| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-21页 |
| 1 耐药菌株的困扰 | 第12页 |
| 2 鱼类抗菌肽简介 | 第12-14页 |
| 3 鱼类抗菌肽的抗菌功能 | 第14-15页 |
| ·鱼类抗菌肽的抗细菌功能 | 第14页 |
| ·鱼类抗菌肽的抗病毒、抗真菌、抗寄生虫功能 | 第14页 |
| ·鱼类抗菌肽的调节免疫功能 | 第14页 |
| ·鱼类抗菌肽的抗肿瘤作用 | 第14-15页 |
| ·鱼类抗菌肽的其他作用 | 第15页 |
| 4 抗菌肽的作用机理 | 第15页 |
| 5 抗菌肽的外源表达系统 | 第15-19页 |
| ·原核表达系统 | 第16页 |
| ·真核表达系统 | 第16-19页 |
| 6 本研究的两种抗菌肽介绍 | 第19-20页 |
| ·BPI 简介 | 第19页 |
| ·LEAP2 简介 | 第19-20页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第一章 斑点叉尾鮰 BPI 抗菌肽原核表达载体的构建 | 第21-37页 |
| ·材料与方法 | 第21-24页 |
| ·总 RNA 提取和第股 cDNA 合成 | 第21页 |
| ·BPI 氨基端活性结构域的 cDNA 克隆 | 第21-22页 |
| ·基于 BPI 氨基酸序列的分子系统树构建 | 第22-23页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-34页 |
| ·BPI 中编码氨基端活性结构域的 cDNA 序列 | 第24-27页 |
| ·斑点叉尾鮰与其他鱼类之间 BPI 初级结构的比较 | 第27-30页 |
| ·基于斑点叉尾鮰和其他生物 BPI 氨基酸序列的分子系统树分析 | 第30-31页 |
| ·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第31-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| 第二章 鲤鱼 BPI 抗菌肽原核表达载体的构建 | 第37-43页 |
| ·实验材料与方法 | 第37-38页 |
| ·总 RNA 提取和第股 cDNA 合成 | 第37页 |
| ·BPI 氨基端活性结构域的 cDNA 克隆 | 第37-38页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·鲤鱼 BPI 氨基端活性结构域的 cDNA 克隆 | 第38-40页 |
| ·重组融合表达质粒的构建与鉴定 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 斑点叉尾鮰 LEAP2 在大肠杆菌中的融合表达 | 第43-52页 |
| ·实验材料与方法 | 第43-44页 |
| ·LEAP2 成熟肽基因的 cDNA 克隆 | 第43页 |
| ·LEAP2 成熟肽融合表达质粒的构建 | 第43页 |
| ·基于 LEAP2 全长氨基酸序列的分子系统树构建 | 第43-44页 |
| ·mLEAP2 基因的原核表达 | 第44页 |
| ·表达产物的纯化及融合蛋白的肠激酶消化 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-49页 |
| ·斑点叉尾鮰成熟肽基因的 cDNA 克隆 | 第44-45页 |
| ·斑点叉尾鮰 LEAP2 成熟肽级结构的氨基酸序列分析及与其他生物的比较 | 第45-46页 |
| ·基于 LEAP2 氨基酸序列的分子系统树分析 | 第46页 |
| ·重组融合表达质粒的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| ·mLEAP2 在 E.coli BL21(DE3)中的融合表达 | 第47-48页 |
| ·表达产物的纯化及肠激酶切后成熟肽的释放 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 斑点叉尾鮰 MLEAP2 真核表达载体的构建 | 第52-58页 |
| ·材料与方法 | 第52-53页 |
| ·添加酶切位点的 mLEAP2 片段重新克隆 | 第52页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·结果 | 第53-56页 |
| ·mLEAP2 片段的重新克隆 | 第53-54页 |
| ·重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
