| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-15页 |
| 第一章 内蒙古白绒山羊皮肤特异性表Cre重组酶基因表达载体的构建 | 第15-28页 |
| 1 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·方法 | 第16-23页 |
| ·生物信息学分析 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-27页 |
| ·pMD19-T-Cre中间载体构建 | 第23-25页 |
| ·表达载体构建 | 第25-27页 |
| 3 讨论 | 第27-28页 |
| 第二章 皮肤特异性表达Cre重组酶载体转染绒山羊细胞及转基因细胞克隆的鉴定 | 第28-41页 |
| 1 材料与方法 | 第28-34页 |
| ·主要材料和试剂 | 第28页 |
| ·表达载体转染内蒙古白绒山羊细胞 | 第28-30页 |
| ·细胞RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·细胞RNA反转录 | 第31页 |
| ·转基因细胞鉴定 | 第31-32页 |
| ·半定量PCR | 第32-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·pIRES2-EGFP-Cre和pIRES2-EGFP-KAP6-Cre转染绒山羊皮肤成纤维细胞和胎儿成纤维细胞 | 第35-36页 |
| ·转基因绒山羊皮肤成纤维细胞和胎儿成纤维细胞克隆的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·转染pIRES2-EGFP-KAP6-Cre载体的半定量RT-PCR | 第37-39页 |
| ·转染pIRES2-EGFP-Cre载体的半定量RT-PCR | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 皮肤特异性表达载体pIRES2-EGFP-K5和pIRES2-EGFP-K14的构建 | 第41-52页 |
| 1 材料与方法 | 第41-46页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要试验材料 | 第41页 |
| ·中间载体pMD19-T-K5、pMD19-T-K14的构建 | 第41-43页 |
| ·皮肤特异性表达载体pIRES2-EGFP-K5和pIRES2-EGFP-K14的构建 | 第43-45页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定和测序 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-51页 |
| ·中间载体pMD19-T-K5、pMD19-T-K14的构建 | 第46-49页 |
| ·表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 3. 讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 文献综述 | 第52-63页 |
| 1 Cre重组酶介导的基因敲除 | 第52-56页 |
| 2 绒山羊毛囊的发育及相关调控因子 | 第56-60页 |
| 3 毛囊特异性K5启动子、K6启动子、K14启动子 | 第60-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第68页 |
