤细胞（N2a、ScN2a）复苏 | 第24页 |
| ·细胞换液 | 第24页 |
| ·细胞传代 | 第24-25页 |
| ·细胞铺板 | 第25页 |
| ·总RNA提取 | 第25页 |
| ·RNA的质量检测 | 第25-26页 |
| ·miRNA的反转录 | 第26页 |
| ·miRNA的Real Time PCR | 第26-27页 |
| ·实验结果与分析 | 第27-31页 |
| ·RNA纯度及完整性分析 | 第27-28页 |
| ·荧光定量PCR检测miRNA特异性的鉴定 | 第28页 |
| ·朊病毒疾病中相关miRNA表达水平的检测 | 第28-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 ：细胞形态学分析 | 第33-45页 |
| ·材料与方法 | 第33-34页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·细胞转染 | 第34页 |
| ·HE染色 | 第34-35页 |
| ·细胞爬片 | 第35页 |
| ·细胞HE染色的方法 | 第35页 |
| ·细胞存活率实验 | 第35-37页 |
| ·96 孔板铺板 | 第35-36页 |
| ·96 孔板内转染miRNA oligo | 第36页 |
| ·细胞存活率检测（MTT法） | 第36-37页 |
| ·电镜观察细胞的超微结构 | 第37页 |
| ·实验结果与分析 | 第37-43页 |
| ·miRNA oligo转染后形态学分析 | 第37-39页 |
| ·HE染色结果分析 | 第39-40页 |
| ·细胞存活率分析 | 第40-42页 |
| ·电镜观察细胞的超微结构 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 miR-142-3p对朊病毒复制的作用 | 第45-53页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·试验材料与试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·转染效率鉴定实验 | 第45-46页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·miR-142-3p oligo 转染实验 | 第45页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·逆转录实验 | 第46页 |
| ·real time PCR检验miR-142-3p的表达水平 | 第46页 |
| ·蛋白检测实验 | 第46-48页 |
| ·细胞蛋白提取 | 第46页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第46-47页 |
| ·Western Blot 检测 | 第47-48页 |
| ·试验结果 | 第48-50页 |
| ·转染效率分析 | 第48页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第48-49页 |
| ·Western Blot检测结果 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·miRNA功能研究的选择 | 第50-51页 |
| ·转染效果的确定 | 第51页 |
| ·miRNA功能研究的优势 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第五章 ：miR-142-3p生物信息学分析 | 第53-64页 |
| ·数据来源 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·靶基因的预测与筛选 | 第53-54页 |
| ·Gene Ontology(GO)功能显著性富集分析 | 第54页 |
| ·Pathway显著性富集分析 | 第54页 |
| ·real time PCR验证部分靶基因检测结果 | 第54-55页 |
| ·实验结果 | 第55-62页 |
| ·miR-142-3p既往研究 | 第55-56页 |
| ·基因单位和保守性分析 | 第56页 |
| ·靶基因交集的筛选 | 第56-57页 |
| ·靶基因功能和通路富集分析 | 第57-61页 |
| ·靶基因基因水平的验证 | 第61-62页 |
| ·讨论与小结 | 第62-64页 |
| 存在的问题与展望 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第75-76页 |
| 附录1 主要仪器 | 第76-77页 |
| 附录2 主要试剂与材料 | 第77-79页 |
| 附录3 主要溶液的配制 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
