| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-24页 |
| ·运动发酵单胞菌研究进展 | 第9-15页 |
| ·运动发酵单胞菌的工业应用价值 | 第9页 |
| ·运动发酵单胞菌的菌体特性 | 第9-11页 |
| ·运动发酵单胞菌代谢途径研究进展 | 第11-14页 |
| ·运动发酵单胞菌基因组尺度研究进展 | 第14页 |
| ·运动发酵单胞菌基因工程改造的研究进展 | 第14-15页 |
| ·Real-time qPCR 技术 | 第15-22页 |
| ·转录水平的研究 | 第15-16页 |
| ·Real-time qPCR 原理及应用现状 | 第16-18页 |
| ·内参基因的选择 | 第18-21页 |
| ·数据处理 | 第21-22页 |
| ·本课题的研究目的及研究内容 | 第22-24页 |
| ·研究目的 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-39页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·实验仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·菌种培养及保存 | 第25页 |
| ·运动发酵单胞菌的生长 | 第25-26页 |
| ·RNA 样本的分离纯化 | 第26-28页 |
| ·cDNA 样本的制备 | 第28-29页 |
| ·标准品的制备 | 第29-30页 |
| ·候选内参基因和目的基因的筛选及引物合成 | 第30-36页 |
| ·Real-time qPCR 扩增 | 第36页 |
| ·HLPC 法测定运动发酵单胞菌发酵液组分 | 第36-37页 |
| ·数据处理 | 第37-39页 |
| ·内参基因的确定 | 第37页 |
| ·各基因转录水平的计算 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-79页 |
| ·Real-time qPCR 体系优化结果 | 第39-46页 |
| ·运动发酵单胞菌 ZM4 生长曲线 | 第39页 |
| ·运动发酵单胞菌 ZM4 菌体个数与 OD600的关系 | 第39-40页 |
| ·单位体积 TRIzol 裂解细胞数目的确定 | 第40页 |
| ·RNA 及 cDNA 样本质量评估 | 第40-44页 |
| ·引物退火温度优化及产物特异性分析 | 第44-46页 |
| ·内参基因的确定 | 第46-54页 |
| ·候选内参基因在不同样本中的表达结果 | 第46-48页 |
| ·内参基因的筛选 | 第48-54页 |
| ·主碳代谢途径基因在不同生长时期转录水平的研究 | 第54-64页 |
| ·主碳代谢途径基因标准曲线 | 第54-55页 |
| ·主碳代谢途径基因在不同生长阶段的转录水平 | 第55-57页 |
| ·主碳代谢途径基因间在不同生长阶段的相对转录水平 | 第57-64页 |
| ·野生型 ZM4 与突变型 ZM4(gfo::FRT)菌株在不同碳源及不同糖浓度生长时主碳代谢途径基因转录水平及发酵产物分析 | 第64-79页 |
| ·实验条件 | 第65页 |
| ·ZM4 及 ZM(gfo::FRT)在不同碳源及不同糖浓度中生长曲线 | 第65-67页 |
| ·ZM4 和 ZM4(gfo::FRT)在不同碳源不同糖浓度中发酵分析 | 第67-70页 |
| ·ZM4 和 ZM4(gfo::FRT)在不同生长条件下的 RNA 样本 | 第70-71页 |
| ·内参基因稳定性评价 | 第71-73页 |
| ·ZM4 和 ZM4(gfo::FRT)在不同碳源不同糖浓度中转录水平 | 第73-79页 |
| 第四章 结论与展望 | 第79-80页 |
| ·结论 | 第79页 |
| ·展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-93页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
