| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| ·流感病毒综述 | 第9-17页 |
| ·流感病毒概述 | 第9页 |
| ·流感病毒的复制 | 第9-10页 |
| ·流感病毒的进化方式 | 第10-11页 |
| ·流感病毒常用的检测方法 | 第11-13页 |
| ·流感病毒的结构 | 第13-14页 |
| ·非结构蛋白 NS1 | 第14-17页 |
| ·HSP70 蛋白 | 第17-20页 |
| ·HSP70 的结构及其基因定位 | 第18-19页 |
| ·HSP70 的生物学功能 | 第19-20页 |
| ·蛋白质相互作用的研究方法 | 第20-22页 |
| ·酵母双杂交 | 第20页 |
| ·GST Pull Down | 第20-21页 |
| ·免疫荧光共定位 | 第21页 |
| ·免疫共沉淀 | 第21-22页 |
| ·研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 流感病毒 NS1 蛋白多抗的制备 | 第23-33页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·载体及菌株 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| ·pET-NS1 载体的构建 | 第25页 |
| ·凝胶回收 PCR 产物 | 第25页 |
| ·pET28 和目的片段双酶切 | 第25-26页 |
| ·柱式回收酶切产物 | 第26页 |
| ·构建连接体系 | 第26页 |
| ·连接产物转化到大肠杆菌 Trans5 | 第26页 |
| ·阳性菌质粒提取 | 第26-27页 |
| ·双酶切验证重组质粒 | 第27页 |
| ·将重组质粒转化到大肠杆菌 BL21（DE3） | 第27页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第27页 |
| ·纯化目的蛋白 | 第27页 |
| ·用抗原免疫小鼠 | 第27-28页 |
| ·ELISA 检测抗体滴度 | 第28页 |
| ·试验结果 | 第28-31页 |
| ·pET-NS1 载体的构建 | 第28-29页 |
| ·重组菌的诱导表达及纯化 | 第29-30页 |
| ·ELISA 检测多抗的效价 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·pET-NS1 重组蛋白的表达及纯化 | 第31页 |
| ·多抗的制备 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 流感病毒 NS1 蛋白与 HSP70 相互作用的研究 | 第33-48页 |
| ·细胞和载体 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-35页 |
| ·试验方法 | 第35-40页 |
| ·构建 TAP-NS1 载体 | 第35页 |
| ·提取转染用质粒 | 第35页 |
| ·TAP-NS1 质粒转染 HEK 细胞 | 第35-36页 |
| ·Western Blot 检测 TAP-NS1 蛋白的表达 | 第36页 |
| ·G418 筛选 HEK 细胞稳定表达 NS1 蛋白细胞株 | 第36页 |
| ·纯化 NS1 重组蛋白 | 第36-38页 |
| ·双向电泳 | 第38页 |
| ·质谱分析 | 第38-39页 |
| ·GST Pull Down | 第39-40页 |
| ·免疫荧光共定位 | 第40页 |
| ·试验结果 | 第40-45页 |
| ·TAP-NS1 载体的构建 | 第40-41页 |
| ·真核表达载体 TAP-NS1 转染 HEK 细胞及 G418 筛选结果 | 第41页 |
| ·G418 筛选 HEK 细胞稳定表达 NS1 蛋白细胞株 | 第41-42页 |
| ·TAP-NS1 蛋白纯化 | 第42页 |
| ·双向电泳结果 | 第42-43页 |
| ·GST Pull Down 试验结果 | 第43-44页 |
| ·免疫荧光共定位 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·双向电泳试验结果 | 第45-46页 |
| ·NS1 蛋白与 HSP70 蛋白的相互作用 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第四章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录一：主要化学试剂 | 第55-56页 |
| 附录二：主要仪器 | 第56-57页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
