| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·林可霉素及其产生菌 | 第10-12页 |
| ·林可霉素及其衍生物 | 第10-11页 |
| ·林可霉素产生菌 | 第11-12页 |
| ·林可霉素生物合成 | 第12-20页 |
| ·林可霉素生物合成基因簇 | 第12-14页 |
| ·PPL 的生物合成 | 第14-15页 |
| ·MTL 的生物合成 | 第15-16页 |
| ·PPL 与 MTL 的缩合 | 第16页 |
| ·抗性基因 | 第16-17页 |
| ·调控基因 | 第17-20页 |
| ·链霉菌转化技术 | 第20-21页 |
| ·原生质体转化 | 第20页 |
| ·接合转移 | 第20-21页 |
| ·本文主要研究内容和意义 | 第21-23页 |
| ·主要研究内容 | 第21页 |
| ·研究意义 | 第21-23页 |
| 第二章 林可链霉菌菌丝结合转移方法的建立与优化 | 第23-40页 |
| ·材料与方法 | 第23-34页 |
| ·菌种与质粒 | 第23页 |
| ·实验仪器与实验试剂 | 第23-25页 |
| ·大肠杆菌感受态制备与转化 | 第25-27页 |
| ·质粒操作 | 第27-29页 |
| ·PCR 操作 | 第29-30页 |
| ·林可链霉菌的培养 | 第30-31页 |
| ·林可链霉菌基因操作 | 第31-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-39页 |
| ·穿梭质粒 pUWL201apr 的构建 | 第34-35页 |
| ·菌丝体培养基的优化 | 第35-36页 |
| ·菌丝体生长时间的优化 | 第36-37页 |
| ·结合转移固体培养基的优化 | 第37-38页 |
| ·供体细胞数的优化 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 林可霉素生物合成的基因调控 | 第40-57页 |
| ·材料与方法 | 第40-47页 |
| ·菌种与质粒 | 第40页 |
| ·实验仪器与实验试剂 | 第40-41页 |
| ·基因敲除载体的构建方法 | 第41-42页 |
| ·基因敲除菌株的筛选方法 | 第42-43页 |
| ·基因敲除菌株的 PCR 验证方法 | 第43页 |
| ·林可链霉菌发酵培养 | 第43-44页 |
| ·发酵液高效液相色谱（HPLC）测定方法 | 第44页 |
| ·林可链霉菌 RNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·第一链 cDNA 合成 | 第45页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第45-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-56页 |
| ·基因敲除载体的构建 | 第47-50页 |
| ·敲除菌株的获得与 PCR 验证 | 第50-51页 |
| ·LmbU、lmbD、lmbV 敲除菌株的发酵 | 第51-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 林可霉素生物合成中 lmbW 基因的功能研究 | 第57-70页 |
| ·材料与方法 | 第57-59页 |
| ·菌种与质粒 | 第57页 |
| ·实验仪器与实验试剂 | 第57页 |
| ·LmbW 基因敲除载体的构建方法 | 第57-58页 |
| ·LmbW 基因过表达载体的构建方法 | 第58-59页 |
| ·林可链霉菌菌浓测定 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-68页 |
| ·LmbW 基因敲除载体的构建 | 第59-62页 |
| ·LmbW 基因敲除菌株的获得与 PCR 验证 | 第62页 |
| ·S. lincolnensis EDLW 菌株的发酵 | 第62-65页 |
| ·LmbW 基因过表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·LmbW 基因过表达对林可霉素发酵的影响 | 第66-68页 |
| ·本章小结 | 第68-70页 |
| 第五章 林可霉素生物合成途径改造 | 第70-81页 |
| ·材料与方法 | 第70-72页 |
| ·菌种与质粒 | 第70页 |
| ·实验仪器与实验试剂 | 第70页 |
| ·林可霉素生物合成基因簇中关键基因过表达载体的构建方法 | 第70-71页 |
| ·metK 基因过表达与 vgb 外源基因表达载体的构建方法 | 第71-72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-79页 |
| ·林可霉素生物合成基因簇关键基因过表达载体的构建 | 第72-73页 |
| ·林可霉素生物合成基因簇关键基因过表达菌株的发酵 | 第73-75页 |
| ·metK 基因过表达与 vgb 外源基因表达 | 第75-79页 |
| ·本章小结 | 第79-81页 |
| 第六章 结论与展望 | 第81-83页 |
| ·结论 | 第81页 |
| ·展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
