摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
·补体系统简介 | 第9-13页 |
·补体系统活化途径 | 第9-10页 |
·补体系统固有成分 | 第10-12页 |
·补体调节因子和补体受体 | 第12-13页 |
·补体C3d分子简介 | 第13-16页 |
·C3d的分子结构 | 第13-14页 |
·C3d与获得性免疫 | 第14-15页 |
·C3d的分子佐剂作用 | 第15-16页 |
·C3d与免疫逃避机制 | 第16页 |
·杆状病毒表达系统研究进展 | 第16-20页 |
·杆状病毒表达系统简介 | 第17-18页 |
·杆状病毒表达系统特点 | 第18-19页 |
·宿主昆虫细胞培养条件 | 第19页 |
·杆状病毒表达影响因素 | 第19-20页 |
·课题研究的目的意义 | 第20-21页 |
第二章 补体C3d的序列多样性及分子进化分析 | 第21-34页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·实验原料、载体与菌株 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·禽类肝脏RNA提取试剂 | 第21页 |
·培养基 | 第21-22页 |
·主要器材 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-26页 |
·禽类C3d的克隆 | 第22-25页 |
·C3d的生物信息学分析 | 第25-26页 |
·结果与分析 | 第26-32页 |
·16 种禽C3d的PCR扩增结果 | 第26页 |
·22 种动物C3d基因序列分析 | 第26-29页 |
·22 种C3d序列系统进化树的构建 | 第29-30页 |
·C3d的阳性选择分析结果 | 第30-31页 |
·鸡C3d的蛋白结构预测 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
·补体C3d分子的系统进化 | 第32-33页 |
·阳性选择和C3d三级结构 | 第33页 |
·小结 | 第33-34页 |
第三章 鸡补体C3d的bac-to-bac杆状病毒表达 | 第34-48页 |
·实验材料 | 第34-37页 |
·载体与菌株 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·Sf9 细胞培养相关试剂 | 第35页 |
·培养基 | 第35页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂 | 第35-36页 |
·免疫荧光检测(IFA)试剂 | 第36页 |
·免疫印迹试验(Western-blot)试剂 | 第36-37页 |
·主要器材 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-43页 |
·杆状病毒表达载体的构建 | 第37-39页 |
·pFB-C3d-BAC的构建 | 第39-41页 |
·重组病毒的获得 | 第41-42页 |
·蛋白的表达与检测 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-46页 |
·表达引物扩增结果 | 第43页 |
·pFB-C3d-BAC阳性克隆鉴定 | 第43-44页 |
·重组蛋白的生物学鉴定 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·成功构建C3d杆状病毒表达载体 | 第46页 |
·重组蛋白的表达与鉴定 | 第46-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第四章 禽类感染禽白血病情况的基因芯片检测 | 第48-55页 |
·实验材料 | 第48-49页 |
·检测模板 | 第48页 |
·主要试剂及耗材 | 第48页 |
·基因芯片检测试剂 | 第48-49页 |
·主要仪器 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-51页 |
·引物与探针 | 第49页 |
·禽白血病多重PCR检测 | 第49-50页 |
·基因芯片的制备 | 第50-51页 |
·基因芯片杂交与检测 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-52页 |
·多重PCR检测结果 | 第51-52页 |
·基因芯片检测结果 | 第52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
·禽白血病基因芯片 | 第52-53页 |
·多重PCR与基因芯片检测 | 第53-54页 |
·序列多样性与ALV感染 | 第54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第64-65页 |
附录一:22 种动物名称及C3d序列号 | 第65-66页 |
附录二:主要试剂 | 第66-68页 |
附录三:主要器材 | 第68-69页 |
附录四:缩略词 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |