| 目录 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 英文缩略语 | 第13-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-24页 |
| 1. 吡唑啉酮化合物的基本概述 | 第15-16页 |
| 2. 吡唑啉酮化合物的配位及其合成方法 | 第16-17页 |
| 3. 吡唑啉酮化合物与金属配位的结合特性 | 第17页 |
| 4. 抗肿瘤活性 | 第17-18页 |
| 5. 抗菌作用 | 第18页 |
| 6. 抗炎镇痛作用 | 第18-19页 |
| 7. 抑制端粒酶的活性 | 第19页 |
| 8. 清除活性氧的作用 | 第19-20页 |
| 9. 抗病毒活性 | 第20页 |
| 参考文献 | 第20-24页 |
| 第二部分 吡唑啉酮金属配合物的抗肿瘤、抗菌活性检测及与DNA的相互作用 | 第24-41页 |
| 摘要 | 第24页 |
| 引言 | 第24-25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-29页 |
| ·试剂与仪器 | 第25页 |
| ·配合物的合成 | 第25-26页 |
| ·配合物的化学属性 | 第26-27页 |
| ·配合物溶解体系的配制 | 第27页 |
| ·体外抗肿瘤活性检测 | 第27页 |
| ·抗菌活性检测 | 第27-28页 |
| ·最小抑菌浓度(MIC)检测 | 第28页 |
| ·金属配合物紫外光谱和荧光光谱分析 | 第28页 |
| ·与DNA相互作用的紫外光谱特性 | 第28页 |
| ·Cd-PMPP-SAL与DNA结合的荧光光谱特性 | 第28页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对EB-DNA复合体系滴定的荧光光谱 | 第28页 |
| ·EB对复合体系Cd-PMPP-SAL-DNA滴定的荧光光谱 | 第28页 |
| ·统计分析 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-36页 |
| ·吡唑啉酮金属配合物的化学结构 | 第29-30页 |
| ·细胞毒活性的比较 | 第30-32页 |
| ·对细菌的抑菌作用 | 第32-34页 |
| ·配合物紫外光谱分析和荧光光谱分析 | 第34-36页 |
| ·配合物与DNA相互作用的紫外光谱分析 | 第34页 |
| ·配合物Cd-PMPP-SAL与DNA相互作用的荧光光谱 | 第34-35页 |
| ·EB对Cd-PMPP-SAL-DNA体系滴定的荧光光谱 | 第35-36页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对EB-DNA复合体滴定的荧光光谱 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第三部分 Cd-PMPP-SAL诱导Eca-109细胞凋亡及其机制的研究 | 第41-74页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 引言 | 第41-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第43-52页 |
| ·供试细胞 | 第43页 |
| ·试剂与培养基 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43-44页 |
| ·试剂的配制 | 第44-46页 |
| ·细胞培养相关试剂 | 第44-45页 |
| ·Western-Blot相关试剂 | 第45页 |
| ·透射电镜相关试剂 | 第45-46页 |
| ·caspase活性检测相关试剂 | 第46页 |
| ·配合物溶解体系的配制 | 第46页 |
| ·细胞培养 | 第46-47页 |
| ·噻唑蓝染色(MTT)法体外检测抗增殖活性 | 第47-48页 |
| ·光学显微镜下观察细胞形态 | 第48页 |
| ·Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态 | 第48页 |
| ·透射电镜观察细胞亚显微结构 | 第48页 |
| ·Annenxin V/PI双染色法检测细胞凋亡 | 第48页 |
| ·细胞凋亡周期的检测 | 第48-49页 |
| ·LDH活性检测细胞的坏死率及凋亡率 | 第49页 |
| ·DNA梯形条带检测 | 第49页 |
| ·线粒体膜电位(△Ψm)检测 | 第49-50页 |
| ·细胞内活性氧(ROS)含量侧定 | 第50页 |
| ·caspase活性的检测 | 第50-51页 |
| ·Caspase抑制剂检测 | 第51页 |
| ·Western Blot检测 | 第51-52页 |
