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奶牛乳腺上皮细胞的分离鉴定及DBP诱导β-酪蛋白的分泌研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-14页
第一章 奶牛乳腺上皮细胞的分离鉴定第14-33页
 引言第14-15页
   ·实验材料第15-16页
     ·主要仪器和设备等第15页
     ·主要试剂及耗材第15-16页
     ·活体材料的获取第16页
   ·实验方法第16-22页
     ·乳腺细胞的原代培养第16-18页
     ·牛乳腺上皮细胞冷冻和解冻培养第18页
     ·牛乳腺上皮细胞的纯化第18-19页
     ·牛乳腺上皮细胞的形态观察实验第19页
     ·牛乳腺上皮细胞生长曲线的绘制第19页
     ·牛乳腺上皮细胞染色体制备及核型分析第19-20页
     ·牛乳腺上皮细胞的免疫荧光鉴定第20-21页
     ·PCR检测β-酪蛋白在mRNA水平的表达第21-22页
   ·实验结果第22-28页
     ·牛乳腺上皮细胞的原代培养第22-24页
     ·牛乳腺上皮细胞纯化第24页
     ·细胞形态观察结果第24-25页
     ·牛乳腺上皮细胞的生长曲线第25-26页
     ·牛乳腺上皮细胞的染色体制备及核型分析第26页
     ·牛乳腺上皮细胞的免疫荧光染色第26-27页
     ·牛乳腺上皮细胞β-casein表达检测第27-28页
   ·讨论第28-30页
     ·牛乳腺上皮细胞的分离培养第28-29页
     ·牛乳腺上皮细胞的鉴定第29-30页
 参考文献第30-33页
第二章 邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对牛乳腺上皮细胞β-casein分泌的影响的研究第33-51页
 引言第33-35页
   ·实验材料第35-36页
     ·实验所使用的细胞第35页
     ·实验仪器设备第35页
     ·实验试剂及耗材第35-36页
   ·实验方法第36-40页
     ·牛乳腺上皮细胞的诱导培养第36页
     ·DPB对牛乳腺上皮细胞的细胞活性影响分析(MTT法分析)第36-37页
     ·流式细胞仪测定牛乳腺上皮细胞活力第37-38页
     ·诱导培养的牛乳腺上皮细胞总RNA的提取第38-39页
     ·RNA反转录实验第39页
     ·RT-PCR检测β—酪蛋白在mRNA水平的表达第39-40页
     ·统计分析第40页
   ·实验结果第40-46页
     ·诱导培养的乳腺上皮细胞的形态第40-41页
     ·DBP对牛乳腺上皮细胞增殖的影响第41-43页
     ·DBP对牛乳腺上皮细胞活力的影响第43-44页
     ·DBP对牛乳腺上皮细胞中β-酪蛋白表达量的诱导第44-46页
   ·讨论第46-48页
 参考文献第48-51页
文献综述第51-69页
 1 动物生物反应器结合转基因技术第51-53页
   ·生物反应器的种类及发展第51-52页
   ·转基因技术及其发展第52-53页
   ·乳腺生物反应器第53页
 2 乳腺组织和乳腺生物反应器第53-56页
   ·乳腺组织第53-54页
   ·乳腺生物反应器的制备过程第54页
   ·优点第54-55页
   ·不同的转基因生物反应生产的外源蛋白的比较第55-56页
   ·乳腺生物反应器的药物生产国外现状第56页
 3 乳腺上皮细胞第56-57页
 4 乳腺上皮细胞的诱导第57-62页
   ·乳腺组织的激素调节第57-58页
   ·中草药成分的诱导作用第58-59页
   ·转录水平的调控第59-60页
   ·DBP诱导β-酪蛋白作用第60-62页
 参考文献第62-69页
致谢第69-70页
攻读硕士期间发表的论文第70页

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