| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·益生菌的概述 | 第12-15页 |
| ·益生菌的定义及分类 | 第12页 |
| ·益生菌的研究现状 | 第12-13页 |
| ·益生菌的作用机理及应用 | 第13-15页 |
| ·乳酸菌的黏附作用研究进展 | 第15-20页 |
| ·乳酸菌概述 | 第15-16页 |
| ·乳酸菌对人体的益生作用 | 第16-17页 |
| ·乳酸菌的作用机理 | 第17-19页 |
| ·乳酸菌的黏附性研究意义及进展 | 第19-20页 |
| ·乳酸菌的黏附作用机理 | 第20-26页 |
| ·乳酸菌类黏附机制 | 第20-22页 |
| ·肠液黏蛋白模型 | 第22页 |
| ·肠道中参与黏附的受体 | 第22-23页 |
| ·黏附的生物学效应 | 第23页 |
| ·乳酸菌黏附作用的特点 | 第23-24页 |
| ·乳酸菌黏附实验方法 | 第24-26页 |
| ·研究思路及研究内容 | 第26-28页 |
| ·研究思路 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 植物乳杆菌ZJ316的酵母凝集试验和自身表面性质的测定 | 第28-36页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·菌种 | 第29页 |
| ·主要试剂与培养基 | 第29页 |
| ·主要设备与仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·菌种的活化培养 | 第29-30页 |
| ·菌悬液的制备 | 第30-31页 |
| ·细菌表面性质的测定 | 第31页 |
| ·乳酸菌自聚合能力的测定 | 第31页 |
| ·酵母凝集度的测定 | 第31-32页 |
| ·数据分析 | 第32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-35页 |
| ·乳酸菌表面性质 | 第32页 |
| ·乳酸菌的自聚合能力 | 第32-33页 |
| ·乳酸菌对酿酒酵母的凝结能力 | 第33-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 植物乳杆菌ZJ316黏附基因slp2588A、muc2486A的分子克隆 | 第36-53页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·主要试剂与培养基 | 第36页 |
| ·载体及菌株 | 第36-37页 |
| ·主要仪器与设备 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-46页 |
| ·黏附基因的选择和引物的设计 | 第38-39页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316的活化、培养 | 第39页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316基因组的提取和电泳检测 | 第39-40页 |
| ·PCR扩增DNA片段及电泳检测 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第42页 |
| ·连接 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的转化 | 第43页 |
| ·转化子的筛选及菌种保藏 | 第43-44页 |
| ·重组子的鉴定：质粒的提取及酶切、电泳检测 | 第44-46页 |
| ·扩增片段基因的测序与序列分析 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-51页 |
| ·slp2588A和muc2486A基因片段的扩增 | 第46-47页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第47页 |
| ·阳性转化子的筛选及重组子的鉴定 | 第47-50页 |
| ·扩增片段的基因序列测序 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 植物乳杆菌ZJ316黏附基因slp2588A、muc2486A原核表达载体的构建与表达及功能研究 | 第53-79页 |
| ·实验材料 | 第54-56页 |
| ·主要试剂与培养基 | 第54页 |
| ·基因工程载体及菌株 | 第54-55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·主要仪器与设备 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-64页 |
| ·大肠杆菌原核表达载体的构建 | 第56-61页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)的诱导表达 | 第61-62页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白表达形式的鉴定 | 第63页 |
| ·包含体获得以及酵母凝集实验 | 第63-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-78页 |
| ·PCR扩增基因片段及pET-28a质粒的提取 | 第64-66页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第66-67页 |
| ·目的片段及pET-28a质粒沉淀回收 | 第67-68页 |
| ·阳性转化子的筛选及重组子的鉴定 | 第68-71页 |
| ·表达载体BL21(DE3)中阳性转化子的筛选 | 第71-72页 |
| ·重组体的测序结果 | 第72-73页 |
| ·SDS-PAGE | 第73-74页 |
| ·重组蛋白表达形式的鉴定 | 第74-76页 |
| ·包含体的酵母凝集实验 | 第76-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 第五章 结论 | 第79-81页 |
| ·总结 | 第79-80页 |
| ·展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-93页 |
| 附录A 部分培养基配方 | 第93-94页 |
| 附录B 部分有机化学试剂配方 | 第94-96页 |
| 附录C 测序结果 | 第96-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
