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丹参酮ⅡA磺酸钠体外抗鸡马立克氏病毒分子机制的研究

摘要第1-10页
文献综述第10-18页
 1. 马立克氏病概述第10-13页
   ·鸡马立克氏病的发生第10页
   ·鸡马立克氏病病原学概述第10-11页
     ·病毒形态结构第10-11页
     ·病毒血清学及分类第11页
   ·病毒组基因构成及主要相关蛋白质第11-13页
     ·Meq结构与功能第11-12页
     ·VP22蛋白结构与功能第12-13页
   ·MDV的感染过程第13页
 2. 药用植物丹参概述第13-15页
   ·丹参的主要活性成分及药理作用第13-14页
     ·抗肿瘤作用第13-14页
     ·抗氧化作用第14页
     ·抗炎作用第14页
   ·丹参酮ⅡA磺酸钠的主要药理作用第14-15页
     ·治疗心血管疾病第15页
     ·降低细胞色素氧化酶的活性第15页
     ·抗病毒活性第15页
 3. 中药抗病毒机理概述第15-18页
   ·直接杀灭病毒途径第15-16页
   ·阻止病毒的吸附和侵入第16页
   ·抑制生物大分子的合成第16页
   ·阻断病毒的装配和释放第16-17页
   ·调节免疫系统发挥抗病毒作用第17-18页
前言第18-19页
试验部分第19-47页
 1. 试验材料第19-21页
   ·试验主要试剂及材料第19页
   ·试验试剂的配置第19-21页
   ·主要仪器及设备第21页
 2. 试验方法第21-33页
   ·细胞制备第21-22页
     ·胚胎的选择及剪碎第22页
     ·消化及终止消化第22页
     ·计数及接种培养第22页
   ·MDV病毒第22-23页
     ·MDV的扩增第22页
     ·MDV的收集第22-23页
     ·病毒滴度测定第23页
   ·试验药物第23页
   ·重组质粒的制备第23-27页
     ·Meq基因和UL49基因引物的设计第23-24页
     ·细胞培养物总DNA的提取第24页
     ·PCR体系构建第24-25页
     ·Meq和UL49目的基因片段的回收第25页
     ·Meq和UL49目的片段的克隆第25-26页
     ·重组质粒的提取及浓度的测定第26-27页
   ·MDV载量变化的检测第27-28页
     ·样品的准备第27页
     ·荧光定量PCR检测MDV载量的变化第27-28页
     ·不同浓度的STS对MDV的抑制率第28页
   ·Meq基因和UL49基因表达变化的检测第28-30页
     ·样品的准备第28-29页
     ·病毒核酸水平的检测第29页
     ·病毒转录水平的检测第29-30页
   ·western blot分析第30-32页
     ·总蛋白样品的制备第30页
     ·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第30-31页
     ·转膜第31页
     ·封闭与杂交第31-32页
     ·蛋白检测第32页
   ·间接免疫荧光试验第32页
   ·数据统计分析第32-33页
 3. 结果第33-44页
   ·病毒滴度测定结果第33-34页
   ·重组质粒制备结果第34-36页
     ·普通PCR产物检测结果第34页
     ·产物的回收及重组质粒第34-35页
     ·Meq和UL49标准曲线的建立第35页
     ·Meq和UL49标准品扩增曲线和溶解曲线第35-36页
   ·MDV载量变化的检测结果第36-37页
     ·荧光定量PCR结果第36-37页
     ·STS对MDV载量的抑制率结果第37页
   ·Meq和UL49表达变化的检测结果第37-42页
     ·核酸水平Meq和UL49表达变化的检测结果第37-39页
     ·转录水平Meq和UL49表达变化的检测结果第39-42页
   ·VP22蛋白表达的测定结果第42-44页
 4. 分析与讨论第44-46页
   ·STS具有抗病毒功效第44页
   ·荧光定量PCR特异性引物的选择第44-45页
   ·两种加药方式的比较第45页
   ·Meq和UL49呈现相似的变化规律第45页
   ·STS对MDV抑制细胞凋亡的影响第45-46页
   ·STS对MDV复制的影响第46页
 5. 全文结论第46-47页
参考文献第47-52页
Abstract第52-54页
致谢第54页

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