| 附件 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 图目录 | 第13-15页 |
| 表目录 | 第15-16页 |
| 英文缩略表 | 第16-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-31页 |
| ·糖苷水解酶 | 第17-18页 |
| ·糖苷水解酶家族 | 第17页 |
| ·糖苷水解酶催化机制 | 第17-18页 |
| ·纤维素酶及半纤维素酶的研究进展 | 第18-28页 |
| ·纤维素酶的研究进展 | 第18-22页 |
| ·半纤维素酶的研究进展 | 第22-25页 |
| ·纤维素酶与半纤维素酶的分子结构 | 第25-27页 |
| ·纤维素酶与半纤维素酶的应用 | 第27-28页 |
| ·蛋白质工程 | 第28-29页 |
| ·蛋白质工程概论 | 第28页 |
| ·蛋白质工程主要的技术手段 | 第28-29页 |
| ·木聚糖酶的蛋白质工程研究 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 第二章 Talaromyces emersonii 来源的嗜热纤维素酶基因的表达及性质分析 | 第31-63页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·菌株、质粒 | 第31页 |
| ·仪器及生化试剂 | 第31页 |
| ·培养基及试剂的配置 | 第31-32页 |
| ·引物的合成与测序 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-43页 |
| ·纤维素酶活性的测定 | 第32页 |
| ·真菌来源的 GH5 和 GH7 内切葡聚糖酶基因的简并引物设计 | 第32-33页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第33页 |
| ·Talaromyces emersonii 总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·egl5A 和 egl7A 基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·cDNA 基因的克隆 | 第36-38页 |
| ·表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·Egl5A 和 Egl7A 的表达与纯化 | 第39-41页 |
| ·重组纤维素酶的酶学性质分析 | 第41-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-60页 |
| ·纤维素酶 Egl5A 和 Egl7A 序列分析及信号肽编码序列的去除 | 第43-48页 |
| ·酵母表达载体 pPIC9-egl5A/egl7A 的构建 | 第48页 |
| ·纤维素酶 Egl5A 和 Egl7A 在毕赤酵母中的表达及纯化 | 第48-50页 |
| ·重组纤维素酶的酶学性质分析 | 第50-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第三章 链霉菌 Streptomyces sp. S9 来源的木聚糖酶 XynAS9 热稳定性改良研究 | 第63-83页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·Streptomyces 木聚糖酶基因、菌株和质粒 | 第63页 |
| ·引物合成和核酸测序测定 | 第63页 |
| ·仪器、试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第63页 |
| ·培养基配制 | 第63页 |
| ·试剂的配制 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-70页 |
| ·序列比对与结构模拟 | 第63页 |
| ·分子动力学模拟 | 第63-64页 |
| ·pPIC9-xynAS9 质粒的提取 | 第64页 |
| ·定点突变 | 第64-67页 |
| ·XynAS9 五个突变体酵母表达载体的构建 | 第67页 |
| ·XynAS9 五个突变体的表达及酶活检测 | 第67页 |
| ·XynAS9 木聚糖酶活性的测定 | 第67页 |
| ·XynAS9 五个突变体的纯化 | 第67页 |
| ·XynAS9 五个突变体与野生型的酶学性质分析及比较 | 第67-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-81页 |
| ·XynAS9 突变点的确定 | 第70-72页 |
| ·XynAS9 五个突变体酵母表达载体的构建 | 第72页 |
| ·XynAS9 五个突变体在酵母中的表达和纯化 | 第72-73页 |
| ·XynAS9 与五个突变体的酶学性质分析及比较 | 第73-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| ·本章小结 | 第82-83页 |
| 第四章 全文结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 作者简历 | 第95-96页 |
