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新型ER共调节因子在乳腺癌发生中的作用及机制研究

英文缩写词表第1-10页
摘要第10-11页
Abstract第11-13页
前言第13-19页
 1 简介乳腺癌第13-14页
 2 ER 受体第14-15页
 3 共调节因子第15-16页
 4 SUMO 化第16-17页
 5 课题研究意义与技术路线第17-19页
材料与方法第19-27页
 1 材料第19-20页
   ·菌株与细胞株第19页
   ·质粒第19页
   ·细胞培养试剂和转染试剂第19页
   ·其它分子生物学试剂和化学试剂第19页
   ·分子生物学试剂盒第19-20页
   ·抗体第20页
   ·主要实验仪器第20页
 2. 方法第20-27页
   ·质粒构建与鉴定第20-22页
     ·PCR 扩增相应的片段第20页
     ·鉴定以及胶回收第20-21页
     ·连接载体和相应的片段第21页
     ·转化第21-22页
     ·提取质粒第22页
   ·siRNAs 表达载体的构建第22-23页
   ·慢病毒包装及哺乳动物细胞稳定克隆的制备第23页
   ·哺乳动物细胞的转染第23页
   ·Western blot 分析第23-24页
   ·免疫共沉淀第24页
   ·荧光素酶活性测定第24页
   ·实时定量(Real-time )PCR 分析第24-25页
   ·半衰期检测第25页
   ·激光共聚焦实验第25页
   ·细胞生长曲线测定第25页
   ·细胞周期分析第25-26页
   ·统计分析第26-27页
结果第27-40页
 1 GA5 与 ERS 间的相互作用第27-31页
   ·GA5 与 ERs 相互结合第27页
   ·GA5 与 ERs 作用区域的确定第27-31页
 2 GA5 对 ERΒ类泛素化修饰的调节第31-36页
   ·ERβ在细胞内能够发生类泛素化修饰第31页
   ·GA5 增强 ERβ的 SUMO 化第31-33页
     ·GA5 能增强 ERβ的 SUMO 化,不能增强 ERβK4R 的 SUMO 化第31-32页
     ·GA5Δcoil-coil 不能增强 ERβ的 SUMO 化第32-33页
   ·GA5 增强 ERβ在细胞内的蛋白表达水平第33-34页
   ·GA5 调节 ERβ蛋白分子的半衰期第34页
   ·GA5 能调节 ERβ的转录活性第34-35页
   ·GA5 调节 ERβ的下游基因 mRNA 表达水平的影响第35-36页
 3 GA5 的生物学功能第36-40页
   ·GA5 在细胞内的定位第36-37页
   ·过表达 GA5 抑制 ZR751,HepG2 细胞的生长第37-38页
   ·GA5 影响细胞周期第38-40页
讨论第40-43页
结论第43-44页
参考文献第44-48页
致谢第48页

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