| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 插图和附表清单 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-29页 |
| ·石斛属植物概况 | 第12-13页 |
| ·植物AP2/EREBP家族转录因子 | 第13-27页 |
| ·AP2/EREBP家族转录因子的结构特点 | 第13-14页 |
| ·AP2/EREBP家族转录因子的分类 | 第14页 |
| ·AP2亚族转录因子的特点与功能 | 第14-18页 |
| ·ERF亚族转录因子的特点与功能 | 第18-21页 |
| ·DREB亚族转录因子的特点与功能 | 第21-25页 |
| ·RAV亚族转录因子的特点与功能 | 第25-26页 |
| ·其他类转录因子的特点与功能 | 第26-27页 |
| ·本研究内容及意义 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-45页 |
| ·研究材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·酶与试剂 | 第29页 |
| ·溶液配制 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第30页 |
| ·研究方法 | 第30-45页 |
| ·文库筛选 | 第30页 |
| ·石斛总RNA提取 | 第30-31页 |
| ·石斛总RNA的纯化 | 第31页 |
| ·5'RACE法快速扩增cDNA5'端 | 第31-35页 |
| ·凝胶回收目的条带 | 第35页 |
| ·连接反应 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备(CaCl_2) | 第36页 |
| ·热激转化 | 第36页 |
| ·PCR检测 | 第36-37页 |
| ·全长cDNA合成 | 第37页 |
| ·PhusionTM超保真DNA聚合酶扩增目的基因 | 第37-38页 |
| ·目的基因PCR产物纯化 | 第38页 |
| ·BP反应 | 第38-39页 |
| ·转化 | 第39页 |
| ·质粒提取 | 第39-40页 |
| ·LR反应 | 第40页 |
| ·T_0代拟南芥培养 | 第40页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·电激转化 | 第41-42页 |
| ·农杆菌浸染拟南芥 | 第42页 |
| ·T_1代拟南芥培养 | 第42-43页 |
| ·CTAB法提取T_1代拟南芥DNA | 第43页 |
| ·T_2代拟南芥培养 | 第43页 |
| ·叶绿素提取实验 | 第43-44页 |
| ·实时定量PCR分析基因表达情况 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-70页 |
| ·石斛总RNA的提取结果 | 第45页 |
| ·5'RACE法克隆基因5'端片段 | 第45-48页 |
| ·5'RACE的引物设计 | 第46-47页 |
| ·5'RACE法获得目的基因的5'端片段 | 第47页 |
| ·目的基因的5'端片段阳性克隆鉴定 | 第47-48页 |
| ·目的基因全长cDNA序列的获得 | 第48-53页 |
| ·克隆目的基因cDNA序列的引物设计 | 第48页 |
| ·高保真酶扩增得到TEREB5的cDNA | 第48-49页 |
| ·TEREB5 cDNA的阳性克隆鉴定 | 第49-50页 |
| ·TEREB5的cDNA序列分析 | 第50-51页 |
| ·TEREB5的系统进化 | 第51-53页 |
| ·TEREB5转录因子AP2/EREBP保守结构域分析 | 第53页 |
| ·TEREB5超表达载体和RNA干涉载体的构建 | 第53-58页 |
| ·BP反应 | 第54-55页 |
| ·TEREB5超表达载体构建 | 第55-56页 |
| ·TEREB5 RNA干涉载体构建 | 第56-58页 |
| ·转基因拟南芥的获得与分子鉴定 | 第58-60页 |
| ·T_1代拟南芥阳性植株的筛选 | 第58-59页 |
| ·T_2代拟南芥阳性植株的筛选 | 第59-60页 |
| ·转基因拟南芥的功能初步分析 | 第60-70页 |
| ·转基因拟南芥的表型分析 | 第60-64页 |
| ·TEREB5的基因表达分析 | 第64-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| ·石斛TEREB5的基因克隆和序列分析 | 第70-71页 |
| ·TEREB5转基因拟南芥的表型分析 | 第71页 |
| ·TEREB5转基因拟南芥的基因表达分析 | 第71-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |