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补体C3d分子的杆状病毒表达和分子进化研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 文献综述第9-21页
   ·补体系统简介第9-13页
     ·补体系统活化途径第9-10页
     ·补体系统固有成分第10-12页
     ·补体调节因子和补体受体第12-13页
   ·补体C3d分子简介第13-16页
     ·C3d的分子结构第13-14页
     ·C3d与获得性免疫第14-15页
     ·C3d的分子佐剂作用第15-16页
     ·C3d与免疫逃避机制第16页
   ·杆状病毒表达系统研究进展第16-20页
     ·杆状病毒表达系统简介第17-18页
     ·杆状病毒表达系统特点第18-19页
     ·宿主昆虫细胞培养条件第19页
     ·杆状病毒表达影响因素第19-20页
   ·课题研究的目的意义第20-21页
第二章 补体C3d的序列多样性及分子进化分析第21-34页
   ·实验材料第21-22页
     ·实验原料、载体与菌株第21页
     ·主要试剂第21页
     ·禽类肝脏RNA提取试剂第21页
     ·培养基第21-22页
     ·主要器材第22页
   ·实验方法第22-26页
     ·禽类C3d的克隆第22-25页
     ·C3d的生物信息学分析第25-26页
   ·结果与分析第26-32页
     ·16 种禽C3d的PCR扩增结果第26页
     ·22 种动物C3d基因序列分析第26-29页
     ·22 种C3d序列系统进化树的构建第29-30页
     ·C3d的阳性选择分析结果第30-31页
     ·鸡C3d的蛋白结构预测第31-32页
   ·讨论第32-33页
     ·补体C3d分子的系统进化第32-33页
     ·阳性选择和C3d三级结构第33页
   ·小结第33-34页
第三章 鸡补体C3d的bac-to-bac杆状病毒表达第34-48页
   ·实验材料第34-37页
     ·载体与菌株第34页
     ·主要试剂第34-35页
     ·Sf9 细胞培养相关试剂第35页
     ·培养基第35页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂第35-36页
     ·免疫荧光检测(IFA)试剂第36页
     ·免疫印迹试验(Western-blot)试剂第36-37页
     ·主要器材第37页
   ·实验方法第37-43页
     ·杆状病毒表达载体的构建第37-39页
     ·pFB-C3d-BAC的构建第39-41页
     ·重组病毒的获得第41-42页
     ·蛋白的表达与检测第42-43页
   ·结果与分析第43-46页
     ·表达引物扩增结果第43页
     ·pFB-C3d-BAC阳性克隆鉴定第43-44页
     ·重组蛋白的生物学鉴定第44-46页
   ·讨论第46-47页
     ·成功构建C3d杆状病毒表达载体第46页
     ·重组蛋白的表达与鉴定第46-47页
   ·小结第47-48页
第四章 禽类感染禽白血病情况的基因芯片检测第48-55页
   ·实验材料第48-49页
     ·检测模板第48页
     ·主要试剂及耗材第48页
     ·基因芯片检测试剂第48-49页
     ·主要仪器第49页
   ·实验方法第49-51页
     ·引物与探针第49页
     ·禽白血病多重PCR检测第49-50页
     ·基因芯片的制备第50-51页
     ·基因芯片杂交与检测第51页
   ·结果与分析第51-52页
     ·多重PCR检测结果第51-52页
     ·基因芯片检测结果第52页
   ·讨论第52-54页
     ·禽白血病基因芯片第52-53页
     ·多重PCR与基因芯片检测第53-54页
     ·序列多样性与ALV感染第54页
   ·小结第54-55页
第五章 结论第55-56页
参考文献第56-64页
发表论文和参加科研情况说明第64-65页
附录一:22 种动物名称及C3d序列号第65-66页
附录二:主要试剂第66-68页
附录三:主要器材第68-69页
附录四:缩略词第69-70页
致谢第70页

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