| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-26页 |
| ·产肠毒素大肠杆菌研究概述 | 第12-13页 |
| ·病原 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13页 |
| ·仔猪发生ETEC性腹泻的症状 | 第13页 |
| ·产肠毒素大肠杆菌主要致病因子及其致病机理 | 第13-17页 |
| ·菌毛黏附素 | 第14-15页 |
| ·肠毒素 | 第15-16页 |
| ·ETEC的致病机理 | 第16-17页 |
| ·ETEC疫苗的研究进展 | 第17-25页 |
| ·全菌疫苗 | 第17-18页 |
| ·菌毛疫苗 | 第18页 |
| ·肠毒素疫苗 | 第18-19页 |
| ·基因工程疫苗 | 第19-21页 |
| ·新型非注射黏膜免疫疫苗 | 第21-25页 |
| ·本研究的目的意义及主要工作 | 第25-26页 |
| 2 大连得胜地区致仔猪腹泻大肠杆菌类型分析 | 第26-39页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·实验材料及设备 | 第26-29页 |
| ·样品采集 | 第26页 |
| ·菌种 | 第26-27页 |
| ·药品试剂 | 第27页 |
| ·试剂配方 | 第27-28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·工具器械 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·腹泻仔猪便样的采集 | 第29页 |
| ·大肠杆菌的分离筛选与纯培养 | 第29页 |
| ·大肠杆菌类型的PCR鉴定 | 第29-31页 |
| ·实验结果 | 第31-37页 |
| ·大肠杆菌的分离筛选及纯培养 | 第31-32页 |
| ·肠毒素基因的PCR检测 | 第32-34页 |
| ·菌毛类型的PCR检测 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 3 重组三价肠毒素及菌毛多价复合疫苗的研制 | 第39-59页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·实验材料及设备 | 第39-43页 |
| ·菌种 | 第39-40页 |
| ·药品试剂 | 第40页 |
| ·试剂配方 | 第40-42页 |
| ·仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·重组三价肠毒素蛋白的诱导表达、提取、纯化及条件优化 | 第43-45页 |
| ·多种菌毛蛋白的表达、提取及纯化 | 第45页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第45-46页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第46-47页 |
| ·重组三价肠毒素及菌毛多价复合疫苗的制备 | 第47-48页 |
| ·本地菌株全菌灭活苗的制备 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-57页 |
| ·SLS诱导表达及提纯的SDS-PAGE检测 | 第48-50页 |
| ·菌毛蛋白提纯的SDS-PAGE检测 | 第50-54页 |
| ·蛋白浓度的确定 | 第54-56页 |
| ·灭活菌液无菌检验 | 第56页 |
| ·大肠杆菌对数生长期菌液浓度与OD_(600)值标准曲线 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 4 疫苗安全性及免疫效力实验的评价 | 第59-75页 |
| ·前言 | 第59页 |
| ·实验材料及设备 | 第59-61页 |
| ·试验动物 | 第59页 |
| ·药品试剂 | 第59-60页 |
| ·试剂配方 | 第60页 |
| ·仪器 | 第60页 |
| ·工具器械 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-65页 |
| ·疫苗安全性检测 | 第61页 |
| ·妊娠母猪免疫 | 第61-62页 |
| ·免疫后母猪血清和母乳样品采集和处理 | 第62页 |
| ·产后仔猪被动免疫效力检测 | 第62-64页 |
| ·免疫血清和乳清抗体效价检测 | 第64-65页 |
| ·实验结果 | 第65-73页 |
| ·免疫后母猪生长状况 | 第65-66页 |
| ·疫苗安全性检测 | 第66页 |
| ·临床仔猪被动免疫效果 | 第66-68页 |
| ·特异性抗体效价检测 | 第68-73页 |
| ·讨论 | 第73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 附录A 免疫及采血等操作示范 | 第84-86页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |