英文缩写词表 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
前言 | 第13-19页 |
1 简介乳腺癌 | 第13-14页 |
2 ER 受体 | 第14-15页 |
3 共调节因子 | 第15-16页 |
4 SUMO 化 | 第16-17页 |
5 课题研究意义与技术路线 | 第17-19页 |
材料与方法 | 第19-27页 |
1 材料 | 第19-20页 |
·菌株与细胞株 | 第19页 |
·质粒 | 第19页 |
·细胞培养试剂和转染试剂 | 第19页 |
·其它分子生物学试剂和化学试剂 | 第19页 |
·分子生物学试剂盒 | 第19-20页 |
·抗体 | 第20页 |
·主要实验仪器 | 第20页 |
2. 方法 | 第20-27页 |
·质粒构建与鉴定 | 第20-22页 |
·PCR 扩增相应的片段 | 第20页 |
·鉴定以及胶回收 | 第20-21页 |
·连接载体和相应的片段 | 第21页 |
·转化 | 第21-22页 |
·提取质粒 | 第22页 |
·siRNAs 表达载体的构建 | 第22-23页 |
·慢病毒包装及哺乳动物细胞稳定克隆的制备 | 第23页 |
·哺乳动物细胞的转染 | 第23页 |
·Western blot 分析 | 第23-24页 |
·免疫共沉淀 | 第24页 |
·荧光素酶活性测定 | 第24页 |
·实时定量(Real-time )PCR 分析 | 第24-25页 |
·半衰期检测 | 第25页 |
·激光共聚焦实验 | 第25页 |
·细胞生长曲线测定 | 第25页 |
·细胞周期分析 | 第25-26页 |
·统计分析 | 第26-27页 |
结果 | 第27-40页 |
1 GA5 与 ERS 间的相互作用 | 第27-31页 |
·GA5 与 ERs 相互结合 | 第27页 |
·GA5 与 ERs 作用区域的确定 | 第27-31页 |
2 GA5 对 ERΒ类泛素化修饰的调节 | 第31-36页 |
·ERβ在细胞内能够发生类泛素化修饰 | 第31页 |
·GA5 增强 ERβ的 SUMO 化 | 第31-33页 |
·GA5 能增强 ERβ的 SUMO 化,不能增强 ERβK4R 的 SUMO 化 | 第31-32页 |
·GA5Δcoil-coil 不能增强 ERβ的 SUMO 化 | 第32-33页 |
·GA5 增强 ERβ在细胞内的蛋白表达水平 | 第33-34页 |
·GA5 调节 ERβ蛋白分子的半衰期 | 第34页 |
·GA5 能调节 ERβ的转录活性 | 第34-35页 |
·GA5 调节 ERβ的下游基因 mRNA 表达水平的影响 | 第35-36页 |
3 GA5 的生物学功能 | 第36-40页 |
·GA5 在细胞内的定位 | 第36-37页 |
·过表达 GA5 抑制 ZR751,HepG2 细胞的生长 | 第37-38页 |
·GA5 影响细胞周期 | 第38-40页 |
讨论 | 第40-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
致谢 | 第48页 |