| ·统计分析 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-67页 |
| ·吡唑啉酮金属配合物诱导Eca-109细胞凋亡的作用 | 第52-60页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对Eca-109细胞的抗增殖作用 | 第52-53页 |
| ·光镜下观察细胞的形态变化 | 第53-54页 |
| ·荧光显微镜观察细胞的形态变化 | 第54-55页 |
| ·凋亡细胞亚显微结构变化 | 第55-56页 |
| ·Annexin-V/PI双染法对细胞凋亡的检测 | 第56-57页 |
| ·细胞周期的变化 | 第57-59页 |
| ·细胞LDH乳酸脱氢酶含量变化 | 第59页 |
| ·DNA梯形条带的检测 | 第59-60页 |
| ·Cd-PMPP-SAL诱导Eca-109细胞凋亡机制的探索 | 第60-67页 |
| ·Cd-PMPP-SAL导致Eca-109细胞线粒体膜电位下降 | 第60-62页 |
| ·Cd-PMPP-SAL导致Eca-109细胞内活性氧水平升高 | 第62-63页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对Eca-109细胞caspase蛋白酶活性的影响 | 第63-65页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对Eca-109细胞caspase家族蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对Eca-109细胞Bax家族蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第四部分 Cd-PMPP-SAL对B16细胞的体内外抗肿瘤作用以及凋亡机制的研究 | 第74-96页 |
| 摘要 | 第74页 |
| 引言 | 第74-75页 |
| 1 材料与方法 | 第75-81页 |
| ·实验材料 | 第75-77页 |
| ·实验仪器 | 第75页 |
| ·供试细胞 | 第75-76页 |
| ·试剂与培养基 | 第76页 |
| ·试剂的配制 | 第76-77页 |
| ·实验方法 | 第77-81页 |
| ·细胞培养 | 第77页 |
| ·细胞增殖抑制率的检测 | 第77页 |
| ·小鼠荷瘤模型的建立 | 第77页 |
| ·小鼠体内抑瘤作用的检测 | 第77-78页 |
| ·制备小鼠组织切片 | 第78页 |
| ·免疫组化检测凋亡相关因子的表达 | 第78-79页 |
| ·Hoechst 33258染色法观察细胞形态 | 第79页 |
| ·DNA梯形条带检测 | 第79页 |
| ·LDH方法对细胞坏死率和凋亡率的检测 | 第79-80页 |
| ·Annenxin V/PI双染色法检测细胞凋亡 | 第80页 |
| ·细胞周期的检验 | 第80页 |
| ·线粒体膜电位(△φm)测定 | 第80-81页 |
| ·caspase活性的检测 | 第81页 |
| ·caspase抑制剂的检测 | 第81页 |
| ·统计分析 | 第81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-92页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对B16细胞诱导细胞凋亡和作用机制的初步探索 | 第81-85页 |
| ·Cd-PMPP-SAL诱导B16细胞乳酸脱氢酶含量升高 | 第81-82页 |
| ·Annixin-V/PI双染法检测Cd-PMPP-SAL诱导B16细胞凋亡效果 | 第82-83页 |
| ·Cd-PMPP-SAL诱导B16细胞产生DNA Ladder | 第83页 |
| ·Cd-PMPP-SAL诱导B16细胞产生凋亡小体 | 第83-84页 |
| ·Cd-PMPP-SAL通过上调caspase-3,-7和-9的活性导致B16细胞凋亡 | 第84-85页 |
| ·Cd-PMPP-SAL抑制荷瘤小鼠肿瘤生长及相关因子的分析 | 第85-92页 |
| ·Cd-PMPP-SAL减少了小鼠瘤体积和瘤重但不影响其体重和脾重 | 第85-88页 |
| ·Cd-PMPP-SAL对小鼠肿瘤和内脏形态学影响以及相关凋亡因子的表达 | 第88-90页 |
| ·Cd-PMPP-SAL下调小鼠肿瘤组织中VEGF、FGF2并使得小鼠黑色素瘤细胞凋亡 | 第90-92页 |
| 3 讨论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-96页 |
| 结论与展望 | 第96-97页 |
| 个人简历 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
