摘要 | 第1-10页 |
文献综述 | 第10-18页 |
1. 马立克氏病概述 | 第10-13页 |
·鸡马立克氏病的发生 | 第10页 |
·鸡马立克氏病病原学概述 | 第10-11页 |
·病毒形态结构 | 第10-11页 |
·病毒血清学及分类 | 第11页 |
·病毒组基因构成及主要相关蛋白质 | 第11-13页 |
·Meq结构与功能 | 第11-12页 |
·VP22蛋白结构与功能 | 第12-13页 |
·MDV的感染过程 | 第13页 |
2. 药用植物丹参概述 | 第13-15页 |
·丹参的主要活性成分及药理作用 | 第13-14页 |
·抗肿瘤作用 | 第13-14页 |
·抗氧化作用 | 第14页 |
·抗炎作用 | 第14页 |
·丹参酮ⅡA磺酸钠的主要药理作用 | 第14-15页 |
·治疗心血管疾病 | 第15页 |
·降低细胞色素氧化酶的活性 | 第15页 |
·抗病毒活性 | 第15页 |
3. 中药抗病毒机理概述 | 第15-18页 |
·直接杀灭病毒途径 | 第15-16页 |
·阻止病毒的吸附和侵入 | 第16页 |
·抑制生物大分子的合成 | 第16页 |
·阻断病毒的装配和释放 | 第16-17页 |
·调节免疫系统发挥抗病毒作用 | 第17-18页 |
前言 | 第18-19页 |
试验部分 | 第19-47页 |
1. 试验材料 | 第19-21页 |
·试验主要试剂及材料 | 第19页 |
·试验试剂的配置 | 第19-21页 |
·主要仪器及设备 | 第21页 |
2. 试验方法 | 第21-33页 |
·细胞制备 | 第21-22页 |
·胚胎的选择及剪碎 | 第22页 |
·消化及终止消化 | 第22页 |
·计数及接种培养 | 第22页 |
·MDV病毒 | 第22-23页 |
·MDV的扩增 | 第22页 |
·MDV的收集 | 第22-23页 |
·病毒滴度测定 | 第23页 |
·试验药物 | 第23页 |
·重组质粒的制备 | 第23-27页 |
·Meq基因和UL49基因引物的设计 | 第23-24页 |
·细胞培养物总DNA的提取 | 第24页 |
·PCR体系构建 | 第24-25页 |
·Meq和UL49目的基因片段的回收 | 第25页 |
·Meq和UL49目的片段的克隆 | 第25-26页 |
·重组质粒的提取及浓度的测定 | 第26-27页 |
·MDV载量变化的检测 | 第27-28页 |
·样品的准备 | 第27页 |
·荧光定量PCR检测MDV载量的变化 | 第27-28页 |
·不同浓度的STS对MDV的抑制率 | 第28页 |
·Meq基因和UL49基因表达变化的检测 | 第28-30页 |
·样品的准备 | 第28-29页 |
·病毒核酸水平的检测 | 第29页 |
·病毒转录水平的检测 | 第29-30页 |
·western blot分析 | 第30-32页 |
·总蛋白样品的制备 | 第30页 |
·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30-31页 |
·转膜 | 第31页 |
·封闭与杂交 | 第31-32页 |
·蛋白检测 | 第32页 |
·间接免疫荧光试验 | 第32页 |
·数据统计分析 | 第32-33页 |
3. 结果 | 第33-44页 |
·病毒滴度测定结果 | 第33-34页 |
·重组质粒制备结果 | 第34-36页 |
·普通PCR产物检测结果 | 第34页 |
·产物的回收及重组质粒 | 第34-35页 |
·Meq和UL49标准曲线的建立 | 第35页 |
·Meq和UL49标准品扩增曲线和溶解曲线 | 第35-36页 |
·MDV载量变化的检测结果 | 第36-37页 |
·荧光定量PCR结果 | 第36-37页 |
·STS对MDV载量的抑制率结果 | 第37页 |
·Meq和UL49表达变化的检测结果 | 第37-42页 |
·核酸水平Meq和UL49表达变化的检测结果 | 第37-39页 |
·转录水平Meq和UL49表达变化的检测结果 | 第39-42页 |
·VP22蛋白表达的测定结果 | 第42-44页 |
4. 分析与讨论 | 第44-46页 |
·STS具有抗病毒功效 | 第44页 |
·荧光定量PCR特异性引物的选择 | 第44-45页 |
·两种加药方式的比较 | 第45页 |
·Meq和UL49呈现相似的变化规律 | 第45页 |
·STS对MDV抑制细胞凋亡的影响 | 第45-46页 |
·STS对MDV复制的影响 | 第46页 |
5. 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
Abstract | 第52-54页 |
致谢 | 第54页 |